本发明属于基因工程领域,具体涉及使用somyb1基因过表达制备高产矢车菊素-3-o-芸香糖苷转基因植物的方法。
背景技术:
1、矢车菊素-3-o-芸香糖苷(cyanidin-3-o-rutinoside,c3r)是一种天然存在于植物中的重要的花青素代谢物。研究发现,c3r对h2o2所致的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(pc12细胞)氧化损伤具有保护作用,与抑制细胞凋亡通路相关蛋白的表达,提高胞内抗氧化酶活性,清除胞内过量ros,降低细胞凋亡有关,是预防阿尔茨海默病(alzheimer disease,ad)、帕金森病(parkinson’s disease,pd)和亨廷顿氏病(huntington’s disease,hd)等神经退行性疾病(neurodegeneration disease,,ndd)的一个有前景的候选天然药物。
2、近年来,基因工程技术在植物药用物质的合成和提取方面取得了显著进展,成为获取药用物质的重要方法。在众多植物中,烟草由于具有组织易操作、再生能力强、生长量大等生物特性,长期以来被作为基因工程研发对象用于合成和提取药用物质。自2008年,利用基因工程技术以烟草为对象获得了肿瘤细胞表面蛋白、zmapp、血清蛋白活化剂tpa、癌症免疫物质、青蒿酸等治疗非何杰金氏淋巴瘤、埃博拉病毒、心脏病、癌症和疟疾等疾病的药物。
3、目前还未见利用基因工程技术开发高产矢车菊素-3-o-芸香糖苷的转基因植物的报道。
技术实现思路
1、本发明的第一个目的在于提供一种新的somyb1基因,以及其重组载体、重组菌,并首次发现过表达somyb1基因能够显著提高植物中矢车菊素-3-o-芸香糖苷的含量。
2、本发明的第二个目的在于提供一种制备高产矢车菊素-3-o-芸香糖苷的转基因植物的方法。
3、本发明提供了一种somyb1基因,它的cds序列如seq id no.1所示。
4、本发明还提供了一种重组载体,它包括cds序列如seq id no.1所示的基因。
5、本发明还提供了一种重组菌,它包含前述的重组载体。
6、进一步地,所述重组菌为重组农杆菌。
7、进一步地,所述重组农杆菌为重组根癌农杆菌。
8、本发明还提供了一种制备高产矢车菊素-3-o-芸香糖苷的转基因植物的方法,其特征在于,它是将前述的somyb1基因转入植物中,获得表达somyb1蛋白的植物。
9、进一步地,所述转入植物的方法是农杆菌法、基因枪法、电转法、peg介导法、脂质体法、磷酸钙-dna共沉淀法中的一种。
10、进一步地,所述植物为烟草。
11、本发明还提供了前述somyb1基因、前述重组载体或前述重组菌在制备高产矢车菊素-3-o-芸香糖苷的转基因植物中的用途。
12、进一步地,所述植物为烟草。
13、本发明取得了以下有益效果:
14、本发明首次发现,与野生型烟草相比,过表达somyb1基因的转基因烟草的花青素代谢物,特别是矢车菊素-3-o-芸香糖苷的含量显著提高。
15、本发明的somyb1基因,及其重组载体、重组菌可以用来提高植物中的矢车菊素-3-o-芸香糖苷含量。
16、本发明提供的构建高产矢车菊素-3-o-芸香糖苷转基因植物的方法,在定向生产高产矢车菊素-3-o-芸香糖苷转基因植物中具有广阔的应用前景。
17、显然,根据本发明的上述内容,按照本领域的普通技术知识和惯用手段,在不脱离本发明上述基本技术思想前提下,还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
18、以下通过实施例形式的具体实施方式,对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
1.一种somyb1基因,其特征在于,它的cds序列如seq id no.1所示。
2.一种重组载体,其特征在于,它包括cds序列如seq id no.1所示的基因。
3.一种重组菌,其特征在于,它包含权利要求2所述的重组载体。
4.根据权利要求3所述的重组菌,其特征在于,所述重组菌为重组农杆菌。
5.根据权利要求4所述的重组菌,其特征在于,所述重组农杆菌为重组根癌农杆菌。
6.一种制备高产矢车菊素-3-o-芸香糖苷的转基因植物的方法,其特征在于,它是将权利要求1所述的somyb1基因转入植物中,获得表达somyb1蛋白的植物。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述转入植物的方法是农杆菌法、基因枪法、电转法、peg介导法、脂质体法、磷酸钙-dna共沉淀法中的一种。
8.根据权利要求6或7所述的方法,其特征在于,所述植物为烟草。
9.权利要求1所述somyb1基因、权利要求2所述重组载体或权利要求3-5任一项所述重组菌在制备高产矢车菊素-3-o-芸香糖苷的转基因植物中的用途。
10.根据权利要求9所述的用途,其特征在于,所述植物为烟草。