本发明属于酶学,具体涉及一种海带甘露糖醛酸c5异构酶基因及其应用。
背景技术:
1、褐藻胶,又称为褐藻酸多糖,是由褐藻和细菌产生的一类多糖的总称。褐藻胶是由β-d-甘露糖醛酸(m)和其c5反向异构体α-l-古罗糖醛酸(g)两种单体组成的线型聚合物,是海带最主要的碳代谢产物。甘露糖醛酸c5异构酶(简称mc5e)是褐藻胶合成途径中一种重要的修饰酶,它能够在聚合物polym的基础上将β-d-甘露糖醛酸转换成α-l-古罗糖醛酸(g),褐藻胶中g含量越低,即m/g比值越高,则具有较低的凝胶强度和较高的柔韧性,褐藻胶中g含量越高,即m/g比值越低,则具有较高的凝胶强度和较高的刚性,以及更好的机械性能和更高的抗菌活性。
技术实现思路
1、本发明目的在于提供一种海带甘露糖醛酸c5异构酶基因及其在合成褐藻胶中的应用。
2、本发明首先提供一种海带甘露糖醛酸c5异构酶,包含有:
3、1)氨基酸序列为seq id no:1的蛋白酶,
4、2)在1)上取代、缺失、添加一个或数个氨基,由1)所衍生的蛋白酶;
5、mrpvleaaailsvfvsrlgafardtsspnsaiskpscnkgidvsvrysgrsdrlyiesangrtrggcitlkqiwnirdgegplyavdkngdisdkvtgrwlltddlyvkdgitlkvhgkkgggdadelrllstkkkyinlrghggnldfvhtkvwawdtdrnyydkdesdgrsfisvisevitnsrescsgkakddmgearmdivdsemaylgfqdsesygltwkvrgycsdkrnpdvfdkvnvygniydseihhnnfgvytyghkrgdwrrnrvhdnsgygfdphddsdyltihdnkvfdnewhgiiasercngvsiqgnevyggssnsagiflhrssnnaivkdnyvhdngdagiallevfdaevshntfkdnkygmrlsvgcgdnfiynndfidsskhnlltyigadkpeisknarskdnvfkenkfsgkgesvklkeaddtqflynrfysadkirfydcegtimkgntglssvdvkvthsscfdhkcddgfepmc(seq id no:1)。
6、本发明还提供用于编码上述海带甘露糖醛酸c5异构酶的基因,其一种核苷酸序列为seq id no:2;
7、atgaggccggttcttgaagcagctgctattctgagcgtatttgtttcccggctaggagccttcgcgagagacaccagctccccgaacagcgccatctccaagccgagctgcaacaagggcatcgacgtctcggttcgatactccggcagatctgaccggctgtacatcgagtcggccaacggacgaacccgaggcggatgcatcacattaaaacagatctggaacatcagggacggagagggacccttgtacgccgtcgacaagaacggcgacatcagcgacaaggtcacggggagatggctgctcacagacgacttgtacgtgaaagacggcatcacgctgaaggtgcacggtaaaaagggcggcggcgatgccgacgagctacgtctgctcagcacgaagaaaaagtacatcaacctgcgcgggcacggcgggaacctggattttgtgcacaccaaggtgtgggcctgggataccgatcgaaactactacgacaaagacgagtctgatgggcggtcgttcatcagcgttatctccgaggtaatcaccaacagcagggagagctgctctggcaaggccaaggacgacatgggagaggcgcggatggatatcgtggacagcgaaatggcctacctcggcttccaagacagcgagagctacggtctcacgtggaaggtccgcgggtactgctcggacaagaggaaccccgatgtgttcgacaaggtcaacgtctacggcaacatctacgattccgagatccaccacaacaacttcggggtctacacctacggccacaagaggggagactggaggaggaatagggtgcacgacaactccgggtacggcttcgacccccacgacgacagcgactacttgaccatccacgacaacaaggtgttcgacaacgagtggcacggcatcatcgcctccgagcgctgcaacggggtctccatccagggaaacgaggtctacggcggctccagcaattctgccggcatattccttcaccgaagtagcaacaacgccatcgtgaaagataactacgtgcatgacaacggcgacgccggaatagcgctgctggaggttttcgatgccgaagtttcccacaacaccttcaaggacaacaagtacggcatgaggctctccgtggggtgcggcgataacttcatctacaacaacgacttcatcgactcgagcaagcacaatctcttgacgtacattggcgcggacaagcccgaaatctcgaaaaatgcgcggtcgaaggacaacgttttcaaggagaacaagtttagcggcaagggagagagcgtgaagctcaaggaggccgatgacacccagttcctctacaacaggttctattccgccgacaagatccgcttctatgactgcgaagggacgatcatgaagggtaacaccggtctcagcagcgtcgacgtgaaggtcacccactcttcttgtttcgaccacaagtgtgacgatggcttcgagcccatgtgttag(seq id no:2)。
8、本发明再一个方面提供一种重组质粒,所述重组质粒中插入有上述的基因。
9、本发明还提供一种重组工程菌株,所述的重组工程菌株中携带有所述的重组质粒;
10、所述的重组工程菌株,为原核重组工程菌株。
11、本发明还提供所述的海带甘露糖醛酸c5异构酶的一种用途,是在催化β-d-甘露糖醛酸(m)转化成α-l-古罗糖醛酸(g)中的应用;
12、本发明所提供的海带甘露糖醛酸c5异构酶还用于合成褐藻胶。
13、本发明的海带mc5e蛋白可在原核表达系统中得到可溶性表达,能在聚合物polym的水平上将β-d-甘露糖醛酸(m)转化成α-l-古罗糖醛酸(g)。提高转化效率,提高反应产物中g残基含量,从而合成更高硬度的褐藻胶。
1.一种甘露糖醛酸c5异构酶,其特征在于,所述的甘露糖醛酸c5异构酶包含有:
2.一种基因,其特征在于,所述的基因编码权利要求1所述的甘露糖醛酸c5异构酶。
3.如权利要求2所述的基因,其特征在于,所述的基因的核苷酸序列为seq id no:2。
4.一种重组质粒,其特征在于,所述的重组质粒中插入有权利要求2所述的基因。
5.一种重组工程菌株,其特征在于,所述的重组工程菌株中携带有权利要求4所述的重组质粒。
6.如权利要求5所述的重组工程菌株,其特征在于,所述的重组工程菌株为原核重组工程菌株。
7.权利要求1所述的甘露糖醛酸c5异构酶在催化β-d-甘露糖醛酸(m)转化成α-l-古罗糖醛酸(g)中的应用。
8.权利要求1所述的甘露糖醛酸c5异构酶在合成褐藻胶中的应用。
9.一种催化β-d-甘露糖醛酸(m)转化成α-l-古罗糖醛酸(g)的方法,其特征在于,所述的方法是使用权利要求1所述的甘露糖醛酸c5异构酶进行催化。
10.一种合成褐藻胶的方法,其特征在于,所述的方法是使用权利要求1所述的甘露糖醛酸c5异构酶来合成褐藻胶。