本发明涉及病理学组织切片，具体为一种病理组织透明脱蜡液及其制备方法和应用。
背景技术：
1、组织石蜡切片是在观察组织形态和免疫组化等定性分析中最常用的一种切片技术，广泛应用于临床病理诊断和实验研究。组织经固定、脱水后，必须经过一种既能与乙醇相混合，又能溶解石蜡的溶剂，通过其媒介作用，使石蜡浸入组织块。在此过程中组织中的水分被溶剂取代，其折射指数接近组织蛋白的折射指数，组织块变得透明。组织经石蜡包埋后制成蜡块，用切片机制成切片后，需要将切片中的蜡脱去，才能进行染色。
2、目前在透明和脱蜡这两个程序中，使用最多的脱蜡透明剂主要是二甲苯，二甲苯也是病理组织制片过程中传统的组织透明剂，透明效果好，但在长期使用中，二甲苯通过呼吸道吸入或皮肤接触进入体内后，对人体有较大危害，二甲苯具有刺激性、易挥发，吸入后容易造成胸闷、呼吸困难等呼吸系统损伤，吸入高浓度的二甲苯会影响神经系统，且二甲苯会损伤血液系统，影响骨髓造血功能。另外二甲苯有一定的致癌性，长期接触可能诱发恶性肿瘤。被公认为有毒有害的化学品之一，对病理工作人员的身体健康产生严重危害和造成环境污染。
3、全自动免疫组化染色机专门用于免疫组化分析的设备，适用于常规染色和特异性染色。该机器可以实现对切片的固定、脱水、脱蜡、抗原修复、抗体染色和扫描等一系列处理步骤，全程自动化运行，操作简便快捷，准确度高、重复性好。但二甲苯对仪器有腐蚀性，无法在仪器上使用二甲苯脱蜡，因此降低了其自动化程度。其他环保透明脱蜡液存在易挥发或不能快速脱蜡的问题，另外，水性脱蜡液不能和乙醇互溶不能用于透明，烷烃类脱蜡液透明作用稍差，油性脱蜡液较粘稠不易清洗，均不能达到二甲苯的透明效果。
4、随着人们对环保、透明效果、脱蜡速度以及仪器自动化程度的要求越来越高，使用环保透明脱蜡液替代二甲苯脱蜡、透明是必然趋势。
5、(一)解决的技术问题
6、针对现有技术的不足，本发明提供了一种病理组织透明脱蜡液，毒性低、能够生物降解的病理组织透明脱蜡液，不含芳香族化合物，是一种环保的二甲苯替代品，不易挥发、脱蜡速度快且透明效果好。
7、(二)技术方案
8、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
9、本发明提供了一种病理组织透明脱蜡液，包括如下质量份数的组分：十六烷10～20份；石蜡油15～25份；植物油5～15份；直链醇40～50份。
10、优选的，所述植物油为大豆油、玉米油、葵花籽油、菜籽油、亚麻籽油、橄榄油中的一种或两种的混合物。
11、优选的，所述直链醇为己醇。
12、本发明还提供了一种病理组织脱蜡液的制备方法，包括如下步骤：
13、s1、称取上述质量份数的十六烷、石蜡油、植物油和直链醇；
14、s2、将步骤s1中称取的各组分加入到混合容器中，室温下进行混合均匀。
15、本发明还提供了一种病理组织脱蜡液在he染色中的应用。
16、应用上述所述的病理组织脱蜡液在he染色中的应用，包括如下步骤：
17、(1)将石蜡切片加热风干20～30min；
18、(2)脱蜡：将步骤(1)中风干的石蜡切片置于所述病理组织透明脱蜡液中脱蜡3次；
19、(3)脱水：在无水乙醇试剂、95％乙醇试剂和75％乙醇试剂中各脱水1次。
20、(4)水洗1min；
21、(5)苏木素染色液5min；
22、(6)水洗2min；
23、(7)分化液分化3～15s；
24、(8)水洗2min；
25、(9)反蓝液浸泡2min；
26、(10)水洗1min；
27、(11)95&乙醇处理1min；
28、(12)伊红染色液染色20～40s；
29、(13)水洗2min；
30、(14)95％乙醇试剂脱水30s，无水乙醇试剂脱水1min；
31、(15)透明：将染色完成酒精脱水后的病理组织放入所述的病理组织透明脱蜡液中，于室温下恒温浸泡1分钟，重复浸泡2次；
32、(16)中性树胶封固；
33、(17)镜检。
34、优选的，所述步骤(2)中每次脱蜡时间为5min，所述步骤(3)中无水乙醇试剂和95％乙醇试剂脱水时间为2min，75％乙醇试剂脱水时间为1min。
35、一种病理组织透明脱蜡液在自动化染色仪上脱蜡的应用，应用上述所述的病理组织透明脱蜡液在自动化染色仪上脱蜡，包括以下步骤：
36、将所述病理组织脱蜡液滴在切片上使其完全覆盖组织或细胞，70℃处理30s，去除切片表面的所述病理组织脱蜡液，滴加新的脱蜡液重复上述步骤2次，用无水乙醇试剂冲洗2次，最后用水冲洗。
37、(三)有益的技术效果
38、与现有技术相比，本发明具备以下实验原理和有益技术效果：
39、(1)本发明的病理组织透明脱蜡液无毒，无刺激性气味，十六烷和石蜡油对石蜡有较好的溶解性，脱蜡速度更快，且不易挥发，在高温下有更稳定的性质，即使加热也不会产生有害气体，不易对人体造成危害，并可生物降解。同时，本发明的病理组织透明脱蜡液既能用于透明，又能用于脱蜡。十六烷常被添加到护肤品中，对人体危害程度相对较低，与植物油搭配在组织中可达到更好的浸润程度，提高了透明效果。直链醇降低了油性试剂的粘稠度，增加了脱蜡液的极性，提高了脱蜡液与染色过程中使用的脱水剂、染液等含醇试剂的相融性。本发明的病例组织透明脱蜡液与组织的浸润程度高且粘稠度低，与二甲苯的透明、脱蜡效果相当，是临床上二甲苯的理想替代品。
40、(2)本发明的病理组织透明脱蜡液可以长时间浸泡病理组织，组织处理过程较温和、缓慢，不仅不易引起组织变形、硬化。
41、(3)病理组织切片经过本发明的病理组织透明脱蜡液脱蜡后进行伊红染色，组织细胞结构完好，核浆染色分明，透明效果好，符合临床病理诊断和研究所要求优质染色片的要求。
42、(4)切片经免疫组化自动染色仪的自动程序脱蜡染色，对仪器无腐蚀性，由于直链醇降低了油性实际的粘稠度，因此更易通过全自动免疫组化仪管路，脱蜡速度快且不易挥发，可完全适配于全自动免疫组化仪高温快速脱蜡程序，组织细胞结构完好，不会对组织细胞结构和组织细胞内其他成分以及组织抗原造成破坏，也能很好地将组织中的相应抗原特异地显示出来，没有非特异性染色。
技术实现思路
1.一种病理组织透明脱蜡液，其特征在于：包括如下质量份数的组分：十六烷10～20份；石蜡油15～25份；植物油5～15份；直链醇40～50份。
2.根据权利要求1所述的病理组织透明脱蜡液，其特征在于：所述植物油为大豆油、玉米油、葵花籽油、菜籽油、亚麻籽油、橄榄油中的一种或两种的混合物。
3.根据权利要求1所述的病理组织透明脱蜡液，其特征在于：所述直链醇为己醇。
4.一种病理组织脱蜡液的制备方法，其特征在于：用于制备权利要求1～3中任意一项所述的病理组织透明脱蜡液，包括如下步骤：
5.一种病理组织透明脱蜡液在he染色中的应用，其特征在于：应用权利要求1～3中任意一项所述的病理组织透明脱蜡液进行he染色，包括如下步骤：
6.根据权利5所述的病理组织脱蜡液在he染色中的应用，其特征在于：所述步骤(2)中每次脱蜡时间为5min，所述步骤(3)中无水乙醇试剂和95％乙醇试剂脱水时间为2min，75％乙醇试剂脱水时间为1min。
7.一种病理组织透明脱蜡液在自动化染色仪上脱蜡的应用，其特征在于：应用权利要求1～3中任意一项所述的病理组织透明脱蜡液在自动化染色仪上脱蜡，包括以下步骤：
