本发明涉及一种外泌体制剂,具体涉及一种治疗老年痴呆的外泌体制剂。
背景技术:
1、老年性痴呆又叫阿尔茨海默病,是一种中枢神经系统变性病,起病隐袭,病程呈慢性进行性,严重影响社交、职业与生活功能,随着全球老龄化趋势的加剧,老年性痴呆患者激增,目前已成为继心血管疾病、癌症和中风之后严重威胁老年人健康的又一大疾病。
2、目前临床常用胆碱酯酶抑制剂(如多奈哌齐)和n-甲基-d-天冬氨酸受体拮抗剂(如美金刚)为主要治疗药物,但这些药物只能用于改善和缓解症状,无法彻底根治这一疾病,且不同程度的存在一定的副作用,老年性痴呆的治疗涉及通过nep(脑啡肽酶)和ide(胰岛素降解酶)活性清除致病蛋白β-淀粉样蛋白,具有nep和ide活性的间充质干细胞来源的外泌体可减少转基因小鼠中的aβ斑块,表明其具有治疗ad的潜力。但外泌体来源、给药途径以及外泌体内发挥疗效的成分仍需要进一步优化。
3、因此,研究开发安全有效的新型老年性痴呆治疗药物具有重要的意义,针对于此,本领域技术人员提出一种治疗老年痴呆的外泌体制剂,对于阿尔茨海默症具有较优的治愈效果。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足,本发明提供了一种治疗老年痴呆的外泌体制剂,针对阿尔茨海默症的发病机理,运用中药成分及生物成分配置具有治疗作用的制剂,实现对病情的控制并治疗。
2、一方面,本申请实施例提供一种治疗老年痴呆的外泌体制剂,包括如下重量百分比的原料:脂肪间充质细胞外泌体26-40%、混合提取物15-30%和添加物40-58%。
3、另一方面,本申请实施例提供一种治疗老年痴呆的外泌体制剂的制备方法,包括如下步骤:将脂肪间充质细胞外泌体、混合提取物和添加物混合搅拌均匀后,得到外泌体制剂成品。
4、再另一方面,本申请实施例提供一种治疗老年痴呆的外泌体制剂的制备方法,包括如下特殊处理步骤:更换为无血清培养液后,添加如下刺激因子:15ng/ml tnf-α,10ng/ml ifn-γ,10ng/ml ctgf和0.01μm aβ1-42,目的是提高外泌体中脑啡肽酶的含量,促进培养细胞的细胞膜表面β-淀粉样蛋白发生降解。
5、优选的,所述间充质细胞外泌体通过如下方法制备:
6、取人脂肪间充质干细胞,在37℃环境下在低糖培养液(低糖dmem,fbs10%)中进行细胞增殖培养,孵育7天后,每隔3天换液一次,当细胞铺满培养瓶的瓶底至少85%时进行传代;
7、将第3代细胞培养于高糖培养液(高糖dmem,fbs10%)中,待融合至75%时,更换为无血清培养液,并添加刺激因子进行培养72h,取培养液的上清液,通过超速离心法获取间充质细胞外泌体成分。
8、优选的,所述混合提取物通过如下方法制备:
9、取3-5重量份的人参、5-10重量份的白术、1-5重量份的熟地、3-8重量份的杏仁、1-5重量份的阿胶、2-8重量份的巴戟天、1-3重量份的五味子、5-10重量份的天竺黄和1-5重量份的龙齿,破碎到粒径50-150目,再进行成分混合,得到所述的混合原料;
10、将混合原料与乙醇按照体积浓度为1:(8-12)的重量比进行配置混合,在80℃下回流提取1-2小时重复进行提取1-3次,对滤液中的乙醇进行减压回收得到浸膏,再将浸膏干燥成粉,得到混合提取物。
11、优选的,所述混合原料与乙醇按照体积浓度为1:(8-12)的重量比进行配置,所述乙醇的体积浓度为70-80%,所述干燥成粉具体是在-0.07mpa、60-70℃的环境下进行。
12、优选的,所述添加物包括纯化水和瓜尔胶的等比例混合物。
13、一种治疗老年痴呆外泌体制剂的制备方法,包括如下步骤:
14、将间充质细胞外泌体、混合提取物和添加物混合按照比例混合并搅拌均匀,直接得到所需要,具有治疗作用的外泌体制剂成品。
15、本发明公开了一种治疗老年痴呆的外泌体制剂,其具备的有益效果如下:
16、1、该治疗老年痴呆的外泌体制剂,本申请以脂肪间充质细胞获取外泌体,并通过添加特殊刺激因子,提高外泌体中脑啡肽酶的含量,并通过其他物质发挥免疫调剂、神经保护和神经元分化作用,诱导血管生成和神经发生,增加突触连接,调节免疫微环境,减少神经元的凋亡,保持神经元活性,同时促进吞噬aβ淀粉样蛋白,有效减轻aβ淀粉样蛋白沉积在脑内的异常沉积,增强对aβ淀粉样蛋白的清除,减少老年斑沉积,缓解神经炎症反应和氧化应激损失,从而对老年痴呆起到治疗作用。
17、2、混合提取物以博大精深的中医药血为基础,精确选方用药,以起到补肾养髓、补肝滋血、活血祛瘀和安神益智的功效,最终对老年痴呆起到突出的治疗效果。两者相互结合,从而有效治疗老年痴呆。添加物为溶剂,能够便于将药物导出,且本制剂为经过鼻腔给药,能够通过皮肤渗透作用,将有效成分传递到脑转运,高效率治疗老年痴呆。
1.一种治疗老年痴呆的外泌体制剂,其特征在于,包括如下重量百分比的原料:间充质细胞外泌体26-40%,混合提取物15-30%和添加物40-58%。
2.如权利要求1所述的治疗老年痴呆的外泌体制剂,其特征在于:所述间充质细胞外泌体通过如下方法制备:
3.如权利要求2所述的治疗老年痴呆的外泌体制剂,其特征在于:所述间充质细胞具体为人脂肪间充质干细胞。
4.如权利要求2所述的治疗老年痴呆的外泌体制剂,其特征在于:添加的刺激因子包括15ng/ml tnf-α,10ng/ml ifn-γ,10ng/ml ctgf和0.01μm aβ1-42成分。
5.如权利要求2所述的治疗老年痴呆的外泌体制剂,其特征在于:添加刺激因子使外泌体中的脑啡肽酶含量显著升高,促进培养细胞的细胞膜表面β-淀粉样蛋白发生降解。
6.如权利要求1所述的治疗老年痴呆的外泌体制剂,其特征在于:所述混合提取物通过如下方法制备:
7.如权利要求6所述的治疗老年痴呆的外泌体制剂,其特征在于:所述混合原料包括3-5重量份的人参、5-10重量份的白术、1-5重量份的熟地、3-8重量份的杏仁、1-5重量份的阿胶、2-8重量份的巴戟天、1-3重量份的五味子、5-10重量份的天竺黄和1-5重量份的龙齿。
8.如权利要求6所述的治疗老年痴呆的外泌体制剂,其特征在于:所述混合原料与乙醇按照体积浓度为1:(8-12)的重量比进行配置,所述乙醇的体积浓度为70-80%,所述干燥成粉具体是在-0.07mpa、60-70℃的环境下进行。
9.如权利要求1所述的治疗老年痴呆的外泌体制剂,其特征在于:所述添加物包括纯化水和瓜尔胶的等比例混合物。
10.基于以上权利要求1-9中任一项所述治疗老年痴呆外泌体制剂的制备方法,其特征在于,包括如下步骤: