：本发明涉及生物医学领域，尤其涉及piezo1蛋白作为皮肤黑色素瘤肿瘤标记物的应用。
背景技术
0、
背景技术：
1、皮肤恶性黑素瘤(cutaneous malignant melanoma,cmm)是起源于皮肤黑素细胞的高度恶性肿瘤，近十年其全球发病率呈显著增加。肢端黑色素瘤(acral melanoma，am)是皮肤黑色素瘤的一种特殊亚型，仅发生于手掌、足底和甲下，是亚非籍人种皮肤黑色素瘤的主要亚型，而白种人发病罕见。近些年，虽然cmm治疗取得了很大的进展，但是am患者获益有限，总生存率较差。am皮损易转移且转移发生时间早，一旦发生远处转移则5年生存率不足5％。因此，研究皮肤黑色素瘤皮损高发于肢端的关键致病因素，防止早期淋巴结转移，是中国皮肤黑色素瘤疾病研究中急需解决的关键科学问题。
2、研究证实，肢端创伤和机械压力是am发病的重要危险因素。虽然大量的临床病例研究证实肢端创伤和机械压力是am发病的重要危险因素，但是机械刺激促进am发生及转移的具体机制却不清楚。我们推测在黑素瘤细胞增殖转移过程中，肿瘤细胞的分子生物力学特性发挥了重要的作用。在外力刺激和环境变化下，肿瘤细胞会主动或被动地改变其形状，而这种变形能力是肿瘤迁移、铺展和侵入的基础。同时由机械力诱导细胞内外化学信号的改变，即机械转导，可能一定程度上调节着细胞的增殖活力。因此，以全新的思路识别黑素瘤细胞在外力刺激下完成细胞增殖、变形、转移的核心蛋白质和分子机制，对探讨潜在抗肿瘤增殖、转移治疗靶点至关重要。
3、在肿瘤细胞恶性增殖与转移过程中，机械力时刻作用于人体体被系统，对黑色素瘤皮损发生、发展产生密切影响，干预疾病预后。piezo蛋白家族是目前首个哺乳动物体内真正意义上的机械敏感性离子通道，其能够直接感受各种机械力变化的刺激并能够迅速做出反应，将细胞感受到的机械信号转化为电化学信号，调控细胞各项生理功能。piezo家族包括piezo1和piezo2两个成员。与piezo2主要位于感觉神经元中不同，piezo1主要存在于非神经组织中，如皮肤、肺、膀胱、胃肠等。作为机械信号感受器，piezo1在调节皮肤生理过程及多种皮肤疾病发生发展中发挥重要作用。同时，piezo1介导力学信号影响肿瘤侵袭和转移，在多种肿瘤(肠癌、胃癌、骨肉瘤等)中发挥促癌作用，对细胞迁移产生影响。有相关文献证实，piezo1敲除的黑素瘤细胞迁移速度降低。因此，piezo1蛋白是介导机械刺激下促进黑色素瘤皮损进展的关键离子通道蛋白。而基于组织水平的piezo1蛋白检测，将其作为临床肿瘤标记物具有很大的临床应用价值和前景，对皮肤黑色素瘤的早期发现、早期诊断、早期治疗具有重要意义。
技术实现思路
0、
技术实现要素：
1、(一)解决的技术问题
2、针对目前黑色素瘤检测技术中存在的缺陷，本发明提供piezo1蛋白作为皮肤黑色素瘤肿瘤标记物的应用，实现对皮肤黑色素瘤的早期发现和早期诊断，解决现有技术缺乏在组织水平上对黑色素瘤的发生发展进行灵敏检测的标记物的问题。
3、(二)技术方案
4、为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：
5、piezo1蛋白作为皮肤黑色素瘤肿瘤标记物的应用，所述piezo1蛋白在皮肤黑色素瘤组织中高表达。
6、进一步地，所述piezo1蛋白在制备皮肤黑色素瘤肿瘤辅助诊断、疗效预测及预后判断试剂中的应用。
7、本发明还提供一种皮肤黑色素瘤肿瘤标记物piezo1检测试剂，所述试剂包括一抗和二抗，所述一抗为piezo1蛋白兔源多克隆抗体；所述二抗为hrp-山羊抗兔、alexa fluor594-山羊抗兔或fitc-山羊抗兔。
8、在本发明中，所述piezo1兔源多克隆抗体优选的购自中国proteintech三鹰公司，所述hrp-山羊抗兔购自中国yeasen翌圣公司，所述alexa fluor594-山羊抗兔或fitc-山羊抗兔购自中国amyjet艾美捷公司。
9、本发明对所述piezo1蛋白表达的检测方法没有特殊限定，能够检测出所述piezo1蛋白的表达即可。本发明通过皮肤黑色素瘤组织的免疫组化、免疫荧光及western blot蛋白电泳检测piezo1蛋白的表达。
10、本发明通过对皮肤黑色素瘤组织的肿瘤细胞以及正常色素痣组织的痣细胞进行piezo1蛋白表达的定量检测，结果表明，皮肤黑色素瘤患者的组织中piezo1蛋白表达显著增加。因此，组织中piezo1蛋白可以作为皮肤黑色素瘤与色素痣相鉴别的肿瘤标记物，用于皮肤黑色素瘤的诊断。
11、所述检测方法采用如下三种：
12、(1)免疫组化法；
13、(2)组织免疫荧光染色法；
14、(3)western blot蛋白电泳法。
15、(三)有益效果
16、本发明产生的有益效果是：
17、本发明采用的基于肿瘤组织开发的肿瘤标记物piezo1，同时还提供一种皮肤黑色素瘤肿瘤标记物piezo1检测试剂，对该标记物进行检测可以在完成黑色素瘤肿瘤的早期发现、早期治疗以及干预的同时，做到对皮肤黑色素瘤的辅助诊断、疗效预测及预后判断，为皮肤黑色素瘤的靶向治疗提供新的治疗策略，具有良好的临床应用前景。
1.piezo1蛋白作为皮肤黑色素瘤肿瘤标记物的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述piezo1蛋白在皮肤黑色素瘤组织中高表达。
3.权利要求1或2所述的piezo1蛋白在制备皮肤黑色素瘤肿瘤辅助诊断、疗效预测及预后判断试剂中的应用。
4.一种皮肤黑色素瘤肿瘤标记物piezo1检测试剂，其特征在于，所述试剂包括一抗和二抗，所述一抗为piezo1蛋白兔源多克隆抗体，所述二抗为hrp-山羊抗兔、alexa fluor594-山羊抗兔或fitc-山羊抗兔。
