本发明涉及一种多肽类化合物、含其的药物组合物及其应用。
背景技术：
1、碳酸酐酶ⅸ(ca ix)是碳酸酐酶家族的异构体之一，是一种新型的肿瘤相关抗原，可以作为肿瘤细胞特异性的生物标志物，同时，ca ix与肿瘤的乏氧密切相关，作为一种肿瘤乏氧的标志物，在调节细胞增殖和肿瘤形成中具有潜在作用。ca ix的表达受缺氧调节，在正常组织中，ca ix不表达或表达极低，而在肿瘤(如：结肠癌、肾细胞癌、子宫颈癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌、卵巢癌等)组织中会过量表达(niemela am,et al.cancer epidemiolbiomarkers prev,2007,16:1760-1766.woelber l,kress k,kersten j f,etal.carbonic anhydrase ix in tumor tissue and sera of patients with primarycervical cancer[j].bmc cancer,2011,11:1-10.)。ca ix作为人类肿瘤的预后因子，在宫颈癌、肺癌和乳腺癌等癌症中，表达越高则预后越差。而在晚期肾细胞癌中，较低的ca ix表达水平预示着较差的生存率(ilie m,mazure n m,hofman v,et al.high levels ofcarbonic anhydrase ix in tumour tissue and plasma are biomarkers of poorprognostic in patients with non-small cell lung cancer[j].british journal ofcancer,2010,102(11):1627-35.kon-no h,ishii g,nagai k,et al.carbonic anhydraseix expression is associated with tumor progression and a poor prognosis oflung adenocarcinoma[j].lung cancer,2006,54(3):409-18.)。
2、ca ix与肿瘤发生、发展、转移和治疗效果之间存在密切关系，是一个非常具有前景的肿瘤显像和靶向治疗的生物标志物。因此，研究制备对ca ix具有特异性的放射性影像探针，通过核医学显像无创、方便的实现对肿瘤的早期诊断、准确分期、监测复发和转移，协助确定肿瘤治疗方案，对于提高肿瘤治疗的效果和降低死亡率具有重要的现实意义和应用价值。
3、目前已有的针对ca ix靶点报道的放射性药物很少，且已报道的放射性药物的方法效果并不理想，其主要问题在于反应产物得率较低，并且反应时间很长(mercier f,paris j,kaisin g et al bioconjugate chem.2011,22,108–114general method forlabeling sirna by click chemistry with fluorine-18for the purpose of petimaging；inkster ja,adam mj,storr t et al nucleosides nucleotides nucleicacids.2009nov；28(11):1131-43labeling of an antisense oligonucleotide with[(18)f]fpy5yne)，体内外稳定性差。并且现有文献报道125i标记的与本发明产品结构类似化合物在血清中孵育1.5小时就有50％的分解(askoxylakis v,garcia-boy r,rana s,etal.a new peptide ligand for targeting human carbonic anhydrase ix,identifiedthrough the phage display technology[j].plos one,2010,5:e15962.)；现有文献报道18f标记的与本发明产品结构类似化合物该探针存在脏器部位高摄取、体内稳定性不够等缺陷(jia l,li x,cheng d,zhang l.fluorine-18click radiosynthesis and micropet/ct evaluation of a small peptide-a potential pet probe for carbonic anhydraseix.bioorg med chem.2019；27:785-789.一种18f标记的多肽化合物及其制备方法和应用，专利号：cn201510053912.x)。因此目前本领域尚缺少一种稳定标记多肽的方法和以ca ix为靶点的特异性的分子影像探针和治疗药物。
技术实现思路
1、本发明要解决的技术问题是克服现有的多肽类化合物结构单一的缺陷。为此，本发明提供了一种多肽类化合物、含其的药物组合物及其应用。所述的多肽类化合物体内外稳定性好，特异性佳，其可以诊断或治疗肿瘤。
2、本发明提供了一种如式i-1所示的多肽化合物或其药学上可接受的盐：
3、
4、其中，r1为含有诊断性放射性核素的基团；
5、l为c1～c10直链亚烷基、c2～c10支链亚烷基、如式2所示的片段、如式3所示的片段、如式4所示的片段或如式5所示的片段；
6、
7、n2为1-10的整数；n3为2-10的整数；所述的如式2所示的片段、所述的如式3所示的片段、所述的如式4所示的片段和所述的如式5所示的片段的a端与所述的r1连接；
8、nhvplspy为多肽asn-his-val-pro-leu-ser-pro-(d-tyr)；(asn为多肽的n端)
9、与asn中的α-氨基连接。
10、在某一方案中，如式i-1所示的多肽化合物或其药学上可接受的盐里，某些基团的定义如下所述，其余基团的定义其他任一方案所述(以下简称为“在某一方案中”)：
11、所述的r1由含诊断性放射性核素的离子与螯合基团组成，所述的含诊断性放射性核素的离子与所述的螯合基团螯合。
12、在某一方案中，所述的诊断性放射性核素为68ga、99mtc、18f、64cu、86y、90y、89zr或111in，优选68ga、99mtc、18f或64cu。
13、在某一方案中，所述的含诊断性放射性核素的离子为68ga3+、[99mtco]3+、99m[tccl]3+、[al18f]2+、64cu2+、86y3+、90y3+、89zr4+或111in3+，优选68ga3+、[99mtco]3+、99m[tccl]3+、[al18f]2+或64cu2+。
14、在某一方案中，所述的螯合基团为
15、在某一方案中，所述的r1为：
16、在某一方案中，所述的l为c1～c10直链亚烷基。
17、在某一方案中，所述的c1～c10直链亚烷基为如式1所示片段，其中n1为0～9，较佳地为0～3，例如n1＝0；
18、
19、在某一方案中，所述的c1～c10直链亚烷基为亚甲基。
20、在某一方案中，所述的如式i-1所示的多肽化合物为化合物a与所述的含诊断性放射性核素的离子(例如68ga3+、[99mtco]3+、99m[tccl]3+、[al18f]2+或64cu2+)螯合形成的化合物，所述的化合物a的结构如下任一所示：
21、
22、
23、在某一方案中，所述的如式i-1所示的多肽化合物为化合物a与68ga3+螯合形成的化合物，所述的化合物a如前所述。
24、在某一方案中，所述的如式i-1所示的多肽化合物为化合物a与99m[tccl]3+螯合形成的化合物，所述的化合物a如前所述。
25、在某一方案中，所述的如式i-1所示的多肽化合物为化合物a与[al18f]2+螯合形成的化合物，所述的化合物a如前所述。
26、在某一方案中，所述的如式i-1所示的多肽化合物为化合物a与64cu2+螯合形成的化合物，所述的化合物a如前所述。
27、在某一方案中，所述的如式i-1所示的多肽化合物为：
28、
29、
30、本发明还提供了一种如式i-2所示的多肽化合物或其药学上可接受的盐：
31、
32、其中，r2为含有治疗性放射性核素的基团，l的定义如上所述。
33、在某一方案中，所述的r2由含治疗性放射性核素的离子与螯合基团组成，所述的含治疗性放射性核素的离子与所述的螯合基团螯合。
34、在某一方案中，所述的治疗性放射性核素为177lu、188re、186re、211at、111in、153sm、67cu、225ac、213bi、212bi或212pb，优选177lu或188re。
35、在某一方案中，所述的含治疗性放射性核素的离子为177lu3+、[188reo]3+、[186reo]3+、211at3+、111in3+、153sm3+、67cu2+、225ac3+、213bi3+、212bi3+或212pb2+，优选177lu3+或[188reo]3+。
36、在某一方案中，r2中，所述的螯合基团为
37、在某一方案中，所述的r2为：
38、在某一方案中，所述的如式i-2所示的多肽化合物为化合物a与所述的含治疗性放射性核素的离子(例如177lu3+或[188reo]3+)螯合形成的化合物，所述的化合物a的结构如前所述。
39、在某一方案中，所述的如式i-2所示的多肽化合物为化合物a与177lu3+螯合形成的化合物，所述的化合物a如前所述。
40、在某一方案中，所述的如式i-2所示的多肽化合物为化合物a与[188reo]3+螯合形成的化合物，所述的化合物a如前所述。
41、在某一方案中，所述的如式i-2所示的多肽化合物为：
42、
43、
44、本发明还提供了一种多肽化合物或其药学上可接受的盐，所述多肽化合物为放射性核素标记的如式i-3所示的多肽化合物：
45、
46、其中，l’为c1～c10直链烷基、c2～c10支链烷基、如式2’所示的片段、如式3’所示的片段、如式4’所示的片段或如式5’所示的片段；
47、
48、
49、n2为1-10的整数；n3为2-10的整数；所述的如式2’所示的片段、所述的如式3’所示的片段、所述的如式4’所示的片段和所述的如式5’所示的片段的b端与nhvplspy连接；
50、nhvplspy为多肽asn-his-val-pro-leu-ser-pro-(d-tyr)；(asn为多肽的n端)
51、与asn中的α-氨基连接。
52、在某一方案中，所述的放射性核素为诊断性放射性核素(例如123i、125i或124i)或治疗性放射性核素(例如125i或131i)。
53、在某一方案中，所述的放射性核素连接在所述nhvplspy的his或d-tyr上。
54、在某一方案中，所述的l’为c1～c10直链亚烷基。
55、在某一方案中，所述的c1～c10直链烷基为如式1’所示片段，其中n1为0～9，较佳地为0～3，例如n1＝0；
56、
57、在某一方案中，所述的c1～c10直链烷基为甲基。
58、本发明还提供了一种上述的如式i-1所示的多肽化合物或上述的如式i-2所示的多肽化合物的制备方法，其包括下述步骤：在溶剂中，将含诊断性放射性核素的原料或含治疗性放射性核素的原料与如式ii所示的化合物进行反应，即可得如式i-1所示的多肽化合物或如式i-2所示的多肽化合物；
59、
60、其中，r’为螯合基团，l的定义如上所述。
61、在某一方案中，所述的螯合基团为
62、在所述的制备方法中，所述的溶剂为本领域常规，较佳地为选自水、生理盐水、磷酸盐缓冲溶液、乙酸盐缓冲溶液、酒石酸盐缓冲溶液、叔丁醇、dmf(n,n-二甲基甲酰胺)和dmso(二甲基亚砜)中的一种或多种。所述的溶剂的ph值为本领域常规，较佳地为3～6，更佳地为3.5～5.5。
63、在所述的制备方法中，所述的如式ii所示的多肽化合物在反应体系中的浓度为本领域常规，较佳地为1～200mg/l，更佳地为15～100mg/l。
64、在所述的制备方法中，所述的含诊断性放射性核素的原料或含治疗性放射性核素的原料在反应体系中的浓度为本领域常规，较佳地为0.1mci/ml～50mci/ml，更佳地为1mci/ml～20mci/ml，最佳地为2mci/ml～10mci/ml。
65、在所述的制备方法中，所述的反应的时间为本领域常规，较佳地为1～60min，更佳地为5～30min，最佳地为8～20min。
66、在所述的制备方法中，所述的反应的温度为本领域常规，可根据参与反应的如式ii所示的化合物的稳定性以及采用的反应溶剂体系的沸点适当调节温度，较佳地为25～200℃，更佳地为80～150℃。
67、在某一方案中，所述的制备方法还可以包括以下步骤：进一步分离纯化如式i-1所示的多肽化合物或如式i-2所示的多肽化合物，所述的分离纯化为本领域常规，较佳地为通过sep-pak c18柱纯化。
68、在某一方案中，所述的制备方法还可以包括以下步骤：将所述的分离纯化后的如式i-1所示的多肽化合物或如式i-2所示的多肽化合物经无菌滤膜过滤，用生理盐水或磷酸盐缓冲液稀释。
69、本发明还提供了一种如式ii所示的化合物，
70、
71、其中，r’为螯合基团，l的定义如上所述。
72、在某一方案中，所述的如式ii所示的化合物中，所述的螯合基团的定义可如前所述。
73、在某一方案中，所述的如式ii所示的化合物中，所述的螯合基团未与含诊断性放射性核素的离子或含治疗性放射性核素的离子螯合。
74、在某一方案中，所述的如式ii所示的化合物选自上述化合物a中的任一种。
75、本发明还提供了一种药物组合物，其包括如上述的如式i-1所示的多肽化合物或其药学上可接受的盐，和药用辅料。
76、在某一方案中，所述的药物组合物为用于诊断肿瘤的药物组合物。在某一方案中，所述的肿瘤为结肠癌、直肠癌、肾癌、子宫颈癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌或卵巢癌；较佳地为结肠癌或肾癌。
77、在某一方案中，所述的肿瘤为ca ix表达的肿瘤。
78、在某一方案中，所述的结肠癌为ca ix表达的结肠癌。
79、在某一方案中，所述的肾癌为ca ix表达的肾癌。
80、本发明还提供了一种药物组合物，其包括如上述的如式i-2所示的多肽化合物或其药学上可接受的盐，和药用辅料。
81、在某一方案中，所述的药物组合物为用于治疗肿瘤的药物组合物。
82、某一方案中，所述的肿瘤为结肠癌、直肠癌、肾癌、子宫颈癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌或卵巢癌；较佳地为结肠癌或肾癌。
83、在某一方案中，所述的肿瘤为ca ix表达的肿瘤。
84、在某一方案中，所述的结肠癌为ca ix表达的结肠癌。
85、在某一方案中，所述的肾癌为ca ix表达的肾癌。
86、本发明还提供了一种如上所述的如式i-1所示的多肽化合物或其药学上可接受的盐在制备用于诊断肿瘤的药物中的应用。
87、在某一方案中，所述的肿瘤为结肠癌、直肠癌、肾癌、子宫颈癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌或卵巢癌；较佳地为结肠癌或肾癌。
88、在某一方案中，所述的肿瘤为ca ix表达的肿瘤。
89、在某一方案中，所述的结肠癌为ca ix表达的结肠癌。
90、在某一方案中，所述的肾癌为ca ix表达的肾癌。
91、本发明还提供了一种如上所述的如式i-2所示的多肽化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗肿瘤的药物中的应用。
92、在某一方案中，所述的肿瘤为结肠癌、直肠癌、肾癌、子宫颈癌、乳腺癌、肺癌、胰腺癌或卵巢癌；较佳地为结肠癌或肾癌。
93、在某一方案中，所述的肿瘤为ca ix表达的肿瘤。
94、在某一方案中，所述的结肠癌为ca ix表达的结肠癌。
95、在某一方案中，所述的肾癌为ca ix表达的肾癌。
96、在不违背本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本发明各较佳实例。
97、本发明所用试剂和原料均市售可得。
98、本发明的积极进步效果在于：
99、1.本发明开发了新的靶向碳酸酐酶ix(ca ix)的高亲和力的多肽，可用于靶向caix。利用ca ix受体在结直肠癌、肾细胞癌、肝癌、乳腺癌、宫颈癌等多种肿瘤细胞中均有高表达，基于如式i所示的多肽化合物与ca ix特异性结合的原理，从而有望应用于结直肠癌、肾细胞癌、肝癌、乳腺癌、宫颈癌等多种肿瘤的早期诊断、预后评估、疗效检测和治疗。
100、2、本发明的放射性标记多肽制备方法简单，放射性化学产率高，反应时间短，易于商业化批量生产，更加适合放射药物临床应用。制备得到的放射性核素标记化合物放射化学纯度大于99％。
101、3、本发明所得到的放射性核素标记的多肽化合物结构稳定，体外未见分解，体内未见脱放射性核素现象。
102、4、本发明所得到的放射性标记多肽显像分辨率高，可以特异性的识别肿瘤组织，具有较高的肿瘤摄取和较高的肿瘤与肌肉摄取比，对结直肠癌和肾细胞癌具有优异的显像效果，应用范围广；部分多肽可以明显抑制肿瘤的生长。
103、5、本发明中所用到的盐酸、氯化钠等均为商品化试剂，原料廉价易得。
