本发明涉及植物组织提取培养，具体涉及一种植物愈伤组织提取物及其制备方法和应用。
背景技术：
1、从植物药材中提取植物活性成分的传统途径受限于自然中温度、光照的变化及恶劣气候等不良因素对植物的不利影响以及活性化合物在植物器官中不同部位的含量限制，不论是提取物的产量还是质量经常不尽如人意。而植物愈伤组织的培养可以避免上述不利因素的困扰，特别是可以有效解决珍稀资源产物提取匮乏的难题。
2、然而当前对于植物愈伤组织提取物的研究相对有限，现有技术cn117815148b公开了一种牡丹愈伤组织提取物及其制备方法与应用，cn114403004a公开了一种人参愈伤组织诱导方法及提取物在化妆品中的应用，但是其针对的植物愈伤组织单一，且制备工艺复杂，采用上述方法得到的提取物性能有待进一步提升。
技术实现思路
1、为了解决现有技术中的问题，本发明第一方面提供了一种植物愈伤组织提取物的制备方法，至少包括以下步骤：采集植物组织，经过预处理、第一培养基培养、第二培养基培养、酶解过滤，得到植物愈伤组织提取物；所述酶解过滤中采用复合酶进行酶解处理，所述复合酶包括淀粉酶、纤维素酶、果胶酶和蛋白酶，所述淀粉酶、纤维素酶、果胶酶和蛋白酶的质量比为（1-3）：（1-3）：（1-2）：（1-2）。
2、作为一种优选的实施方式，所述植物组织包括茉莉花叶、滨海剌芹叶、高山火绒草根、海茴香叶、人参根和叶、雪莲花叶、苹果果实，葡萄叶和果实，蔷薇叶、没药根、莲叶中的一种。
3、作为一种优选的实施方式，所述预处理包括以下步骤：
4、用水冲洗植物组织后依次经过质量浓度70%酒精浸泡消毒、质量浓度0.1% hgcl2浸泡消毒、无菌水冲洗后，用无菌滤纸吸干水分，将植物组织切割成0.5×0.5cm2的正方形。
5、作为一种优选的实施方式，所述预处理步骤具体为：
6、用水冲洗植物组织30-40min后依次经过质量浓度70%酒精浸泡消毒8-10s、质量浓度0.1% hgcl2浸泡消毒5-8min、无菌水冲洗4-6次后，用无菌滤纸吸干水分，将植物组织切割成0.5×0.5cm2的正方形。
7、作为一种优选的实施方式，所述第一培养基培养包括以下步骤：
8、将切割后的植物组织接入到ms培养基中，添加1.0-1.5mg/l 2,4-d、0.1mg/l a-萘乙酸、6.5g/l琼脂、质量浓度3-4%蔗糖和1%海藻糖，并调节ph至5.7-6.0于黑暗条件下培养7-15天，然后转移至8h/d光照条件下培养10-20天。
9、作为一种优选的实施方式，所述8h/d光照条件具体为：8小时光照，16小时黑暗；培养温度为20-24℃、光照强度为2000-2500lx。
10、作为一种优选的实施方式，所述第二培养基培养包括以下步骤：
11、将第一培养基培养所得物继代转接到含有0.5mg/l a-萘乙酸、0.3-0.5mg/l 6-ba、6.0g/l琼脂、质量浓度3-4%蔗糖和1%海藻糖的1/2ms培养基中，在12h/d光照条件下15-30天，培养3-5代，得植物愈伤组织。
12、作为一种优选的实施方式，所述12h/d光照条件具体为：每天6:00-18:00进行光照，光照强度为2000-2500lx，培养温度为23-28℃。
13、申请人在实验过程中发现，当控制培养基培养过程中的光照条件，具体为第一培养基8h/d光照条件下培养，第二培养基12h/d光照条件培养，不仅可以提升植物愈伤组织鲜重及诱导率，避免褐化现象的产生，同时还能进一步提升植物愈伤组织提取物的活性。
14、作为一种优选的实施方式，所述复合酶为淀粉酶、纤维素酶、果胶酶和蛋白酶。
15、作为一种优选的实施方式，所述淀粉酶、纤维素酶、果胶酶和蛋白酶的质量比为2：2：1.5：1.5。
16、作为一种优选的实施方式，所述酶解过滤的步骤具体为：用镊子镊取植物愈伤组织用纯水清洗干净后，加5倍水，高速破壁匀浆机匀浆20-30min，加入总质量1%的复合酶，复合酶为淀粉酶、纤维素酶、果胶酶和蛋白酶，其质量比为在（1-3）：（1-3）：（1-2）：（1-2），在35-37℃酶解处理1-2h，随后在10000-16000rpm条件下离心10min得到上清液，通过1μm过滤膜得到澄清液，即为植物愈伤组织提取物。
17、本发明第二方面提供了一种植物愈伤组织提取物，采用上述植物愈伤组织提取物的制备方法制备得到。
18、本发明第三方面提供了一种植物愈伤组织提取物在化妆品技术领域中的应用。
19、有益效果
20、1、本发明培养方法操作简便，材料成本低，设备要求低，污染率极低；中间产物植物愈伤组织出愈率高，可达98-100%。
21、2、本发明诱导时间较短，通过在培养中增加海藻糖并严格控制其用量，适用于多种植物组织，有利于愈伤组织生长健康，培养得到的愈伤组织呈黄白色或黄绿色，富有光泽，质地紧密，生长速度快，每瓶愈伤组织鲜重为6.50-9.80g。
22、3、本发明中通过第一培养基和第二培养基培养得到植物愈伤组织可以为植物幼体提供适宜的、条件均一的微小气候环境，摆脱自然中温度、光照的变化及恶劣气候等不良因素对植物幼体的不利影响，对植物细胞生长非常有利，且一般次生代谢产物含量高的植物或器官诱导出的愈伤组织次生代谢物的含量也会较高。因此，利用组织培养大规模地生产愈伤组织解决了珍稀资源产物提取匮乏的难题。
23、4、本发明通过严格控制光照和黑暗比，以及培养基中的物质组成，可以使得在植物愈伤组织的培养过程无褐化现象，同时通过特定组成的复合酶的协同作用，可以更高效提取愈伤组织的活性成分，确保了植物愈伤组织提取物的活性最大化。
24、5、本发明制备的植物愈伤组织提取物具有良好的抗氧化性和舒缓功效，在化妆品领域具有广泛的应用价值。
1.一种植物愈伤组织提取物的制备方法，其特征在于，至少包括以下步骤：采集植物组织，经过预处理、第一培养基培养、第二培养基培养、酶解过滤，得到植物愈伤组织提取物；
2.根据权利要求1所述的植物愈伤组织提取物的制备方法，其特征在于，所述预处理包括以下步骤：
3.根据权利要求1所述的植物愈伤组织提取物的制备方法，其特征在于，所述第一培养基培养包括以下步骤：
4.根据权利要求3所述的植物愈伤组织提取物的制备方法，其特征在于，所述8h/d光照条件具体为：8小时光照，16小时黑暗；培养温度为20-24℃、光照强度为2000-2500lx。
5.根据权利要求1所述的植物愈伤组织提取物的制备方法，其特征在于，所述第二培养基培养包括以下步骤：
6.根据权利要求5所述的植物愈伤组织提取物的制备方法，其特征在于，所述12h/d光照条件为：每天6:00-18:00进行光照，光照强度为2000-2500lx，培养温度为23-28℃。
7.根据权利要求1所述的植物愈伤组织提取物的制备方法，其特征在于，所述淀粉酶、纤维素酶、果胶酶和蛋白酶的质量比为2：2：1.5：1.5。
8.一种植物愈伤组织提取物，其特征在于，采用权利要求1-7任一项所述的植物愈伤组织提取物的制备方法制备得到。
9.一种根据权利要求8所述的植物愈伤组织提取物在化妆品技术领域中的应用。
