本发明属于化妆品，具体是涉及一种基于半仿生提取技术的富含稀有人参皂苷ck提取物的制备方法及其应用。
背景技术：
1、人参(panax ginseng c.a.mayer)为五加科人参属多年生草本植物，主要生长在我国东北地区，是我国传统的名贵中草药，享有“百草之王”的美誉，人参在中国已有几千年的应用历史，具有广泛的药理和生物活性。人参中含有人参皂苷、人参多糖、挥发油及多种微量元素等多种成分，现代药理学研究表明，人参皂苷是最主要的活性成分。人参皂苷具有提高人体免疫力、抗肿瘤、抗疲劳、抗衰老等多种药理作用。研究表明，ck是一种由原人参二醇(ppd)型皂苷生物转化而来的脱糖代谢物，是ppd型人参皂苷在人体肠道内的主要代谢产物,比原型人参皂苷具有更高的生物活性与生物利用度，因此近年来很受关注。研究发现，人参皂苷ck在抗肿瘤、抗衰老、抗炎及保肝等方面有良好的药理作用，同时也有研究证明ck具有光保护、抗衰老、保湿和抗炎等多种美容护肤方面的作用，可以用做化妆品功效原料的开发。
2、人参皂苷ck由于其结构特性比原人参皂苷具有更高的药用价值，但在人参中含量极少甚至不存在，如何通过人参皂苷高效率、规模化制备人参皂苷ck具有很大的实用价值，也成为近些年研究的重点。人参皂苷ck制备方法主要有化学转化法和生物转化法。化学法主要利用酸水解糖苷键、氧化加成和乙酰化等反应改变取代基，该方法简便且快速，但容易产生环境污染、条件剧烈、副反应产物等问题，该法大规模制备人参皂苷ck较为困难。生物转化法包括微生物发酵、肠道菌群水解以及酶转化，其本质是通过β-葡萄糖苷酶的作用水解糖苷键将原人参皂苷转化为人参皂苷ck。生物转化保留了糖苷键的构型、糖苷配基的结构以及关键的次级糖苷或寡糖，该方法较化学方法条件更温和，主要反应类型为糖基水解反应。但目前人参稀有皂苷生物转化技术还不够成熟，存在选择性控制难、产物成分复杂、后期单体制备困难、收率偏低等不足之处。因此，积极开展稀有人参皂苷生物转化技术的持续研究，不断探索经济、高效的转化制备方法尤为重要。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种基于半仿生技术提取富含稀有人参皂苷ck的提取物的方法及其应用，采用本发明方法得到的提取物有效成分含量高，具有绿色环保、提取效率高的特点，且方法操作简便、耗能低、耗时短、适于规模化工业生产。
2、本发明的目的是通过以下技术方案实现的：
3、第一方面，本发明提供了一种基于半仿生提取技术的富含稀有人参皂苷ck提取物的制备方法，包括以下步骤：
4、s1、提取：将人参粉碎后过筛，所得人参粉加入8-12倍量水进行回流提取，过滤，得人参提取液；
5、s2、树脂纯化：将人参提取液上样至填装大孔树脂的树脂柱中，依次用纯化水、nahco3溶液、纯化水洗脱，洗脱液弃去；再用乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥，得干燥物a；
6、s3、半仿生提取：取干燥物a加入胰酶，再加入水溶解，并调节ph值为4.0-8.0；然后加入β-葡萄糖苷酶，搅拌至完全溶解后，置于25-50℃的水浴条件下搅拌4-30h，得半仿生提取液；
7、s4、树脂富集：将半仿生提取液上样至填装大孔树脂的树脂柱中，用纯化水洗脱，洗脱液弃去；再用乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩干燥，得富含稀有人参皂苷ck提取物。
8、作为优选方案，步骤s1中，所述过筛为过20-30目筛；所述回流提取的次数为2-3次，每次提取时间为1.5-2.5h。
9、作为优选方案，步骤s2中，所述大孔树脂为hpd-400；所述人参提取液的上样流速为0.4-0.6bv/h。
10、作为优选方案，步骤s2中，所述nahco3溶液为质量分数为1-3％的nahco3溶液。
11、作为优选方案，所述用纯化水、nahco3溶液、纯化水洗脱时，采用的纯化水体积各为2-4bv、nahco3溶液体积为2-4bv，采用的流速各为0.8-1.2bv/h。
12、作为优选方案，所述用乙醇洗脱时，采用的乙醇为质量分数为55-65％的乙醇，乙醇体积为2-4bv，流速为0.8-1.2bv/h。
13、作为优选方案，步骤s3中，所述干燥物a、胰酶、水的质量比为10：1-4：100-500。
14、作为优选方案，步骤s3中，所述干燥物a、β-葡萄糖苷酶的质量比为10：0.01-0.075。
15、作为优选方案，所述调节ph值为5.0-7.0；所述水浴的温度为30-45℃、提取时间为8-24h。
16、作为进一步优选方案，所述干燥物a、胰酶、β-葡萄糖苷酶、水的质量比为10：2-4：0.025-0.075:250-500；所述调节ph值为5.0-7.0；所述水浴的温度为25-37℃、提取时间为12-24h。在该条件下制备得到的富含稀有人参皂苷ck提取物中，ck含量达到了45mg/g以上。
17、作为最优方案，所述干燥物a、胰酶、β-葡萄糖苷酶、水的质量比为10：2-4：0.005-0.075:250-500；所述调节ph值为6.0；所述水浴的温度为37℃、提取时间为12-24h。在该条件下制备得到的富含稀有人参皂苷ck提取物中，ck含量达到了55mg/g以上。
18、作为优选方案，步骤s4中，所述大孔树脂为hpd-400；所述半仿生提取液的上样流速为0.4-0.6bv/h；
19、所述用纯化水洗脱时，纯化水体积为2-4bv，流速为0.8-1.2bv/h。
20、作为优选方案，所述用乙醇洗脱时，采用的乙醇为质量分数为65-75％的乙醇，乙醇体积为2-4bv，流速为0.8-1.2bv/h。
21、第二方面，本发明提供了一种根据前述的方法制备的富含稀有人参皂苷ck提取物，所述提取物中，稀有人参皂苷ck的含量为20mg/g以上。更优选稀有人参皂苷ck的含量为45mg/g以上，最优选稀有人参皂苷ck的含量为55mg/g以上。
22、第三方面，本发明提供了一种根据前述的富含稀有人参皂苷ck提取物在制备具有抗炎、舒缓作用的化妆品中的应用。
23、与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：
24、1)本发明针对现有技术存在的人参皂苷ck提取过程中提取率低、扩大生产难等的问题，通过先常规提取、所得提取液纯化后再模拟肠液进行半仿生提取，由此成功实现了提取物中人参皂苷ck的富集，最终提取物中人参皂苷ck含量显著提高，在20mg/g以上；并进一步通过对提取的条件进行优化后，可使提取物中人参皂苷ck含量高达55mg/g以上。
25、2)本发明的提取方法具有绿色环保、提取效率高的特点，且方法操作简便、耗能低、耗时短、适于规模化工业生产。
1.一种基于半仿生提取技术的富含稀有人参皂苷ck提取物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的基于半仿生提取技术的富含稀有人参皂苷ck提取物的制备方法，其特征在于，步骤s1中，所述过筛为过20-30目筛；所述回流提取的次数为2-3次，每次提取时间为1.5-2.5h。
3.根据权利要求1所述的基于半仿生提取技术的富含稀有人参皂苷ck提取物的制备方法，其特征在于，步骤s2中，所述大孔树脂为hpd-400；所述人参提取液的上样流速为0.4-0.6bv/h。
4.根据权利要求1所述的基于半仿生提取技术的富含稀有人参皂苷ck提取物的制备方法，其特征在于，步骤s2中，所述nahco3溶液为质量分数为1-3％的nahco3溶液；
5.根据权利要求1所述的基于半仿生提取技术的富含稀有人参皂苷ck提取物的制备方法，其特征在于，步骤s3中，所述干燥物a、胰酶、水的质量比为10：1-4：100-500。
6.根据权利要求5所述的基于半仿生提取技术的富含稀有人参皂苷ck提取物的制备方法，其特征在于，步骤s3中，所述干燥物a、β-葡萄糖苷酶的质量比为10：0.01-0.075。
7.根据权利要求1所述的基于半仿生提取技术的富含稀有人参皂苷ck提取物的制备方法，其特征在于，步骤s3中，所述调节ph值为5.0-7.0；所述水浴的温度为30-45℃、提取时间为8-24h。
8.根据权利要求1所述的基于半仿生提取技术的富含稀有人参皂苷ck提取物的制备方法，其特征在于，步骤s4中，所述大孔树脂为hpd-400；所述半仿生提取液的上样流速为0.4-0.6bv/h；
9.一种根据权利要求1-8任一项所述的方法制备的富含稀有人参皂苷ck提取物，其特征在于，所述提取物中，稀有人参皂苷ck的含量为20mg/g以上。
10.一种根据权利要求9所述的富含稀有人参皂苷ck提取物在制备具有抗炎、舒缓作用的化妆品中的应用。
