本发明涉及免疫治疗领域，具体地涉及一种修饰的细胞如嵌合抗原受体t细胞及其制备方法和用途。
背景技术：
1、嵌合抗原受体t细胞(chimeric antigen receptor t cell，car t)疗法是一种通过对t细胞进行基因改造以实现肿瘤靶向杀伤的免疫治疗技术。目前car t疗法在肿瘤或癌症，特别是在白血病治疗中取得了惊人的效果，许多白血病患者在其帮助下完全恢复健康。
2、然而car t疗法依然面临极大的挑战。以b系淋巴细胞白血病为例，临床试验表明，超过30％的患者治疗后出现了靶点抗原cd19表达降低，极大地限制了car t的疗效。因此促进car t对低靶点白血病细胞的识别与杀伤是增强car t疗效的关键。
3、背景技术中的信息仅仅在于说明本发明的总体背景，不应视为承认或以任何形式暗示这些信息构成本领域一般技术人员所公知的现有技术。
技术实现思路
1、为解决现有技术中的至少部分技术问题，本发明设计了一种疏水性二维片层材料修饰的细胞，如car t。在某些实施方案中，其相较于单纯的car t，能够与更多的白血病细胞结合，增强car t的识别与杀伤。此外，纳米材料较高的比表面积为药物的装载提供了空间，进而能够实现car t与其他疗法的联合治疗。具体地，本发明包括以下内容。
2、本发明的第一方面，提供一种修饰的细胞，其包括细胞和位于细胞的疏水性二维片层材料，其中所述片层材料的粒径为10-2000nm。
3、在某些实施方案中，根据本发明所述的修饰的细胞，其中，所述疏水性二维片层材料包括纳米无机材料，所述纳米无机材料选自碳单质材料及其氧化物、氮化碳和二硫化钼组成的组中的至少之一。
4、在某些实施方案中，根据本发明所述的修饰的细胞，其中，所述纳米无机材料具有50-900nm的粒径。
5、在某些实施方案中，根据本发明所述的修饰的细胞，其中，所述纳米无机材料具有10％-50％的氧化度。
6、在某些实施方案中，根据本发明所述的修饰的细胞，其中，所述细胞为免疫细胞、如t细胞、dc细胞等，并且至少一部分所述纳米无机材料位于所述细胞如嵌合抗原受体t细胞的细胞膜或细胞膜内。
7、本发明的第二方面，提供一种修饰的细胞的制备方法，其包括以下步骤：
8、(1)将疏水性二维片层材料分散于水中，然后进行破碎；
9、(2)分离具有固定粒径分布的纳米材料，并与细胞共混孵育，随后去除游离的疏水性二维片层材料，其中所述疏水性二维片层材料的粒径为10-2000nm。
10、在某些实施方案中，根据本发明所述的修饰的细胞的制备方法，其中，所述疏水性二维片层材料包括纳米无机材料，所述纳米无机材料选自碳单质材料及其氧化物、氮化碳和二硫化钼组成的组中的至少之一。
11、在某些实施方案中，根据本发明所述的修饰的细胞的制备方法，其中，所述纳米无机材料具有50-900nm的粒径。
12、在某些实施方案中，根据本发明所述的修饰的细胞的制备方法，其中，所述纳米无机材料具有10％-50％氧化度。
13、在某些实施方案中，根据本发明所述的修饰的细胞的制备方法，其中，步骤(1)中，所述疏水性二维片层材料的浓度为0.01-10g/ml。
14、在某些实施方案中，根据本发明所述的修饰的细胞的制备方法，其中，所述疏水性二维片层材料与细胞共混比例为(1-20)μg：(1×106-2×106)个细胞。
15、本发明的第三方面，提供一种在体外增加、促进或增强细胞间作用力的方法，其包括使第一细胞与第二细胞彼此靠近并接触的步骤，其中，所述第一细胞为第一方面所述的修饰的细胞如嵌合抗原受体t细胞，所述第二细胞为异常增生或增殖的细胞。
16、本发明的第四方面，提供一种体外增强细胞膜流动性的方法，其包括将疏水性二维片层材料与细胞如嵌合抗原受体t细胞接触的步骤，其中所述疏水性二维片层材料的粒径为10-2000nm。
17、在某些实施方案中，根据本发明所述的方法，其中，所述疏水性二维片层材料包括纳米无机材料，所述纳米无机材料选自碳单质材料及其氧化物、氮化碳和二硫化钼组成的组中的至少之一。
18、在某些实施方案中，根据本发明所述的方法，其中，所述纳米材料具有50-900nm的粒径。
19、在某些实施方案中，根据本发明所述的方法，其中，所述纳米材料具有10％-50％的氧化度。
20、本发明的第五方面，提供第一方面所述的修饰的细胞，如免疫细胞特别是t细胞，如嵌合抗原受体t细胞在用于制备以下药物中的用途，其中，所述药物包括：
21、(1)改善、缓解或治疗细胞异常增生或增殖相关的肿瘤的药物；
22、(2)增加、促进、激活或活化免疫细胞ifnγ和颗粒酶b的阳性比率的药物；
23、(3)增加或促进异常增生或增殖的细胞的裂解的药物；
24、(4)降低或减少异常增生或增殖的细胞比例的药物；
25、(5)增加、促进、激活或活化嵌合抗原受体t细胞对低表达抗原的识别的药物。
26、本发明的第六方面，提供一种改善、缓解或治疗细胞异常增生或增殖相关的肿瘤的药物组合物，其中，所述药物组合物包括第一方面所述的修饰的细胞。
27、在某些实施方案中，根据本发明所述的药物组合物，其中，所述药物组合物进一步包括用于联合给药的治疗剂。
28、在某些实施方案中，根据本发明所述的药物组合物，其中，所述治疗剂包括免疫检查点抑制剂、抗体治疗药物、化学药物、杂类药物、烷化剂、抗代谢药、抗肿瘤抗生素、激素类药物、免疫调节剂或抗微生物剂。
29、本发明发现疏水性二维片层材料能够促进细胞对靶细胞，如car t细胞对白血病细胞的识别，其原因不清楚，可能在于疏水性二维片层材料通过范德华力和疏水作用力而插入car t和白血病细胞的细胞膜内，由此增强细胞间的作用力。此外，在本发明的纳米无机材料具有较大的比表面积，能够高效装载药物，从而实现car t与免疫检查点阻断的联合治疗。
1.一种修饰的细胞，其特征在于，包括细胞和位于所述细胞的疏水性二维片层材料，其中所述片层材料的粒径为10-2000nm。
2.根据权利要求1所述的修饰的细胞，其特征在于，所述疏水性二维片层材料包括纳米无机材料。
3.根据权利要求2所述的修饰的细胞，其特征在于，所述纳米无机材料选自碳单质材料及其氧化物、氮化碳和二硫化钼组成的组中的至少之一。
4.根据权利要求3所述的修饰的细胞，其特征在于，所述细胞为免疫细胞，且至少一部分所述纳米无机材料位于所述细胞的细胞膜或位于细胞膜内。
5.一种修饰的细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，所述疏水性二维片层材料的浓度为0.01-10g/ml；
7.一种增加、促进或增强细胞间作用力的方法，其特征在于，包括使第一细胞与第二细胞彼此靠近并接触的步骤，其中，所述第一细胞为权利要求1-4任一项所述的修饰的细胞，所述第二细胞为异常增生或增殖的细胞。
8.一种增强细胞膜流动性的方法，其特征在于，包括将疏水性二维片层材料与细胞接触的步骤，其中所述疏水性二维片层材料的粒径为10-2000nm；
9.根据权利要求1-4任一项所述的修饰的细胞在用于制备以下药物中的用途，其特征在于，所述药物包括：
10.一种改善、缓解或治疗受试者中细胞异常增生或增殖相关的肿瘤的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括权利要求1-4任一项所述的修饰的细胞；
