本发明涉及生物医药领域,特别是涉及hspala蛋白和crk蛋白作为靶点在筛选抗炎药物中的应用。
背景技术:
1、炎症是受多种刺激因素诱导发生的现象,其中包括物理性伤害、易制毒化学品、微生物入侵以及免疫响应。表现现象为红、肿、热、痛甚至功能障碍。若炎症通过一系列的措施可以控制,则对人体有益,可将其归为人体自动防御反应。与之相反,炎症首先会对人体自身免疫系统产生影响,引起过敏反应,并将自身的组织和细胞误列为攻击对象,例如类风湿性关节炎、红斑狼疮症等。由于炎症包括众多的炎症因子和反应途径,它们可以导致大量的病理改变,因此治疗炎症时很难找到理想的单一靶点。目前用于治疗炎症疾病的西药通常的非甾类药物以及固醇类药物,虽然这些药物都有较好的抗炎、镇痛、解热的疗效,但是这2类药物也有较多的不良反应和副作用。因此发现副作用小、疗效高的抗炎药物成为专家们研究的方向。
2、青藤碱(sinomenine)是从传统中药青风藤(caulis sinomenii)中提取的一种生物活性成分,具有抗炎、免疫抑制、镇痛、降压以及抗心律失常等多种生物活性。临床已有正清风痛宁片、缓释片、盐酸青藤碱注射液、毛青藤总碱片等制剂用于治疗类风湿性关节炎及心律失常,且取得了良好疗效。近年来还有用于治疗慢性肾炎、抗氧化、抗肿瘤以及戒毒等应用。青藤碱药理活性广泛,具有多种功效,所有这些活性预示着其具有多重靶点的性质,然而对于其具体作用的靶点目前还不是很清楚,作用的机制还没有被完全的阐明。
3、因此,探索青藤碱抗炎作用的分子机理,并对与青藤碱作用的靶点蛋白的信息进行预测与分析,对制备与筛选新型抗炎药物具有重要意义。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供hspala蛋白和crk蛋白作为靶点在筛选抗炎药物中的应用,以解决上述现有技术存在的问题。本发明通过化学蛋白组学的方法捕获了可以与青藤碱发生作用的靶点蛋白,通过分子对接推测青藤碱的抗炎靶点主要为hspa1a和crk蛋白,依据上述抗炎靶点蛋白与相关机制可模拟筛选其它具备抗炎功效的新型药物。
2、为实现上述目的,本发明提供了如下方案:
3、本发明提供hspala蛋白和crk蛋白作为药物靶点在体外筛选抗炎药物中的应用,所述抗炎药物能与所述hspala蛋白和所述crk蛋白结合,抑制mapk下游信号通路。
4、进一步地,所述mapk下游信号通路包括erk、jnk和p38的磷酸化。
5、进一步地,所述抗炎药物与所述hspala蛋白和所述crk蛋白的结合能在-7.0kcal/mol以下。
6、进一步地,所述抗炎药物包括小分子化合物、核酸和多肽。
7、本发明还提供一种体外筛选抗炎药物的方法,包括以hspala蛋白和crk蛋白作为药物靶点,检测受试药物与所述hspala蛋白和所述crk蛋白的结合情况,若所述受试药物能与所述hspala蛋白和所述crk蛋白结合,并抑制mapk下游信号通路,则所述受试药物为抗炎候选药物。
8、进一步地,所述mapk下游信号通路包括erk、jnk和p38的磷酸化。
9、进一步地,所述受试药物与所述hspala蛋白和所述crk蛋白的结合能在-7.0kcal/mol以下。
10、进一步地,所述受试药物包括小分子化合物、核酸和多肽。
11、本发明公开了以下技术效果:
12、本发明通过化学蛋白组学的方法捕获了可以与青藤碱发生作用的靶点蛋白,通过分子对接推测青藤碱的抗炎靶点主要为hspa1a和crk蛋白,并进一步围绕hspa1a和crk相关信号通路进行验证,结果表明,青藤碱能显著抑制mapk通路下游的erk、jnk、p38的磷酸化,通过调控mapk通路从而发挥抗炎作用。
13、本发明公开了与抗炎相关的2个新的蛋白靶点hspa1a和crk,依据上述抗炎靶点蛋白与相关机制可模拟筛选其它具备抗炎功效的新型药物。
1.hspala蛋白和crk蛋白作为药物靶点在体外筛选抗炎药物中的应用,其特征在于,所述抗炎药物能与所述hspala蛋白和所述crk蛋白结合,抑制mapk下游信号通路。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述mapk下游信号通路包括erk、jnk和p38的磷酸化。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述抗炎药物与所述hspala蛋白和所述crk蛋白的结合能在-7.0kcal/mol以下。
4.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述抗炎药物包括小分子化合物、核酸和多肽。
5.一种体外筛选抗炎药物的方法,其特征在于,包括以hspala蛋白和crk蛋白作为药物靶点,检测受试药物与所述hspala蛋白和所述crk蛋白的结合情况,若所述受试药物能与所述hspala蛋白和所述crk蛋白结合,并抑制mapk下游信号通路,则所述受试药物为抗炎候选药物。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述mapk下游信号通路包括erk、jnk和p38的磷酸化。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述受试药物与所述hspala蛋白和所述crk蛋白的结合能在-7.0kcal/mol以下。
8.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述受试药物包括小分子化合物、核酸和多肽。