本发明涉及生物医药和病毒学领域，具体涉及预防和/或治疗水痘-带状疱疹病毒感染的mrna疫苗和环状rna疫苗。
背景技术：
1、水痘-带状疱疹病毒(varicella zoster virus,vzv)是一种嗜神经人疱疹病毒，可引起2种不同的疾病，水痘和带状疱疹。初次感染水痘-带状疱疹病毒会导致水痘，之后此病毒会在人三叉神经和背根神经节中长期潜伏并且在生命后期再激活而引起急性感染性皮肤疾病，带状疱疹。带状疱疹发病率随着年龄增长而升高，40-50岁之后带状疱疹发病率达到5％以上，其中约9％-34％的带状疱疹患者会发生带状疱疹后神经痛，疼痛评级可达7级以上，属于重度疼痛，严重影响患者生活质量。带状疱疹和带状疱疹神经痛尚无特效药，因此接种带状疱疹疫苗是预防带状疱疹的有效手段。
2、目前，全球获批上市的带状疱疹疫苗有两款：默克公司生产的减毒活疫苗zostavax以及葛兰素史克(gsk)生产的重组亚单位佐剂疫苗欣安立适(shingrix)。而mrna疫苗由于可以将精确修饰的mrna分子送入细胞，具有可快速开发的特性，成为了近期研究的热点。其中，环状rna(circular rna，circrna)是一类以共价键形成闭合环状的rna结构，普遍存在于病毒和真核生物转录组中，由于其不含5'末端帽子和3'末端poly(a)尾巴，不易受rna外切酶影响，具有高稳定性。
3、水痘-带状疱疹病毒糖蛋白e(e蛋白，ge)为病毒包膜和感染细胞膜上含量最丰富的糖蛋白，具有促进病毒复制增殖以及介导病毒在细胞间传播的功能。ge蛋白为保守性抗原，抗原性稳定并且具有很强的免疫原性，是水痘-带状疱疹病疫苗主要针对的抗原。目前一些包含水痘-带状疱疹病毒糖蛋白e编码区的人用mrna疫苗正处于实验室或临床前研究阶段，如merck和moderna公司，但水痘-带状疱疹的防控仍然需要有效并且稳定的水痘-带状疱疹疫苗，水痘-带状疱疹环状rna疫苗也将为防控水痘-带状疱疹病提供新的技术手段。
技术实现思路
1、在第一方面，本发明提供一种多核苷酸，其包含编码水痘-带状疱疹病毒糖蛋白e或其免疫原性片段的编码区，其中所述糖蛋白e或其免疫原性片段包含seq id no:8的氨基酸序列或与seq id no:8的氨基酸序列具有至少95％相同性的氨基酸序列。
2、在一些实施方案中，所述多核苷酸为rna，其中所述编码区包含seq id no:2、3、4、5、6和7之一的核苷酸序列或与seq id no:2、3、4、5、6和7之一的核苷酸序列具有至少85％相同性的核苷酸序列。在一些实施方案中，所述多核苷酸为dna，其中所述编码区包含seqid no:19、20、21、22、23和24之一的核苷酸序列或与seq id no:19、20、21、22、23和24之一的核苷酸序列具有至少85％相同性的核苷酸序列。
3、在一些实施方案中，所述多核苷酸为rna，其包含seq id no:10、11、12、13、14和15之一的核苷酸序列或与seq id no:10、11、12、13、14和15之一的核苷酸序列具有至少85％相同性的核苷酸序列。在一些实施方案中，所述多核苷酸为dna，其包含seq id no:28、29、30、31、32和33之一的核苷酸序列或与seq id no:28、29、30、31、32和33之一的核苷酸序列具有至少85％相同性的核苷酸序列。
4、在第二方面，本发明提供一种线性多核苷酸，所述线性多核苷酸从5’端至3’端包含5’外部同源臂、3’内含子、3’外显子、5’间隔区、内部核糖体进入位点(ires)、编码区、3’间隔区、5’外显子、5’内含子和3’外部同源臂；其中，所述3’内含子和所述5’内含子分别包含天然固氮弧菌trna前体中内含子的3’端序列和5’端序列或其编码序列；其中，所述编码区编码水痘-带状疱疹病毒糖蛋白e或其免疫原性片段，所述糖蛋白e或其免疫原性片段包含seq id no:8的氨基酸序列或与seq id no:8的氨基酸序列具有至少95％相同性的氨基酸序列。
5、在一些实施方案中，所述线性多核苷酸为rna，其中所述编码区包含seq id no:2、4、5、6和7之一的核苷酸序列或与seq id no:2、4、5、6和7之一的核苷酸序列具有至少85％相同性的核苷酸序列。在一些实施方案中，所述线性多核苷酸为dna，其中所述编码区包含seq id no:19、21、22、23和24之一的核苷酸序列或与seq id no:19、21、22、23和24之一的核苷酸序列具有至少85％相同性的核苷酸序列。
6、在一些实施方案中，所述线性多核苷酸为rna，其包含seq id no:64、65、66、67和68之一的核苷酸序列或与seq id no:64、65、66、67和68之一的核苷酸序列具有至少85％相同性的核苷酸序列。在一些实施方案中，所述线性多核苷酸为dna，其包含seq id no:71、72、73、74和75之一的核苷酸序列或与seq id no:71、72、73、74和75之一的核苷酸序列具有至少85％相同性的核苷酸序列。
7、在第三方面，本发明提供一种环状rna多核苷酸，所述环状rna多核苷酸由本发明的线性多核苷酸产生。
8、在第四方面，本发明提供一种环状rna多核苷酸，其包含3’外显子、5’间隔区、内部核糖体进入位点(ires)、编码区、3’间隔区和5’外显子；任选地，所述环状rna多核苷酸还包含kozak序列；任选地，所述环状rna多核苷酸还包含5’内部同源臂和/或3’内部同源臂；其中所述3’外显子、5’内部同源臂、5’间隔区、内部核糖体进入位点(ires)、kozak序列、编码区、3’间隔区、3’内部同源臂和5’外显子各自本文所定义。
9、在第五方面，本发明还提供一种组合物，其包含本发明的多核苷酸、本发明的线性多核苷酸或者本发明的环状rna多核苷酸。
10、在一些实施方案中，所述组合物包含包封所述线性多核苷酸或者环状rna多核苷酸的脂质。在一些实施方案中，所述组合物包含脂质纳米颗粒或脂质多聚复合物。在一些实施方案中，包封所述多核苷酸、所述线性多核苷酸或者所述环状rna多核苷酸的脂质包含阳离子脂质、磷脂、类固醇和聚乙二醇修饰的脂质；任选地，所述组合物还包含阳离子聚合物，其中所述阳离子聚合物与所述线性多核苷酸或者环状rna多核苷酸缔合为复合物，共同包封在脂质中形成脂质多聚复合物。
11、在一些优选实施方案中，所述阳离子聚合物为鱼精蛋白。
12、在一些实施方案中，所述阳离子脂质包含式(i)的脂质化合物或其药学上可接受的盐，其如本文所限定。在一优选的实施方案中，所述阳离子脂质为sw-ii-140-2。
13、在一优选的实施方案中，所述组合物包含40摩尔％的阳离子脂质、15摩尔％的dope、43.5摩尔％的胆固醇和1.5摩尔％的dmg-peg。
14、在第六方面，本发明提供一种疫苗制剂，其包含本发明的多核苷酸、线性多核苷酸、环状rna多核苷酸或组合物。
15、在第七方面，本发明提供一种表达载体，其包含本发明的多核苷酸或者本发明的线性多核苷酸。
16、在第八方面，本发明提供一种宿主细胞，其包含本发明的多核苷酸、线性多核苷酸、环状rna多核苷酸或本发明的表达载体。
17、在第九方面，本发明提供本发明的多核苷酸、线性多核苷酸、环状rna多核苷酸、组合物或疫苗制剂在制备用于预防和/或治疗有需要的受试者的水痘-带状疱疹病毒感染的药物中的用途。
18、在第十方面，本发明提供一种用于预防和/或治疗有需要的受试者的水痘-带状疱疹病毒感染的方法，所述方法包括：给有需要的受试者施用本发明的多核苷酸、线性多核苷酸、环状rna多核苷酸、组合物或疫苗制剂。
19、在第十一方面，本发明提供本发明的多核苷酸、线性多核苷酸、环状rna多核苷酸、组合物或疫苗制剂，用于预防和/或治疗有需要的受试者的水痘-带状疱疹病毒感染。
20、在一些实施方案中，所述有需要的受试者为哺乳动物。在一优选实施方案中，所述受试者是人。
1.一种多核苷酸，其包含编码水痘-带状疱疹病毒糖蛋白e或其免疫原性片段的编码区，其中
2.权利要求1的多核苷酸，所述多核苷酸进一步包含5’-utr；和/或所述多核苷酸进一步包含3’-utr；
3.权利要求1或2的多核苷酸，所述多核苷酸进一步包含poly(a)序列；
4.权利要求1的多核苷酸，所述多核苷酸为rna，其包含seq id no:10、11、12、13、14和15之一的核苷酸序列或与seq id no:10、11、12、13、14和15之一的核苷酸序列具有至少85％相同性的核苷酸序列。
5.权利要求1的多核苷酸，所述多核苷酸为dna，其包含seq id no:28、29、30、31、32和33之一的核苷酸序列或与seq id no:28、29、30、31、32和33之一的核苷酸序列具有至少85％相同性的核苷酸序列。
6.一种线性多核苷酸，所述线性多核苷酸从5’端至3’端包含5’外部同源臂、3’内含子、3’外显子、5’间隔区、内部核糖体进入位点(ires)、编码区、3’间隔区、5’外显子、5’内含子和3’外部同源臂；
7.权利要求6的线性多核苷酸，
8.权利要求6或7的线性多核苷酸，其中所述3’外显子和所述5’外显子分别包含天然固氮弧菌trna前体中内含子的3’端序列和5’端序列紧邻的一段外显子序列或其编码序列。
9.权利要求6-8中任一项的线性多核苷酸，其中所述5’外部同源臂与所述3’外部同源臂的至少一部分序列是反向互补，以允许杂交发生。
10.权利要求6-9中任一项的线性多核苷酸，其中
11.权利要求6-10中任一项的线性多核苷酸，其中
12.权利要求6-11中任一项的线性多核苷酸，其中
13.权利要求6-12中任一项的线性多核苷酸，其中
14.权利要求6-13中任一项的线性多核苷酸，其中所述内部核糖体进入位点(ires)包含来自以下的ires序列：
15.权利要求14的线性多核苷酸，其中
16.权利要求6-15中任一项的线性多核苷酸，其中
17.权利要求6-16中任一项的线性多核苷酸，其中
18.权利要求6的线性多核苷酸，其为rna，其包含seq id no:64、65、66、67和68之一的核苷酸序列或与seq id no:64、65、66、67和68之一的核苷酸序列具有至少85％相同性的核苷酸序列。
19.权利要求6的线性多核苷酸，其为dna，其包含seq id no:71、72、73、74和75之一的核苷酸序列或与seq id no:71、72、73、74和75之一的核苷酸序列具有至少85％相同性的核苷酸序列。
20.一种环状rna多核苷酸，所述环状rna多核苷酸由权利要求6-19中任一项的线性多核苷酸产生。
21.一种环状rna多核苷酸，其包含3’外显子、5’间隔区、内部核糖体进入位点(ires)、编码区、3’间隔区和5’外显子；任选地，所述环状rna多核苷酸还包含kozak序列；任选地，所述环状rna多核苷酸还包含5’内部同源臂和/或3’内部同源臂；
22.权利要求21的环状rna多核苷酸，其中所述3’外显子包含seq id no:42的核苷酸序列，所述5’内部同源臂包含seq id no:50的核苷酸序列，所述5’间隔区包含seq id no:47的核苷酸序列，所述ires包含seq id no:49的核苷酸序列，所述kozak序列包含seq id no:78的核苷酸序列，所述编码区包含seq id no:2、4、5、6和7之一的核苷酸序列，所述3’间隔区包含seq id no:48的核苷酸序列，所述3’内部同源臂包含seq id no:51的核苷酸序列并且所述5’外显子包含seq id no:43的核苷酸序列。
23.一种组合物，其包含权利要求1-5中任一项的多核苷酸、权利要求6-19中任一项的线性多核苷酸或者权利要求20-22中任一项的环状rna多核苷酸。
24.权利要求23的组合物，其包含包封所述多核苷酸、所述线性多核苷酸或者所述环状rna多核苷酸的脂质。
25.权利要求23或24的组合物，其包含脂质纳米颗粒或脂质多聚复合物。
26.权利要求25的组合物，其中包封所述多核苷酸、所述线性多核苷酸或者所述环状rna多核苷酸的脂质包含阳离子脂质、磷脂、类固醇和聚乙二醇修饰的脂质；任选地，所述组合物还包含阳离子聚合物，其中所述阳离子聚合物与所述多核苷酸、所述线性多核苷酸或者所述环状rna多核苷酸缔合为复合物，共同包封在脂质中形成脂质多聚复合物；优选地，所述阳离子聚合物包含聚-l-赖氨酸、鱼精蛋白、聚乙烯亚胺(pei)或其组合；更优选地，所述阳离子聚合物为鱼精蛋白。
27.权利要求26的组合物，其中所述阳离子脂质包含式(i)的化合物，或其药学上可接受的盐
28.权利要求27的组合物，其中所述阳离子脂质包含具有如下所示结构的脂质化合物或其药学上可接受的盐：
29.权利要求26-28中任一项的组合物，其包含
30.一种疫苗制剂，其包含权利要求1-5中任一项的多核苷酸、6-19中任一项的线性多核苷酸、权利要求20-22中任一项的环状rna多核苷酸或者权利要求23-29中任一项的组合物。
31.一种表达载体，其包含权利要求1-5中任一项的多核苷酸或者权利要求6-19中任一项的线性多核苷酸。
32.一种宿主细胞，其包含权利要求1-5中任一项的多核苷酸、权利要求6-19中任一项的线性多核苷酸、权利要求20-22中任一项的环状rna多核苷酸或者权利要求31的表达载体。
33.权利要求1-5中任一项的多核苷酸、权利要求6-19中任一项的线性多核苷酸、权利要求20-22中任一项的环状rna多核苷酸、权利要求23-29中任一项的组合物或权利要求30的疫苗制剂在制备用于预防和/或治疗有需要的受试者的水痘-带状疱疹病毒感染的药物中的用途。
34.权利要求33的用途，其中所述受试者是哺乳动物；优选地，所述受试者是人。
