一种碧根果蛋白肽及其饮料的制备方法与流程

    技术2025-01-30  54


    本发明涉及一种碧根果蛋白肽及其饮料的制备方法,属于蛋白肽制备与食品领域。


    背景技术:

    1、随着食品科技的进步,以及人们消费理念的改变,植物蛋白饮品的研究日益受到重视。其不仅富含植物蛋白及不饱和脂肪酸,而且不会引起人体内胆固醇含量的增加。植物蛋白饮料因其健康、天然的成分和独特细腻的口感而受到消费者的欢迎。

    2、食物蛋白源活性肽具有丰富的营养价值,具有抗氧化、抗疲劳、免疫调节等多种生理功能,在食品中得到了广泛的应用。未来有望取代蛋白质和氨基酸等营养物质。王端以葛根、核桃仁为主要原料,采用中性蛋白酶水解法,将其与乳酸菌相结合,制成了一种新型的果仁多肽饮料。郭显赫采用木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶水解榛仁蛋白,制备了榛仁多肽固体饮料。杨旭等用风味蛋白酶将黑芸豆进行酶解,加入15%的白砂糖、0.03%的柠檬酸,制成了一种具有较好口感的黑芸豆肽饮品。杨波等采用碱溶酸沉法从脱脂花生粕粉中提取花生蛋白,并经枯草杆菌蛋白酶水解,最终制成口味鲜美的饮料。

    3、专利cn116671557a公开了使用复合纤维素、蛋白酶进行酶解碧根果,制备碧根果蛋白饮料;专利cn117413885a公开了制备的得到碧根果多肽,能够用于激活adh酶活;论文“碧根果蛋白及降脂蛋白肽的制备、筛选、鉴定与应用研究”公开了制备得到的碧根果多肽能够抑制α-葡萄糖苷酶和胰脂肪酶,上述技术方案对碧根果蛋白肽的功能的开发仍较为局限。

    4、因此,开发一种具有多功能的碧根果活性肽具有较高的食用价值与经济价值,进一步拓展对碧根果的应用。


    技术实现思路

    1、为解决上述问题,本发明以碧根果为原料,通过酶解法制备碧根果多肽,并进一步筛分得到具有较强抗氧化活性的短肽gal(gly-ala-leu)和不同的中间产物活性肽h2、l3,以期研制出口感细腻顺滑,甜度适中,性状均一稳定的碧根果蛋白肽饮料,丰富植物蛋白饮料产品。

    2、本发明的第一个目的是提供一种活性肽,所述肽的氨基酸序列为gal(gly-ala-leu)。

    3、本发明还提供一种核酸分子,所述核酸分子用于编码上述的活性肽。

    4、本发明还提供一种生物材料,所述生物材料含有上述的核酸分子,所述生物材料为表达盒、转座子、质粒载体、病毒载体、工程菌或转基因细胞系。

    5、本发明的第二个目的是提供上述的活性肽的制备方法,其特征在于,所述方法包括通过碧根果制备或通过基因工程菌合成或通过人工合成。

    6、在一种实施方式中,所述通过碧根果制备的方法为:

    7、(1)碧根果剥壳后使用氢氧化钠溶液浸泡,剥皮、干燥、粉碎得到碧根果粉末;

    8、(2)将碧根果粉末与水混合,调节ph至10~12,水浴、离心得到上清液,调节上清液ph为4~5,离心得到沉淀即碧根果蛋白;

    9、(3)使用木瓜蛋白酶酶解碧根果蛋白,制备得到碧根果多肽;

    10、(4)使用葡聚糖凝胶柱sephadex g-15分离碧根果多肽,在紫外吸收峰为280nm下,收集得到活性肽h2;

    11、(5)采用制备液相进行纯化,使用反相柱分离活性肽h2,制备得到活性肽l3,l3中gal占比达到90.73%。

    12、在一种实施方式中,所述通过碧根果制备的方法为:

    13、(1)碧根果剥壳后使用浓度为0.2~0.6%w/v氢氧化钠溶液浸泡,加热至85~95℃搅拌10~20min,剥皮、55~65℃干燥6~10h干燥、粉碎得到碧根果粉末;

    14、(2)将碧根果粉末与水按照1g:15~30ml的用量比混合,调节ph至10~12,50~80℃水浴1~2h、超声处理5~30min,离心得到上清液,调节上清液ph为4~5,离心得到沉淀即碧根果蛋白;

    15、(3)使用木瓜蛋白酶(添加量500~10000u/g)酶解碧根果蛋白(底物浓度1040g/l),ph5.5~7.0、30~55℃酶解1~4h制备得到碧根果多肽;

    16、(4)使用葡聚糖凝胶柱sephadex g-15分离碧根果多肽,在紫外吸收峰为280nm下,出峰时间为43.6min时,收集得到活性肽h2;

    17、(5)基于制备液相色谱,使用反相柱分离活性肽h2,在紫外吸收峰为280nm下,经过多次纯化,制备得到活性肽l3,l3中gal占比达到90.73%。

    18、本发明的第三个目的是提供上述的活性肽或上述的核酸分子或上述的生物材料在制备抗氧化的产品或抑制α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性产品中的应用,所述产品包括食品、药品、保健品或化妆品。

    19、本发明的第四个目的是提供碧根果多肽或活性肽h2或活性肽l3在制备抗氧化的产品或抑制α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性的产品中的应用,所述产品包括食品、药品、保健品或化妆品;

    20、所述碧根果多肽的制备方法为:

    21、(1)碧根果剥壳后使用氢氧化钠溶液浸泡,剥皮、干燥、粉碎得到碧根果粉末;

    22、(2)将碧根果粉末与水混合,调节ph至10~12,水浴、离心得到上清液,调节上清液ph为4~5,离心得到沉淀即碧根果蛋白;

    23、(3)使用木瓜蛋白酶酶解碧根果蛋白,制备得到碧根果多肽;

    24、所述活性肽h2的制备方法为:

    25、使用葡聚糖凝胶柱sephadex g-15分离碧根果多肽,在紫外吸收峰为280nm下,收集得到活性肽h2;

    26、所述活性肽l3的制备方法为:

    27、使用制备液相色谱反相柱分离活性肽h2,制备得到活性肽l3。

    28、在一种实施方式中,采用制备液相色谱,使用反相柱分离活性肽h2时,经多次纯化,在紫外吸收峰为280nm下,在出峰时间为6.3min时,收集得到活性肽l3;

    29、本发明的第五个目的是提供一种产品,所述产品含有碧根果多肽、活性肽h2、活性肽l3、活性肽gal中的一种或多种。

    30、在一种实施方式中,所述碧根果多肽的制备方法为:

    31、(1)碧根果剥壳后使用氢氧化钠溶液浸泡,剥皮、干燥、粉碎得到碧根果粉末;

    32、(2)将碧根果粉末与水混合,调节ph至10~12,水浴、离心得到上清液,调节上清液ph为4~5,离心得到沉淀即碧根果蛋白;

    33、(3)使用木瓜蛋白酶酶解碧根果蛋白,制备得到碧根果多肽;

    34、所述活性肽h2的制备方法为:

    35、使用葡聚糖凝胶柱sephadex g-15分离碧根果多肽,在紫外吸收峰为280nm下,出峰时间为43.6min时,收集得到活性肽h2;

    36、所述活性肽l3的制备方法为

    37、使用制备液相色谱仪,通过反相柱分离活性肽h2,在紫外吸收峰为280nm下,出峰时间为6.3min时,制备得到活性肽l3;

    38、所述活性肽gal的制备方法为:

    39、所述方法包括通过碧根果制备或通过基因工程菌合成或通过人工合成。

    40、本发明的第六个目的是提供一种碧根果蛋白饮料,所述饮料含有碧根果蛋白肽,所述饮料的制备方法为:

    41、原料组成(w/v;g/100ml):将碧根果蛋白肽1~3%、乳粉1~24%、白砂糖0.5~3%、稳定剂单甘脂0.1~0.3%、羧甲基纤维素纳0~0.05%、黄原胶0~0.08%和水混合均匀后,剪切1~5min;温度60~83℃杀菌20~40min,制备得到;

    42、所述碧根果蛋白肽包括碧根果多肽、活性肽h2、活性肽l3、活性肽gal中的一种或多种。

    43、本发明的有益效果

    44、本发明以碧根果为原料,通过酶解法制备碧根果多肽,并进一步筛分得到具有较强抗氧化活性的短肽gal(gly-ala-leu)和不同的中间产物活性肽h2、l3,以期研制出口感细腻顺滑,甜度适中,性状均一稳定的碧根果蛋白肽饮料,丰富植物蛋白饮料产品;

    45、具体的:

    46、1、本发明制备得到的活性肽gal(gly-ala-leu)在浓度为0.1mg/ml时,dpph清除率达到86.1%;

    47、2、本发明制备得到的碧根果多肽、活性肽h2、活性肽l3和活性肽gal具有优秀的α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制活性,其中活性肽gal的抑制活性最强,对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的ic50分别为0.14mg/ml和0.25mg/ml;

    48、3、本发明基于碧根果多肽、活性肽h2、活性肽l3和活性肽gal制备的到的碧根果蛋白饮料稳定性强、感官风味好,为碧根果高价值化利用提供技术支撑。


    技术特征:

    1.一种活性肽,其特征在于,所述肽的氨基酸序列为gal(gly-ala-leu)。

    2.核酸分子,其特征在于,所述核酸分子用于编码权利要求1所述的活性肽。

    3.生物材料,其特征在于,所述生物材料含有权利要求2所述的核酸分子,所述生物材料为表达盒、转座子、质粒载体、病毒载体、工程菌或转基因细胞系。

    4.权利要求1所述的活性肽的制备方法,其特征在于,所述方法包括通过碧根果制备或通过基因工程菌合成或通过人工合成。

    5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述通过碧根果制备的方法为:

    6.权利要求1所述的活性肽或权利要求2所述的核酸分子或权利要求3所述的生物材料在制备抗氧化的产品或抑制α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性的产品中的应用,其特征在于,所述产品包括食品、药品、保健品或化妆品。

    7.碧根果多肽或活性肽h2或活性肽l3在制备抗氧化的产品或抑制α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶活性的产品中的应用,其特征在于,所述产品包括食品、药品、保健品或化妆品;

    8.一种产品,其特征在于,所述产品含有碧根果多肽、活性肽h2、活性肽l3、活性肽gal中的一种或多种。

    9.根据权利要求8所述的产品,其特征在于,所述碧根果多肽的制备方法为:

    10.一种碧根果蛋白饮料,其特征在于,所述饮料含有碧根果蛋白肽,所述饮料的制备方法为:


    技术总结
    本发明公开了一种碧根果蛋白肽及其饮料的制备方法,属于蛋白肽制备与食品领域。本发明以碧根果为原料,通过酶解法制备碧根果多肽,制备得到活性肽GAL,具有较高的抗氧化活性、α‑葡萄糖苷酶和α‑淀粉酶抑制活性,以期研制出口感细腻顺滑,甜度适中,性状均一稳定的碧根果蛋白肽饮料,丰富植物蛋白饮料产品。

    技术研发人员:陈其亮,杜小琳,王弘雪,辛旭
    受保护的技术使用者:无锡爱科派生物科技有限公司
    技术研发日:
    技术公布日:2024/10/24
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