本技术涉及生物领域，更具体的涉及一种包含prp的组合物及其在治疗炎症中的用途。
背景技术：
1、富血小板血浆(platelet-richplasma，prp)是离心自体血液后分离出的一种富血小板浓缩物，即相当于血小板平均浓度至少2倍以上基础值的血浆。早期研究发现用于治疗血小板减少症。prp来源于机体自身，无增加免疫排斥及传播多种疾病的风险。经激活可直接产生多种生长因子及细胞因子。协同参与并促进细胞分裂、分化，加速组织的再生与修复，此外还有抗炎、抑菌、减轻疼痛等多种治疗作用。近年来，prp一直是研究的热点，并被广泛应用于骨科、烧伤整形、神经外科等多种临床学科。
2、经临床研究，成人的骨髓基质干细胞、成骨细胞、成纤维细胞、及表皮细胞所表达的prp中含有许多相关的生长因子受体。这些生长因子受体可以通过反向作用诱导内源性的细胞内信号蛋白活性，引起细胞增殖、血管生成、胶原合成等，从而有效地使富血小板血浆细胞可以正常发挥其功能。prp中含多种高浓度的白细胞，参与机体的免疫反应和防御机制。这些白细胞通常可以迅速清除机体局部的病原体，增强机体抗感的染能力。如中性粒细胞在炎症反应因子趋化作用下，吞噬局部细菌，并通过产生大量的过氧化物和超氧化物来迅速杀灭病原体，而高浓度的单核细胞则通过释放干扰素和白细胞活性介素从而增强了创面愈合和抗细菌感染的能力。与此同时白细胞可以清除局部已经坏死的组织、加快损伤组织的愈合和修复。
3、骨关节炎(oa)是一种由于关节内应力作用失衡所诱发并以关节软骨修复障碍为主要特点的进行性关节疾病，其发生发展过程虽缓慢，但若出现临床症状，可供选择的治疗方式却极为有限。该病是残性疾病，因此严重威胁着人类的健康和生活质量。近年来，围绕着富血小板血浆治疗骨关节炎的基础和临床研究已成为热点。oa的病理学研究提示其主要的病理过程之一是关节内软骨的破坏及修复之间的失衡。老龄化、疾病、外伤等因素引起软骨组织损伤与修复之间失衡。最终，某些有害的基因表达增加进而改变关节软骨细胞外基质结构，接着使得关节表面软骨发生裂隙直至终末期关节炎病理改变，而prp活化后释放的一系列生长因子对于软骨的修复有促进作用。在prp中与软骨修复相关的几个细胞因子及其作用有：pdgf是组织损伤后首先在局部发挥生理作用的细胞因子，它可以促进巨噬细胞和中性粒细胞的趋化作用，同时刺激间充质干细胞、成纤维细胞、成骨细胞、软骨细胞的有丝分裂，但最重要的功能是调控胶原的合成以及胶原酶的分泌。另外，新的一些研究表明pdgf还可以通过促进关节中成纤维细胞的功能从而增加内源性透明质酸(ha)的合成及促进肝细胞生长因子(hgf)的分泌间接地起到保护、润滑软骨及促进软骨代谢的作用。上述这些作用都能有效地改善骨关节炎软骨病变的病理过程。prp促进骨与软组织修复的主要机制在于，其内中含有高浓度血小板，激活后释放多种生长因子，如血小板衍生生长因子(pdgf)、转化生长因子-β(tgf-β)、i型胰岛素样生长因子(igf)、血管内皮生长因子(vegf)和表皮生长因子(egf)等，这些生长因子主要存在于血小板的α颗粒中，当血小板被激活后，血小板的α颗粒与细胞膜融合，形成脱颗粒作用，释放的生长因子转化为活性状态，通过内分泌、自分泌、旁分泌等方式，结合到靶细胞膜表面，诱导内源性蛋白信号的激活和第二信号激活。进而诱导细胞内基因序列表达、mrna转录，合成组织再生过程所需的各种蛋白，指导细胞增殖、基质合成、类骨样物质产生、胶原合成，从而加速间充质干细胞的分化，促进成骨细胞和成纤维细胞的增殖，改善病患部位炎症反应、促进细胞增殖、分化和组织再生，进而改善患者临床症状或促进损伤修复。除了含有这些生长因子，prp还含有白细胞，如中性粒细胞，单核细胞和淋巴细胞，这些白细胞在机体的炎症反应和感染控制、抑制细菌和真菌的生长方面起着重要的作用。
4、目前，单纯采用prp进行骨关节炎的治疗已有相关的研究，但是单独一种药物其治疗缓慢，效果并不显著。因此，开发药物联用的组合物用于骨关节炎的治疗是研究的重要方向。研究表明鳐鱼具有较强的抗炎能力，其体内含有丰富的天然抗氧化剂，如不饱和脂肪酸、角鲨烯、抗氧化肽等。这些抗氧化剂有助于抑制炎症因子的释放，从而有效地缓解关节疼痛和炎症。鳐鱼的抗炎能力无疑为缓解关节疼痛提供了一种独特而有效的手段。针对鳐鱼开发特异性的抗炎抗氧化肽进而用于骨关节炎的治疗是重要的研究方向。
技术实现思路
1、本发明提供一种包含prp的组合物。
2、进一步的，本发明还提供了一种包含prp的组合物在制备骨关节炎的药物中的用途。
3、进一步的，所述的prp是商业购买的，或者是从血液中通过离心分离制备的。
4、更进一步的，本发明还提供了一种从鱼皮中分离的具有抗氧化和抗炎作用的多肽i-3,其氨基酸序列如seq id no：1所示。
5、更进一步的，本发明还提供了一种包含prp和抗氧化抗炎肽i-3的组合物在制备骨关节炎的药物中的用途。
6、具体的，本发明的组合物包含药学上可接受的载体。包含在本发明药物组合物中的药学上可接受的载体的例子是常规用于制剂中的那些，但不限于乳糖，葡萄糖，蔗糖，山梨醇，甘露醇，淀粉，阿拉伯胶，磷酸钙，藻酸盐，明胶，硅酸钙，微晶纤维素，聚乙烯吡咯烷酮，纤维素，水，糖浆，甲基纤维素，羟基苯甲酸甲酯，羟基苯甲酸丙酯，滑石，硬脂酸镁，矿物油，盐水，磷酸盐缓冲盐水(pbs)和介质。
7、本发明的药物组合物还可以包括润滑剂，湿润剂，甜味剂，调味剂，乳化剂，悬浮剂和防腐剂。合适的药学上可接受的载体和制剂的细节可参见remington′spharmaceuticalsciences(第19版，1995)。本发明的药物组合物可以口服或胃肠外给药，优选胃肠外给药，最优选关节内给药。
8、适合的药学上可接受的ph调节剂的实例包括但不限于氢氧化钠、柠檬酸、盐酸、硼酸、乙酸、磷酸、琥珀酸、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铵、氧化镁、碳酸钙、碳酸镁、硅酸铝镁、苹果酸、柠檬酸钾、柠檬酸钠、磷酸钠、乳酸、葡糖酸、酒石酸、1,2,3,4-丁烷四羧酸、富马酸、二乙醇胺、单乙醇胺、碳酸钠、碳酸氢钠、三乙醇胺或它们的任意组合。在一个实施方案中，所述药学上可接受的ph调节剂的存在量为约0.01％至约2.0％(重量/体积)，优选约0.05％至约1％(重量/体积)。
9、适合的药学上可接受的螯合剂的实例包括但不限于乙二胺四乙酸(edta)、edta二钠及其衍生物、柠檬酸及其衍生物、烟酰胺及其衍生物、脱氧胆酸钠及其衍生物、或这些螯合剂的混合物。在一个实施方案中，所述药学上可接受的螯合剂的存在量为约0.01％至约2.0％(重量/体积)，优选约0.05％至约1％(重量/体积)。
10、适合的药学上可接受的润湿剂或表面活性剂的实例包括但不限于两性、非离子型、阳离子型或阴离子型分子。适合的表面活性剂包括但不限于聚山梨酯、十二烷基硫酸钠(月桂基硫酸钠)、十二烷基二甲基氧化胺、多库酯钠、十六烷基三甲基溴化铵(ctab)、聚乙氧基化醇、聚氧乙烯脱水山梨醇、辛苯昔醇、n,n-二甲基十二烷基胺-n-氧化物、十六烷基三甲基溴化铵、聚氧乙烯(10)月桂醚、表面活性剂(由月桂醇、鲸蜡醇、硬脂醇和油醇衍生的植物油系脂肪醇聚氧乙烯醚)、胆盐(例如脱氧胆酸钠和胆酸钠)、聚氧乙烯蓖麻油、壬基酚乙氧基化物、环糊精、卵磷脂、甲苄索氯铵、羧酸盐、磺酸盐、石油磺酸盐、烷基苯磺酸盐、萘磺酸盐、烯烃磺酸盐、烷基硫酸盐、硫酸盐、硫酸化天然油和脂肪、硫酸化酯、硫酸化烷醇酰胺、烷基酚(乙氧基化和硫酸化的)、乙氧基化脂肪醇、聚氧乙烯表面活性剂、羧酸酯、聚乙二醇酯、脱水山梨醇酯及其乙氧基化衍生物、脂肪酸乙二醇酯、羧酰胺、单烷醇胺缩合物、聚氧乙烯脂肪酸酰胺、季铵盐、具有酰胺键的胺、聚氧乙烯烷基胺和聚氧乙烯脂环族胺、n,n,n,n-四取代乙二胺、2-烷基-1-羟乙基-2-咪唑啉、n-椰油基-3-氨基丙酸/钠盐(n-coco 3-aminopropionic acid/sodium salt)、n-牛脂基-3-亚氨基二丙酸二钠盐(n-tallow 3-iminodipropionate disodium salt)、n-羧甲基-n,n-二甲基-n-9-十八烯基氢氧化铵(n-carboxymethyl n dimethyl n-9octadecenyl ammonium hydroxide)、n-椰油酰胺乙基-n-羟乙基甘氨酸钠盐等、聚氧乙烯、脱水山梨醇单月桂酸酯和硬脂酸酯、(聚乙氧基化蓖麻油)、(环氧乙烷/12-羟基硬脂酸)、聚山梨酯、四丁酚醛，以及它们的任意组合。优选的药学上可接受的表面活性剂包括四丁酚醛和(脱水山梨醇单油酸酯)或其混合物。
11、更进一步的，本发明涉及一种用于预防或治疗关节炎的注射剂，包含由seq idno:1所示的多肽组成的的组合物的用于预防或治疗关节炎的多肽或注射剂。最优选地，所述注射是关节内给药的。
12、本发明的药物组合物的合适剂量可以根据各种因素而变化，例如配制方法，给药方法，患者的年龄，体重和性别，疾病的严重程度，饮食，给药时间，给药途径，排泄速率和对反应的敏感性。
13、在本发明中，术语“关节炎”是指关节周围组织的慢性炎症，如肌腱，韧带，肌肉等，以及关节周围身体组织的其它器官中的关节，并且可以是选自骨关节炎，退行性关节炎，解剖性骨软骨炎，关节韧带损伤，半月板撕裂，传染性关节炎，银屑病关节炎，强直性脊柱炎，类风湿性关节炎和青少年类风湿性关节炎中的至少一种。
14、特别地，在本发明中，退行性关节炎可以是特发性退行性关节炎或继发性退行性关节炎。术语“退行性关节炎”是指伴随炎症和疼痛的疾病，所述炎症和疼痛由构成关节的受损骨和韧带引起，这是由于保护关节的软骨的进行性损伤或退行性改变，这是最常见的关节炎疾病。其中，“特发性退行性关节炎”由老化等引起，没有任何特定原因，也被称作原发性退行性关节炎。术语“继发性退行性关节炎”是指由创伤，疾病和畸形引起的能够损伤关节软骨的病症，例如细菌性关节炎或结核性关节炎后损伤的关节软骨。本发明的多肽可应用于特发性退行性关节炎和继发性退行性关节炎，更优选应用于伴随因老化而退行性改变的特发性关节炎。关节炎，更优选退行性关节炎，可通过施用本发明的合成多肽来治疗的关节炎是指由于软骨损伤而在身体的任何关节中发生的关节炎，优选为退行性关节炎，其发生在选自膝盖，手指，下巴，臀部和腰部的至少一个部位，但不限于此。
15、有益效果
16、本发明提供了一种包含prp的组合物及其治疗炎症中的用途。更具体的，本发明还提供了具有抗炎和抗氧化作用的多肽。所述的多肽与prp一样，均具有促进软骨细胞增殖的效果，将多肽与prp联用后能够显著降低炎性反应具有较好的治疗关节炎症效果，具有具有极大的治疗价值。
1.一种抗氧化抗炎肽i-3,其特征在于氨基酸序列如seq id no：1所示。
2.富血小板血浆prp和权利要求1所述的抗氧化抗炎肽i-3在制备骨关节炎的药物中的用途。
3.权利要求1所述的抗氧化抗炎肽i-3在制备用于促进软骨细胞增殖的药物中的用途。
4.权利要求1所述的抗氧化抗炎肽i-3在制备用于治疗骨关节炎的药物中的用途。
