本发明涉及协同抗病毒的药物组合物。具体来说，该药物组合物含有天然产物黄芩素和核苷类似物吉西他滨。
背景技术：
1、由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus，pedv)感染而引起的猪流行性腹泻病(porcine epidemic diarrhea，ped)，是严重影响猪养殖业的具有经济重要性的肠道疾病。临床上，日龄较小的哺乳仔猪，一旦感染了pedv，常表现出严重腹泻、呕吐、脱水、消瘦等症状，死亡率高达80％以上；成年猪虽然在感染了pedv后未出现高死亡率，但感染后也会导致水样腹泻、食欲减退影响养殖效益；另外，哺乳母猪感染pedv后则会导致无乳，影响猪幼崽养育，而且pedv还会导致成年猪生殖功能受损，影响种苗繁育及猪养殖专业发展。
2、研究发现，ped全年都有可能发生，且pedv的传染能力强、潜伏时间短，猪群感染后2天左右就会出现临床症状；病毒也会在较短时间内传播扩散至整个猪群，导致病程长、防控难度大。另外，该病的发生还具有周期性，前期发病过的猪场会因为环境中存活的pedv，导致疫情在猪场内反复发作。以上特点使得猪场疫情持续时间较长，致使一些猪场出现无仔猪可养的状态，给养猪业带来了极大困扰和严重的经济损失。
3、目前，针对猪流行性腹泻病预防主要是通过ped疫苗。现有的ped相关疫苗种类较多，包括灭活疫苗、减毒活疫苗、核酸疫苗、亚单位疫苗、病毒样颗粒(vlp)疫苗、活载体疫苗等。然而，pedv属于冠状病毒科α冠状病毒属的rna病毒，具有较高的变异性，需要不断更新疫苗毒株以匹配流行毒株，且疫苗的免疫效果和安全性也需要进行谨慎的验证，疫苗的安全性及效价常难以达到防控效果。而针对ped的治疗上，一般地，采用补液、消炎、防脱水、避免继发感染等手段对症治疗不同阶段的患猪，不乏使用大量的抗生素，且难以有效抑制pedv在细胞中增殖，控制ped爆发；需要通过隔离、清栏、净化等手段控制pedv的传播。治疗效果滞后，防控措施复杂，效果不佳。因此，发掘潜在的抗pedv小分子抑制剂可能是防控ped的突破口。
4、黄芩素(baicalein)是从中药黄芩(scutellaria baicalensis georgi)中提取的黄酮类化合物，《本草纲目》中用黄芩治疗风热湿热、肺萎喉腥，通常被认为具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤和抗微生物活性等药理作用。现有技术中，中国专利文献cn116019805b公开汉黄芩素在抗猪流行性腹泻病毒中的应用，揭示了汉黄芩素通过靶向猪流行性腹泻病毒-3c样蛋白酶(pedv-3clpro)，能显著抑制猪流行性腹泻病毒的内化、胞内复制和新的成熟病毒粒子释放，还可以体外直接生物灭活猪流行性腹泻病毒。然而汉黄芩素(wogonin)与黄芩素各自具有不同的化学结构(如图1所示)和药理作用，黄芩素是一种5,6,7-三羟基黄酮，而汉黄芩素则是5,7-二羟基-8-甲氧基黄酮，黄芩素具有降低脑血管阻力、改善脑血循环、增加脑血流量及抗血小板凝集的作用，临床用于脑血管病后瘫痪的治疗，而汉黄芩素则具有解痉作用、抗癌作用以及利尿作用。因此，虽然汉黄芩素具有抑制猪流行性腹泻病毒及灭活猪流行性腹泻病毒的功能，然黄芩素是否具有同样的效力及抗毒原理均是未知的。
5、吉西他滨(gemcitabine)是一种胞嘧啶核苷酸的类似物，其结构如图2所示，一种有效的抗肿瘤药物，在多种癌症治疗中发挥着重要作用，临床上可应用于晚期胰腺癌、局部晚期和已有转移的四期非小细胞癌的治疗。现有技术中，核苷类似物用于猪流行性腹泻病的防治鲜少见于报道，中国专利文献cn115448924b公开核苷类似物或含有核苷类似物的组合制剂在抗病毒中的应用，涉及核苷类似物可作为猪流行性腹泻病毒(pedv)复制的抑制剂，然而其公布的这些核苷类似物并不包括吉西他滨，其作为抗代谢类化疗药物，是否也具有抗猪流行性腹泻病毒尚未有研究报道。
6、此外，中国专利文献cn113662953b公开阿糖腺苷在制备抗肿瘤化疗药物的耐药增敏剂中的应用，将抗病毒药物阿糖腺苷与抗肿瘤药物吉西他滨组合，糖腺苷是抗肿瘤药物的增敏剂或耐药逆转剂，以有效杀伤肿瘤细胞，为有效治疗肿瘤提供新的途径和手段。然而，将黄芩素与吉西他滨联合用药，来预防和/或治疗猪流行性腹泻病毒感染，却未见于报道，其二者的联合效果也亟需研究及验证。
技术实现思路
1、针对上述的黄芩素及吉西他滨是否具有对猪流行性腹泻病预防治疗效力，将黄芩素与吉西他滨联合用药对猪流行性腹泻病预防治疗效果如何等问题，本发明提供了黄芩素联合吉西他滨在制备抗猪流行性腹泻病毒药物中的应用，首次验证黄芩素和吉西他滨联合对猪流行性腹泻病具有良好的预防治疗效力，将二者联合用药可达到抑制pedv体外感染的作用，为pedv的抗病毒药物组合提供了另一种联合用药方案。
2、本发明目的之一是提供黄芩素(baicalein)联合吉西他滨(gemcitabine)在制备抗猪流行性腹泻病毒药物中的应用。
3、优选的，在联合药物中，所述黄芩素与吉西他滨的用量摩尔比为0.75～3:0.5～2。实验表明，所述黄芩素与吉西他滨的用量分别为0.75μmol/l、2μmol/l时联合使用对pedv抑制率可达54％，抑制效果均好于两个化合物单药而使用浓度低于各ec50值(吉西他滨ec50为3.14μmol/l，黄芩素ec50为5.01μmol/l)。且当吉西他滨浓度为0.5μm，黄芩素浓度为0.75μm时，二者的协同效应最优。
4、另外，本发明还有一个目的是提供一种用于预防和/或治疗猪流行性腹泻病毒感染的药物组合物，该组合物以所述的黄芩素与吉西他滨联合药物或其药学上可接受的盐为唯一有效成分，或是有效成分之一。
5、本发明的有益效果：
6、1)本发明首次验证了黄芩素和吉西他滨联合对猪流行性腹泻病具有良好的预防治疗效力；综合利用了细胞生物学和病毒学技术，首次发现黄芩素和吉西他滨二者联合用药可达到抑制pedv体外感染的作用，为pedv的抗病毒药物组合提供了另一种联合用药方案。
7、2)本发明通过细胞增殖周期实验首次揭示，黄芩素可以抑制pedv感染细胞的进入阶段，吉西他滨则作用于抑制pedv的复制阶段；两个化合物联合使用作用于pedv增殖的不同阶段进而发挥协同抗病毒效果。
8、3)本发明通过体外细胞实验证明黄芩素(baicalein)联合吉西他滨(gemcitabine)抑制pedv在细胞中增殖且效果明显高于单独用药，实验表明，黄芩素与吉西他滨的用量分别为0.75μmol/l、2μmol/l时联合使用对pedv抑制率可达54％，抑制效果均好于两个化合物单药而使用浓度低于各ec50值(吉西他滨ec50为3.14μmol/l，黄芩素ec50为5.01μmol/l)。且当吉西他滨浓度为0.5μm，黄芩素浓度为0.75μm时，二者的协同效应最优并。说明二者联合用药低剂量下都能达到很好的治疗效果，具有显著的协同增效作用。
9、4)本发明还发现baicalein和gemcitabine组合不仅疗效好，且具有毒性相对较小，安全浓度较高等优点，在制备预防和/或治疗猪流行性腹泻病毒药物中具有非常好的应用前景。
1.黄芩素联合吉西他滨在制备抗猪流行性腹泻病毒药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述黄芩素与吉西他滨的用量摩尔比为0.75～3:0.5～2。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述黄芩素与吉西他滨的用量摩尔比为0.75:0.5。
4.一种用于预防和/或治疗猪流行性腹泻病毒感染的药物组合物，其特征在于：该组合物以权利要求1或2或3所述的联合药物或其药学上可接受的盐为唯一有效成分，或是有效成分之一。
