本发明涉及中药检测和质量控制领域，具体涉及一种中药或中药组合物制剂的特征图谱建立方法及应用。
背景技术：
1、中药具有多化学成分、多来源同时入药的特性，导致了中药药物的质量控制的复杂性；中药复方制剂，由多味中药药物组合而成，尤其处方药味超过二十味的中药大处方，不仅增加了中药成分复杂的分析难度，更使得在中药复方制剂成品中对各原料中药质量的控制成为技术难题，或只能简单控制其中某1个或2个指标性成分，难以对复方制剂质量进行整体控制。
2、中药特征图谱是一种综合的、可量化的质量检测方法，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于中药材以及中药制剂成品的定性、定量质量分析。建立合适的中药特征图谱，可通过对中药制剂特征性色谱峰的确定，以及多指标性成分的含量测定分析，对中药成品制剂进行质量控制，并通过中药成品制剂的质量表征结果，鉴别其中药制剂所用原料药材的真伪、优劣等质量特点。因此，中药特征图谱的研究和建立，对于保障中药质量、促进中药现代化具有重要意义。
3、但对于同时具有黄芩、黄连、黄柏、连翘、栀子、防风、白芷、金银花、大黄原料的中药成品制剂，其中包含有5-o-阿魏酰奎尼酸、4-o-阿魏酰奎尼酸、3-o-阿魏酰奎尼酸、黄连碱和黄芩苷等成分；其中，在保障多指标成分同时具有稳定分离度的前提下，黄连碱和黄芩苷之间容易出现对应的色谱峰重叠的问题，并不能有效实现成分含量的准确测量；同时现有技术中也并没有能够同时实现5-o-阿魏酰奎尼酸、4-o-阿魏酰奎尼酸、3-o-阿魏酰奎尼酸的检测的色谱条件。
4、尤其是对于京制牛黄解毒片(丸)处方而言，其来源于明代王肯堂《证治准绳·类方》第七册菊花通圣散方加减，由黄芩、黄连、黄柏、人工牛黄、石膏、栀子、大黄、金银花、连翘、川芎、菊花、薄荷、荆芥穗、防风、白芷、蔓荆子、旋覆花、桔梗、蚕砂、冰片、甘草二十一味药组成；不仅仅包含有黄芩和黄连等中药原料，且药味达到了20种以上，由于处方组成的复杂性，现有质量标准仅停留在冰片的含量测定，尚未见相关的多药味质量控制方法。因此，针对京制牛黄解毒片泻火解毒、清热燥湿功效的相关主要药味黄芩、黄连、黄柏、栀子、大黄、金银花、菊花、连翘、白芷等开展研究，建立特征图谱和多指标成分分析方法，以表征京制牛黄解毒片(丸)主要物质体系组成，为其有效物质基础研究和质量控制研究提供研究方法十分必要。
技术实现思路
1、因此，本发明要解决的问题是，现有技术中对于同时含有黄芩和黄连中有效成分的中药特征图谱无法兼顾有效物质成分的整体检测和含量的准确测定的问题；本发明提供了一种中药或中药组合物制剂的特征图谱建立方法，该方法能够更加完整的体现有效物质并准确实现有效物质成分含量的检测，且通过该建立方法获取的特征图谱能同时有效实现中药或中药组合物制剂的整体质量控制。
2、一种中药或中药组合物制剂的特征图谱建立方法，包括建立待测物的特征图谱；
3、所述待测物的原料至少包括黄芩和黄连；
4、所述特征图谱建立时的色谱条件为：
5、色谱柱：waters cortecs uplc t3 column；以甲醇为流动相a，乙酸铵-酸水溶液为流动相b，按以下梯度洗脱程序进行洗脱：
6、
7、所述a1为3±5％，a2为8±5％，a3为15±5％，a4为18±5％，a5为25±5％，a6为30±5％，a7为38±5％，a8为45±5％，a9为60±5％，a10为75±5％，a11为95±5％；
8、所述特征图谱中的特征峰对应的成分包括5-o-阿魏酰奎尼酸、4-o-阿魏酰奎尼酸、3-o-阿魏酰奎尼酸和黄连碱。
9、其中的±5％是指在流动相a的体积百分比的数值的基础上浮动±5％，例如：a1为3±5％，即a1为3*95％-3*105％＝2.85-3.15。
10、所述梯度洗脱程序还包括：
11、
12、
13、优选的，所述梯度洗脱程序为：
14、
15、所述高效液相色谱法中色谱柱的柱温为30℃～50℃；
16、和/或，所述流速为0.36ml/min～0.44ml/min；
17、和/或，所述色谱柱的规格为2.1mm×100mm，1.6μm；
18、和/或，所述检测波长为190～500nm；
19、和/或，乙酸铵-酸水溶液为含有体积浓度5～10mmol乙酸铵的0.2％-4％的磷酸水或甲酸水溶液。在该条件范围内均能达到各个特征峰具有较好分离效果的目的。
20、所述待测物的原料还包括黄柏、栀子、大黄、金银花、菊花、白芷、人工牛黄，优选为牛黄解毒片。
21、所述的待测物制备成供试品溶液的制备过程为：取待测物磨成细粉，精密称定，加溶剂，密塞，加热回流处理，冷却后溶剂补重，过滤，取续滤液作为供试品溶液。
22、所述过滤采用0.22μm微孔滤膜过滤；
23、加热回流的处理时间为60min。
24、所述溶剂为甲醇、乙醇、水、正丁醇、三氯甲烷中任意一种或多种的组合，或上述溶剂与酸水溶液组成的溶剂；所述酸水溶液中的酸为甲酸或冰醋酸；
25、所述溶剂优选为体积浓度50％以上的乙醇水溶液或甲醇水溶液。
26、上述的一种中药或中药组合物制剂的特征图谱建立方法在对含有黄芩和黄连的中药或中药组合物制剂进行整体质量控制的应用。
27、所述中药或中药组合物为牛黄解毒的丸剂、颗粒剂、散剂、片剂、胶囊剂、口服液；
28、所述行整体质量控制的成分包括：5-o-阿魏酰奎尼酸、4-o-阿魏酰奎尼酸、3-o-阿魏酰奎尼酸、绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、小檗碱、巴马汀、黄连碱、药根碱、表小檗碱、黄柏碱、栀子苷、大黄酚、甘草酸和欧前胡素。
29、本发明技术方案，具有如下优点：
30、本发明的一种中药或中药组合物制剂的特征图谱建立方法，可以获得对中药处方中同时含有黄芩、黄连、黄柏、栀子、大黄、金银花、菊花、连翘、甘草、白芷、人工牛黄等药物中30个特征成分进行特征图谱表征分析；并且采用本发明的高效液相色谱法至少可以实现5-o-阿魏酰奎尼酸、4-o-阿魏酰奎尼酸、3-o-阿魏酰奎尼酸、绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、小檗碱、巴马汀、黄连碱、药根碱、表小檗碱、黄柏碱、栀子苷、大黄酚、甘草酸和欧前胡素16个指标性成分含量的准确测量；因此本发明方法对于以这些药味为主的京制牛黄解毒片、牛黄上清丸等复方制剂具有高效质量控制意义，可用于京制牛黄解毒片、牛黄上清丸等中成药的质量控制和投料鉴别。
1.一种中药或中药组合物制剂的特征图谱建立方法，其特征在于，包括建立待测物的特征图谱；
2.根据权利要求1所述的一种中药或中药组合物制剂的特征图谱建立方法，其特征在于，所述梯度洗脱程序还包括：
3.根据权利要求1所述的一种中药或中药组合物制剂的特征图谱建立方法，其特征在于，所述梯度洗脱程序为：
4.根据权利要求1或2所述的一种中药或中药组合物制剂的特征图谱建立方法，其特征在于，所述色谱柱的柱温为30℃～50℃；
5.根据权利要求1-4任一项所述的一种中药或中药组合物制剂的特征图谱建立方法，其特征在于，所述待测物的原料还包括黄柏、栀子、大黄、金银花、菊花、白芷、人工牛黄，优选为牛黄解毒片。
6.根据权利要求1-4任一项所述的一种中药或中药组合物制剂的特征图谱建立方法，其特征在于，所述的待测物制备成供试品溶液的制备过程为：取待测物磨成细粉，精密称定，加溶剂，密塞，加热回流处理，冷却后溶剂补重，过滤，取续滤液作为供试品溶液。
7.根据权利要求6所述的一种中药或中药组合物制剂的特征图谱建立方法，其特征在于，所述过滤采用0.22μm微孔滤膜过滤；
8.根据权利要求6或7所述的一种中药或中药组合物制剂的特征图谱建立方法，其特征在于，所述溶剂为甲醇、乙醇、水、正丁醇、三氯甲烷中任意一种或多种的组合，或上述溶剂与酸水溶液组成的溶剂；所述酸水溶液中的酸为甲酸或冰醋酸；
9.采用权利要求1-7任一项所述的一种中药或中药组合物制剂的特征图谱建立方法在对含有黄芩和黄连的中药或中药组合物制剂进行整体质量控制的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述中药或中药组合物为牛黄解毒的丸剂、颗粒剂、散剂、片剂、胶囊剂、口服液；
