本发明涉及日化品刺激性试验，具体涉及一种油溶性物质刺激性测试用溶剂、用途及鸡胚绒毛尿囊膜试验受试样品。
背景技术：
1、随着以替代、减少和优化为核心的“3r”运动的发展及检测评估手段的丰富化和现代化，越来越多的替代试验逐步取代动物试验应用于化学品和化妆品的毒性检测，体外方法也被广泛用于日化产品的功效评测。非整体动物的实验系统来源多样，包括离体器官(如牛角膜、鸡眼、兔眼和离体皮肤)、低等生物(如线虫、蛞蝓、四膜虫)、类器官(如鸡胚、鱼胚胎)、细胞(如各种原代细胞和细胞系)和重组三维人体组织(如重建角膜、3d皮肤)。鸡胚囊绒毛膜(chicken chorioallantoic membrane.cam)是简单、高度血管化的胚胎外膜，在胚胎生长期间发挥着多种作用，其易于观察、容易获得且生长迅速等优点为研究血管功能提供了便利。
2、如现有技术1：中国专利申请201710368626.1公开了一种利用鸡胚血管系统检测和评价结膜刺激性及粘膜刺激性的方法，包含以下步骤：(1)绒毛尿囊膜的制备；(2)结膜刺激试验；(3)粘模刺激试验；(4)预测模型和分类；该方法就是采用鸡胚绒毛尿囊膜进行刺激试验，从而了解化学品或化妆品等物质结膜刺激性和粘膜刺激性。
3、鸡胚包括4层胚膜(卵黄囊膜、羊膜、浆膜、尿囊膜)和2套血管网(卵黄嘉血管网、尿喜膜浆膜血管网)。尿绒毛膜的形成方式与哺乳类尿喜相似，由尿事腔迅速增大至胚外体腔并包围羊膜，之后尿囊外壁与绒毛膜紧贴形成尿囊绒毛膜。cam组织结构有3层:外胚层，位于壳膜下方，由绒毛膜上皮组成:中胚层，富含毛细血管的结缔组织，不成熟的血管散布于中胚层；内胚层，位于尿喜由尿膜内皮形成。cam是一个体外呼吸器官，最初没有血管，随之迅速长出丰富血管丛，具有动脉和静脉，不成熟的毛细血管从覆盖在绒毛上皮细胞表面。cam的生长从胚胎发育3d后开始，仅13d就完全分化，其细胞周期生长短，细胞分裂比较快。cam模型相比其他体内模型，在研究血管形成和血管生物学方面具有多重优点，其中最显著的优点是容易获取并且生长迅速。cam可以从一个没有血管的细胞膜在短时间内生长成薄层透明的组织，而仅需要7d密集的血管网就覆盖了蛋壳内层，并且这些血管的生长蕴含了大量与生长所需的相关信息。另外，cam模型同样适用于研究细胞因子、激素或者药物、组织移植、分离细胞或者组织单因素暴露的病理学过程。随着对于脉管系统的介人、标记和荧光成像技术的发展，更多的应用领域被开发出来。例如研究老可以获得从微观成像、磁共振(mri)到正电子发射层析成像(pet)的高分辨率图像，用于研究血管发生及干预研究在移植研究方面，由于cam免疫系统发展进程缓慢，只有在15d胚龄才发挥生理活性，因此可用于异种基因组织移的研究。通常基于cam的实验费用较低，实验周期短。
4、鸡胚绒毛尿囊膜试验目前有一个缺陷，其尿囊绒毛膜是一种呼吸膜，包围在鸡胚周围，具有亲水性，因此对于水溶性的物质较易渗入与其内的血管进一步发生反应，从而较真实的反应眼刺激情况，但是对于油溶性的物质，基本停留尿囊绒毛膜表面，很难渗入其内与其发生作用，对于油溶性样品的评估会出现假阴性等情况，不利于产品的开发，不能真实反应样品的眼刺激性。
5、所以本发明所要解决的技术问题是：如何寻找一种油溶性物质刺激性测试用溶剂，从而可以使得油溶性的化妆品或化学品可以采用鸡胚绒毛尿囊膜试验进行准确的刺激性评价。
技术实现思路
1、本发明的目的之一在于，提供一种油溶性物质刺激性测试用溶剂，其能够用于稀释和溶解油溶性物质，得到的液体具有极好的透明度且能够渗入鸡胚绒毛尿囊膜内的血管进一步发生反应，可用于鸡胚绒毛尿囊膜试验，并且该溶剂不会对鸡胚绒毛尿囊膜产生影响，有效提高鸡胚绒毛尿囊膜试验的评价准确度。
2、本发明另一目的在于，提供一种油溶性物质刺激性测试用溶剂的用途，用于制备油溶性物质的鸡胚绒毛尿囊膜试验受试样品可以有效用于鸡胚绒毛尿囊膜试验，提高鸡胚绒毛尿囊膜试验的评价准确度。
3、同时，本发明还提供了一种鸡胚绒毛尿囊膜试验受试样品，通过油溶性物质和油溶性物质刺激性测试用溶剂特定比例的配置，可以确保鸡胚绒毛尿囊膜试验的准确度。
4、为实现上述目的，本发明提供了一种油溶性物质刺激性测试用溶剂，包括吐温80和生理盐水，所述吐温80和生理盐水的体积比为1-4：1-4。
5、基于鸡胚绒毛尿囊膜试验的结果观察血管和(或)毛细血管的出血情况、大和中等大的血管的凝血状态、血管融解情况，因此鸡胚绒毛尿囊膜试验对试验样品的透明程度要求较高，而油溶性物质由于其溶解性问题，制备试验样品后很难渗入鸡胚绒毛尿囊膜内部的血管，反应不真实且由于油溶性物质本身可能比较浑浊使得鸡胚绒毛尿囊膜的出血、凝血、血管融解情况难以清晰地观察得到，从而影响了鸡胚绒毛尿囊膜试验的刺激性评价准确程度；而如果采用常规的溶剂来溶解油溶性物质制备试验样品会有三个方面的问题：
6、(1)溶剂难以携带油溶性物质渗入鸡胚绒毛尿囊膜内血管进一步反应，鸡胚绒毛尿囊膜刺激性的评价结果不准确；
7、(2)溶剂本身的透明程度较低，其虽然溶解了油溶性物质，但是鸡胚绒毛尿囊膜的出血、凝血、血管融解情况并不能清晰观察得到，影响了鸡胚绒毛尿囊膜试验的刺激性评价准确程度；
8、(3)溶剂本身的透明程度高，但是溶剂本身具有刺激性，容易使得鸡胚绒毛尿囊膜出现出血、凝血、血管融解等情况，影响了最终油溶性物质刺激性的判断。
9、因此本发明采用吐温80与生理盐水的混合，有效溶解油溶性物质并携带油溶性物质进入鸡胚绒毛尿囊膜内血管的同时还能够提供足够的透明度，让鸡胚绒毛尿囊膜试验的出血、凝血、血管融解情况能够清晰观察出来，并且基于吐温80和生理盐水的特定比例的复配，有效避免溶剂本身对鸡胚绒毛尿囊膜产生刺激影响评价结果。
10、本发明还提供了一种油溶性物质刺激性测试用溶剂用于制备油溶性物质的鸡胚绒毛尿囊膜试验受试样品的用途。
11、同时本发明提供了一种鸡胚绒毛尿囊膜试验受试样品，包括油溶性物质和上述的油溶性物质刺激性测试用溶剂，所述油溶性物质与油溶性物质刺激性测试用溶剂的体积比为1：1。
12、优选的，在本发明的鸡胚绒毛尿囊膜试验受试样品中，所述吐温80和生理盐水的体积比为1-2：1-2。
13、当吐温80的用量过低时，油溶性物质并没有完全溶解停留在鸡胚绒毛尿囊膜表面，影响结果观察；而当吐温80的用量过高时，溶剂的成本提高，并且产生了轻微刺激性，从而影响了整个鸡胚绒毛尿囊膜试验的结果。
14、本发明通过限定油溶性物质和上述的油溶性物质刺激性测试用溶剂的比例，可以最大化鸡胚绒毛尿囊膜试验的准确程度。
15、有益效果
16、与现有技术相比，本发明至少具备以下优势：
17、(1)本发明公开了一种油溶性物质刺激性测试用溶剂，通过吐温80这种两性溶剂复配特定比例的生理盐水，使得油溶性物质能够溶解并充分渗透到鸡胚绒毛尿囊膜内血管产生真实的反应，提高了鸡胚绒毛尿囊膜试验结果的准确度；
18、(2)本发明公开的油溶性物质刺激性测试用溶剂可以用于多种不同类型的油溶性物质，适用性高，具有极好的应用前景；
19、(3)本发明提供了一种鸡胚绒毛尿囊膜试验受试样品，通过限定油溶性物质和油溶性物质刺激性测试用溶剂的比例，有效确保油溶性物质能够渗入鸡胚绒毛尿囊膜内血管充分反应的同时，其透明度能够使得鸡胚绒毛尿囊膜的出血、凝血、血管融解情况清晰地表现出来观察得到，提高了鸡胚绒毛尿囊膜刺激性试验的准确度。
1.一种油溶性物质刺激性测试用溶剂，其特征在于，包括吐温80和生理盐水，所述吐温80和生理盐水的体积比为1-4：1-4。
2.一种如权利要求1所述的油溶性物质刺激性测试用溶剂用于制备油溶性物质的鸡胚绒毛尿囊膜试验受试样品的用途。
3.一种鸡胚绒毛尿囊膜试验受试样品，其特征在于，包括油溶性物质和权利要求1所述的油溶性物质刺激性测试用溶剂，所述油溶性物质与油溶性物质刺激性测试用溶剂的体积比为1：1。
