本发明涉及生物学,具体涉及一种coro1c及其截短蛋白在抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒感染中的应用。
背景技术:
1、猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,prrs)又称为蓝耳病,是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive andrespiratory syndrome virus,prrsv)引起的一种急性传染病。我国于1996年首次分离到该病毒,称为低致病性prrsv(lp-prrsv),10年后出现了高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒(hp-prrsv),2013年出现了nadc30-样prrsv(nadc30-like)。自nadc30-样prrsv的出现以来,不断有该毒株与hp-prrsv进行重组组成的新的变异株的出现,变异株不仅在基因组上发生变化,而且在毒力和诱导的机体的免疫反应等方面都发生了变化,所以导致现有的疫苗对其免疫保护力减弱,致使prrs不断的暴发和流行,对市场造成了巨大的经济损失,急需找到治疗该病的药物。
2、冠蛋白家族是保守的微丝调节蛋白,最典型的coronin蛋白是i型coronin(如coronin1b),它通过β-螺旋桨(β-propeller)结构与微丝结合,并通过其n端与arp2/3复合物结合,从而阻碍了arp2/3与微丝的对接,并促进了已有的微丝网络的去分支。coro1c作为冠蛋白家族主要成员之一,主要分布在子宫内膜、肺、胆囊以及膀胱的组织中,coro1c、对于肌动蛋白以及微丝骨架去分支在细胞迁移和不对称细胞分裂中的调控作用是不可或缺的。
3、目前对于coro1c蛋白的研究主要集中在作为肿瘤的标志物,研究发现,coro1c在肿瘤中的异常表达与肿瘤的恶性表型有关,例如神经胶质细胞瘤、肝癌、肺癌、胃癌等。但关于coro1c蛋白对prrsv感染的影响还未见有报道。
技术实现思路
1、针对上述现有技术,本发明的目的是提供一种coro1c及其截短蛋白在抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒感染中的应用。本发明研究发现,过表达coro1c能够抑制prrsv感染;基于coro1c开发的截短蛋白coro1c-6对不同类型的prrsv感染均具有很好的治疗效果,对于猪繁殖与呼吸综合征的防控具有重要的意义。
2、为实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
3、本发明的第一方面,提供coro1c蛋白在如下(1)或(2)中的应用:
4、(1)制备抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的阻断剂;
5、(2)制备防治猪繁殖与呼吸综合征的药物;
6、所述coro1c蛋白的氨基酸序列如seq id no.1或seq id no.2所示。其中:
7、seq id no.1所示的coro1c蛋白为猴源coro1c蛋白,具体氨基酸序列如下:mrrvvrqskfrhvfgqavkndqcyddirvsrvtwdssfcavnprfvaiiieasgggaflvlplhktgridksyptvcghtgpvldidwcphndqviasgsedctvmvwqipengltlsltepvvileghskrvgivawhptarnvllsagcdnaiiiwnvgtgealinlddmhsdmiynvswnrngslictaskdkkvrvidprkqeivaekekahegarpmraifladgnvfttgfsrmserqlalwnpknmqepialhemdtsngvllpfydpdtsiiylcgkgdssiryfeitdespyvhylntfsskepqrgmgympkrgldvnkceiarffklherkcepiimtvprksdlfqddlypdtagpeaaleaeewfegknadpilislkhgyipgknrdlkvvkknildskptankkcdlisvpkkttdtasvqneakldeilkeiksikdticnqderiskleqqmakiaa。
8、seq id no.2所示的coro1c蛋白为猪源coro1c蛋白,具体氨基酸序列如下:mrrvvrqskfrhvfgqavkndqcyddirvsrvtwdssfcavnprfvaiiieasgggaflvlplhktgridksyptvcghtgpvldidwcphndqviasgsedctvmvwqipengltlsltepvvileghskrvgivawhptarnvllsagcdnaiiiwnvgtgealinlddmhsdmiynvswnrngslictaskdkkvrvidprkqeiiaekekahegarpmraifladgnvfttgfsrmserqlalwnpktmeepialhemdtsngvllpfydpdtsiiylcgkgdssiryfeitdespyvhylntfsskepqrgmgympkrgldvnkceiarffklherkcepiimtvprksdlfqddlypdtagpeaaleaeewfegrnadpilislkhgyipgknrdlkvvkknildskptankkcdlisvpkktadmagvqneakldeilkeiksikdticnqderiskleqqmakiaa。
9、本发明的第二方面,提供coro1c蛋白的编码基因在培育抗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的动物品种中的应用。
10、上述应用中,所述coro1c蛋白的编码基因为如下i)-iv)任一所示的核酸分子:
11、i)核苷酸序列是seq id no.3所示的核酸分子;
12、ii)除i)以外的编码seq id no.1所示氨基酸序列的核酸分子;
13、iii)核苷酸序列是seq id no.4所示的核酸分子;
14、iv)除iii)以外的编码seq id no.2所示氨基酸序列的核酸分子。
15、本发明的第三方面,提供含有coro1c蛋白编码基因的重组表达载体或工程菌在培育抗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的动物品种中的应用。
16、本发明的第四方面,提供一种coro1c截短蛋白,将其命名为coro1c-6蛋白,其氨基酸序列如seq id no.5所示;具体如下:
17、mrrvvrqskfrhvfgqavkndqcyddirvsrvtwdssfcavnprfvaiiieasgggaflvlplhktgr。
18、本发明的第五方面,提供上述coro1c截短蛋白在如下(1)或(2)中的应用:
19、(1)制备抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的阻断剂;
20、(2)制备防治猪繁殖与呼吸综合征的药物。
21、上述应用中,所述猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒为:高致病性prrsv(hp-prrsv)、低致病性prrsv(lp-prrsv)和/或nadc30-like。
22、本发明的第六方面,提供coro1c截短蛋白的编码基因在培育抗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的动物品种中的应用。
23、本发明的第七方面,提供一种抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的阻断剂,所述阻断剂以上述coro1c蛋白或coro1c截短蛋白为活性成分。
24、本发明的有益效果:
25、(1)本发明首次发现coro1c蛋白可以作为抗不同类型prrsv感染的靶标,通过过表达coro1c蛋白,可以显著抑制prrsv在细胞中复制和在细胞上清中的滴度,可以开发成为防治prrsv感染的药物。
26、(2)基于对coro1c蛋白功能区的研究,本发明进一步设计了coro1c截短蛋白,coro1c截短蛋白对不同类型的prrsv感染均具有很好的治疗效果,有效解决了由于prrsv高度变异性所导致的治疗药物药效降低或者无效的问题,对于猪繁殖与呼吸综合征的防控具有重要的意义。
1.coro1c蛋白在如下(1)或(2)中的应用:
2.coro1c蛋白的编码基因在培育抗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的动物品种中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述coro1c蛋白的编码基因为如下i)-iv)任一所示的核酸分子:
4.含有coro1c蛋白编码基因的重组表达载体或工程菌在培育抗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的动物品种中的应用。
5.一种coro1c截短蛋白,其特征在于,其氨基酸序列如seq id no.5所示。
6.权利要求5所述的coro1c截短蛋白在如下(1)或(2)中的应用:
7.根据权利要求6所述的应用,其特征在于,所述猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒为:高致病性prrsv(hp-prrsv)、低致病性prrsv(lp-prrsv)和/或nadc30-like。
8.coro1c截短蛋白的编码基因在培育抗猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的动物品种中的应用。
9.一种抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的阻断剂,其特征在于,所述阻断剂以权利要求1所述的coro1c蛋白或权利要求5所述的coro1c截短蛋白为活性成分。