本发明属于食品监测，具体涉及一种快速检测干海参硫酸亚铁着色的方法。
背景技术：
1、鲜活海参具有自溶现象，长期保存极其不易，除较少量生食外，国内大部分鲜活海参主要通过制成干海参等产品进行贮存和销售。干海参由于制备工艺的不同颜色差距很大，虽然颜色和质量之间没有必然的联系，但消费者普遍更加青睐偏黑色的海参。有些商家为了追求利润，会在海参加工时采用添加硫酸亚铁的方法将海参进行染色处理，存在极大的安全隐患，并且严重扰乱了正常的海参市场。
2、但是，由于海参本身总铁含量较高且地区间差异较大，无法通过测定其总铁含量将海参中本身存在的铁与少量外源性添加的铁进行区分，但正常加工工艺制成的干海参中铁元素全部是以与蛋白等分子结合的有机铁形态存在，不存在无机形态的二价铁和三价铁，因此可以通过检测干海参中是否含有二价铁和三价铁来判断干海参加工过程是否使用硫酸亚铁进行着色。
3、食品安全国家标准中对于二价铁[fe(ii)]和三价铁[fe(iii)]的检测需要将样品中含有的三价铁还原为二价铁，再用硫酸铈滴定法测定出总的亚铁含量，与未还原前测定出的亚铁含量相减，求出样品中所含的三价铁。这一方法操作繁琐、费时费力且无法实现在线检测。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种快速检测干海参硫酸亚铁着色的方法，本发明提供的方法能够实现对干海参是否用硫酸亚铁着色进行在线检测和鉴别，检测方法简单易行，适宜推广使用。
2、为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
3、本发明提供了一种快速检测干海参硫酸亚铁着色的方法，包括以下步骤：
4、将干海参样品和提取剂混合，得到样品料液；所述提取剂包括吡啶二羧酸、氢氧化钾、亚硫酸钠、甲酸和水，所述提取剂中：吡啶二羧酸的摩尔浓度为6.5～7.5mmol/l，氢氧化钾的摩尔浓度为65～75mmol/l，亚硫酸钠的摩尔浓度为5.5～6.5mmol/l，甲酸的摩尔浓度为70～75mmol/l；
5、将所述样品料液固液分离，所得液相为样品溶液；
6、将所述样品溶液采用离子色谱和电感耦合等离子体质谱联用的方法进行检测，得到样品溶液的色谱图，根据fe(ii)的标准曲线或线性回归方程以及fe(iii)的标准曲线或线性回归方程由样品溶液的色谱图得到样品溶液中fe(ii)和fe(iii)的浓度；由所述样品溶液中fe(ii)和fe(iii)的浓度得到所述干海参样品中无机铁含量；由所述干海参样品中无机铁含量判断所述干海参样品硫酸亚铁着色情况。
7、优选的，所述离子色谱的条件包括：洗脱程序为等度洗脱；流动相包括吡啶二羧酸、氢氧化钾、亚硫酸钠、甲酸和水，所述流动相中：吡啶二羧酸的摩尔浓度为6.5～7.5mmol/l，氢氧化钾的摩尔浓度为65～75mmol/l，亚硫酸钠的摩尔浓度为5.5～6.5mmol/l，甲酸的摩尔浓度为70～75mmol/l；流动相的流速为0.9～1.1ml/min；进样体积为1.0～1.3μl；持续时间≥240s。
8、优选的，所述电感耦合等离子体质谱的条件包括：冷却气流量为14l/min，辅助气流量为0.8l/min，雾化气流量为1.01l/min，碰撞气流量为4.6l/min，驻留时间为100s，分析质量数57fe。
9、优选的，所述干海参样品和提取剂的用量比为1g：20ml。
10、优选的，所述混合在超声的条件下进行，所述混合的温度为室温，时间为20min。
11、优选的，所述固液分离包括以下步骤：
12、将所述样品料液离心分离，得到上清液；所述离心分离的转速为8000r/min，时间为15min；
13、将所述上清液用滤膜过滤，得到所述样品溶液；所述滤膜的孔径为0.45μm。
14、优选的，所述fe(ii)的标准曲线和fe(iii)的标准曲线的建立方法包括以下步骤：
15、将混合标准系列溶液采用离子色谱和电感耦合等离子体质谱联用的方法进行检测，得到混合标准系列溶液的色谱图；所述混合标准系列溶液为一系列已知浓度的fe(ii)和fe(iii)的混合液；
16、以混合标准系列溶液的fe(ii)的浓度为自变量，以混合标准系列溶液的色谱图中fe(ii)的色谱峰面积为因变量，得到所述fe(ii)的标准曲线；
17、以混合标准系列溶液的fe(iii)的浓度为自变量，以混合标准系列溶液的色谱图中fe(iii)的色谱峰面积为因变量，得到所述fe(iii)的标准曲线。
18、优选的，所述离子色谱和电感耦合等离子体质谱联用的方法采用离子色谱-电感耦合等离子体质谱联用仪进行。
19、优选的，所述干海参样品和提取剂混合之前，还包括：将所述干海参样品进行均质。
20、优选的，由所述样品溶液中fe(ii)和fe(iii)的浓度得到所述干海参样品中无机铁含量的计算公式如式1所示：
21、
22、式1中：x为干海参样品中按fe计无机铁的含量，单位为mg/kg；ρ为所述样品溶液中fe(ii)和fe(iii)的浓度之和，单位为mg/l；ρ0为空白溶液中fe(ii)和fe(iii)的浓度之和，单位为mg/l；v为所述样品溶液的体积，单位为ml；m为干海参样品的质量，单位为g。
23、本发明提供了一种快速检测干海参硫酸亚铁着色的方法，包括以下步骤：将干海参样品和提取剂混合，得到样品料液；所述提取剂包括吡啶二羧酸、氢氧化钾、亚硫酸钠、甲酸和水，所述提取剂中：吡啶二羧酸的摩尔浓度为6.5～7.5mmol/l，氢氧化钾的摩尔浓度为65～75mmol/l，亚硫酸钠的摩尔浓度为5.5～6.5mmol/l，甲酸的摩尔浓度为70～75mmol/l；将所述样品料液固液分离，所得液相为样品溶液；将所述样品溶液采用离子色谱和电感耦合等离子体质谱联用的方法进行检测，得到样品溶液的色谱图，根据fe(ii)的标准曲线或线性回归方程以及fe(iii)的标准曲线或线性回归方程由样品溶液的色谱图得到样品溶液中fe(ii)和fe(iii)的浓度；由所述样品溶液中fe(ii)和fe(iii)的浓度得到所述干海参样品中无机铁含量；由所述干海参样品中无机铁含量判断所述干海参样品硫酸亚铁着色情况。本发明建立了一种离子色谱-电感耦合等离子质谱(ics-icp-ms)联用检测干海参中铁元素不同形态的方法，由此判断干海参硫酸亚铁着色情况。本发明首先通过特定的提取剂对干海参样品进行提取，将干海参样品中的有机铁和无机铁(fe(ii)和fe(iii))提取至样品溶液中；然后样品溶液中不同形态的铁元素进行离子色谱分离，本发明通过离子色谱分离将样品溶液中不同形态的铁元素分离后通过电感耦合等离子体质谱进行在线检测，实现对干海参中不同形态铁元素的检测，从而对干海参是否用硫酸亚铁着色进行鉴别。所述干海参样品中无机铁含量为零时干海参未进行硫酸亚铁着色，所述干海参样品中无机铁含量不为零时干海参进行了硫酸亚铁着色。本发明提供的方法准确性高，简单易行，适宜推广使用。
1.一种快速检测干海参硫酸亚铁着色的方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述离子色谱的条件包括：洗脱程序为等度洗脱；流动相包括吡啶二羧酸、氢氧化钾、亚硫酸钠、甲酸和水，所述流动相中：吡啶二羧酸的摩尔浓度为6.5～7.5mmol/l，氢氧化钾的摩尔浓度为65～75mmol/l，亚硫酸钠的摩尔浓度为5.5～6.5mmol/l，甲酸的摩尔浓度为70～75mmol/l；流动相的流速为0.9～1.1ml/min；进样体积为1.0～1.3μl；持续时间≥240s。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述电感耦合等离子体质谱的条件包括：冷却气流量为14l/min，辅助气流量为0.8l/min，雾化气流量为1.01l/min，碰撞气流量为4.6l/min，驻留时间为100s，分析质量数57fe。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述干海参样品和提取剂的用量比为1g：20ml。
5.根据权利要求1或4所述的方法，其特征在于，所述混合在超声的条件下进行，所述混合的温度为室温，时间为20min。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述固液分离包括以下步骤：
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述fe(ii)的标准曲线和fe(iii)的标准曲线的建立方法包括以下步骤：
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述离子色谱和电感耦合等离子体质谱联用的方法采用离子色谱-电感耦合等离子体质谱联用仪进行。
9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述干海参样品和提取剂混合之前，还包括：将所述干海参样品进行均质。
10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，由所述样品溶液中fe(ii)和fe(iii)的浓度得到所述干海参样品中无机铁含量的计算公式如式1所示：
