本发明涉及果木脱毒快繁，特别是涉及一种百香果的脱毒培养基和脱毒方法。
背景技术：
1、百香果(passion fruit)，学名鸡蛋果(passiflora edulia sims)，为西番莲科西番莲属植物，是热带、亚热带多年生常绿藤本浆果类果树。由于百香果当年种，当年收，投产早，收益快；其越来越受广大种植户的欢迎。目前百香果种植面积已达几十万亩，产生了巨大的经济效益。在百香果种植过程中，病毒病一旦发生，将会严重降低产量，如西番莲木质化病毒会导致果实木质化，商品果减少；黄瓜花叶病毒和西番莲木质化病毒可以使植株叶片变黄、皱缩，整个植株长势下降、结果能力降低，严重影响产量。
2、例如，“台农1号”百香果目前在中国仍然是紫果型百香果的主栽品种，但是自其引种以来，不断的进行扦插和嫁接繁殖，其体内的病毒病积累严重，在种植过程中病毒病及其容易爆发。中国专利cn202010590046.9一种百香果脱毒快繁方法中报道了一种百香果脱毒快繁方法，虽然脱毒率高，但是先培养得到芽苗、再进行脱毒培养、恢复培养和继代增殖培养，操作繁琐，周期长。由于脱毒培养基直接关系着脱毒的效果，因此，改进脱毒培养基和脱毒方法十分必要。
技术实现思路
1、鉴于此，本发明提供了一种百香果的脱毒培养基和脱毒方法，百香果组培苗的脱毒率高，且操作简单，周期短。
2、为了解决上述技术问题，本发明提出了以下技术方案：
3、本发明提供了一种百香果的脱毒培养基，所述脱毒培养基以ms培养基为基本培养基，还包括：6-苄氨基嘌呤1.5～2.5mg/l、吲哚乙酸0.1～0.3mg/l、病毒唑20～30mg/l、蔗糖28～32g/l和琼脂3.3～3.7g/l。
4、本发明提供了一种百香果的脱毒方法，包括以下步骤：
5、将百香果外植体接种于上述技术方案所述的脱毒培养基中进行培养，得到百香果组培苗；
6、将所述百香果组培苗进行高温培养，得到高温苗；
7、将所述高温苗的茎尖接种于上述技术方案所述的脱毒培养基中进行茎尖脱毒培养，得到脱毒百香果组培苗。
8、优选的，所述高温培养的温度为34～36℃，时间为10～30d；光照时间为12h/d；光照强度为40μmol·m-2·s-1；培养湿度为80％。
9、优选的，所述培养和所述茎尖脱毒培养的温度均为28±3℃，光照时间均为12h/d，光照强度均为40μmol·m-2·s-1，培养湿度均为80％。
10、优选的，所述茎尖的长度为0.3～1.5mm。
11、优选的，所述培养的时间为20d；所述茎尖脱毒培养的时间为40d。
12、优选的，所述外植体包括茎段；所述茎段包括带腋芽茎段。
13、优选的，所述脱毒的病毒包括东亚西番莲病毒、黄瓜花叶病毒、夜来香花叶病毒和西番莲木质化病毒中的一种或多种。
14、本发明的有益效果：本发明提供了一种百香果的脱毒培养基，所述脱毒培养基以ms培养基为基本培养基，还包括：6-苄氨基嘌呤1.5～2.5mg/l、吲哚乙酸0.1～0.3mg/l、病毒唑20～30mg/l、蔗糖28～32g/l和琼脂3.3～3.7g/l。在本发明提供的脱毒培养基中，6-ba(6-苄氨基嘌呤)能够促进不定芽的形成；吲哚乙酸(iaa)能够促进不定芽的生长；病毒唑可以杀灭病毒或者抑制病毒的传播速度。本发明提供的脱毒培养基应用效果好，脱毒率高。
15、本发明还提供了一种百香果的脱毒方法，包括以下步骤：
16、将百香果外植体接种于上述技术方案所述的脱毒培养基中进行培养，得到百香果组培苗；将所述百香果组培苗进行高温培养，得到高温苗；剪下所述高温苗的茎尖，将所述茎尖接种于上述技术方案所述的脱毒培养基中进行茎尖脱毒培养，得到脱毒百香果组培苗。在脱毒培养基中培养一段时间后，组培苗进行高温培养；高温培养可以抑制病毒的传播。由于病毒的传播受到了抑制，茎尖中含有的病毒量急剧减少，最终剪切茎尖进行重新培养，即可获得百香果脱毒苗。本发明利用抗病毒药剂、高温处理和茎尖脱毒相结合的方法能够有效的对侵染百香果的东亚西番莲病毒、黄瓜花叶病毒、夜来香花叶病毒和西番莲木质化病毒进行去除，同时简化了脱毒方法，缩短了脱毒周期。在本发明的实施例中，以“台农1号”百香果组培苗(未脱毒)为对象，剪切茎段接种于含有抗病毒药剂(病毒唑，ribavirin)的脱毒培养基中，在光照培养箱中光照培养20d，随后高温培养，超过20d部分植株开始干枯死亡。以高温培养所得的组培苗为材料，剪切顶部长度为0.5～1.0mm的茎尖继续接种于含有抗病毒药剂的培养基中进行茎尖脱毒培养，培养40d的成活率高。最后以成活的个体为基数，剪切叶片进行主要病毒检测，百香果组培苗的脱毒率高。
1.一种百香果的脱毒培养基，其特征在于，所述脱毒培养基以ms培养基为基本培养基，还包括：6-苄氨基嘌呤1.5～2.5mg/l、吲哚乙酸0.1～0.3mg/l、病毒唑20～30mg/l、蔗糖28～32g/l和琼脂3.3～3.7g/l。
2.一种百香果的脱毒方法，其特征在于，包括以下步骤：
3.根据权利要求2所述的脱毒方法，其特征在于，所述高温培养的温度为34～36℃，时间为10～30d；光照时间为12h/d；光照强度为40μmol·m-2·s-1；培养湿度为80％。
4.根据权利要求2所述的脱毒方法，其特征在于，所述培养和所述茎尖脱毒培养的温度均为28±3℃，光照时间均为12h/d，光照强度均为40μmol·m-2·s-1，培养湿度均为80％。
5.根据权利要求2所述的脱毒方法，其特征在于，所述茎尖的长度为0.3～1.5mm。
6.根据权利要求2所述的脱毒方法，其特征在于，所述培养的时间为20d；所述茎尖脱毒培养的时间为40d。
7.根据权利要求2所述的脱毒方法，其特征在于，所述外植体包括茎段；所述茎段包括带腋芽茎段。
8.根据权利要求2～7任一项所述的脱毒方法，其特征在于，所述脱毒的病毒包括东亚西番莲病毒、黄瓜花叶病毒、夜来香花叶病毒和西番莲木质化病毒中的一种或多种。
