所属通常知识者已知，当药物用于治疗组合时，治疗有效剂量可以变化。文献中描述了用于实验确定用于组合治疗方案的药物与其他药剂的治疗有效剂量的方法。例如，在文献中已广泛描述了规律性给药的使用，即提供更频繁、更低剂量以使毒副作用最小化。组合治疗还包括在不同时间开始和停止以帮助患者的临床管理的周期性治疗。对于本发明所述的组合疗法，共同施用的化合物的剂量当然将取决于所用共同药物的类型、所用具体药物、所治疗的疾病或病症等而变化。此外，当与一种或多种生物活性剂共同施用时，本发明提供的化合物可与生物活性剂同时或依序施用。如果依序施用，主治医师将决定蛋白质与生物活性剂组合施用的适当顺序。在任何情况下，多种治疗剂(其中之一是本发明所述的式(p-i)、式(i)-式(lxiiib)、式(p2-i)、式(p4-i)-(p4-vb)或式(p5-i’)-(p5-vd)所示化合物)可以任何顺序施用或甚至同时施用。如果同时施用，多种治疗剂可以单一、统一的形式或以多种形式(仅作为实例，作为单一丸剂或作为两个分开的丸剂)提供。治疗剂之一可以多剂量给予，或两者均可以多剂量给予。如果不同时施用，多剂量之间的时间可在大于0周至小于4周之间变化。此外，组合方法、组合物和制剂不限于仅使用两种药物；还设想了多种治疗组合的使用。应当理解，治疗、预防或改善寻求缓解的病症的剂量方案可根据多种因素进行修改。这些因素包括受试者患有的病症，以及受试者的年龄、体重、性别、饮食和医学状况。因此，实际采用的剂量方案可广泛变化，因此可偏离本发明所述的剂量方案。构成本发明公开的组合疗法的药剂可以是组合剂型或旨在基本上同时施用的单独剂型。构成组合疗法的药剂亦可依序施用，其中任一治疗化合物通过需要两步施用的方案进行施用。两步施用方案可要求活性剂的顺序给药或单独活性剂的间隔给药。多个给药步骤之间的时间间隔可在几分钟至几小时的范围内，具体取决于每种药剂的性质，例如药剂的效力、溶解度、生物利用度、血浆半衰期和动力学曲线。目标分子浓度的昼夜节律变化亦可决定最佳给药间隔。此外，本发明所述化合物还可与可为患者提供额外或协同益处的程序组合使用。仅作为实例，预期患者在本发明所述方法中发现治疗和/或预防益处，其中本发明公开的化合物的药物组合物和/或与其他治疗剂的组合与遗传测试组合以确定个体是否是已知与某些疾病或病症相关的突变型基因的携带者。本发明所述化合物及组合疗法可在疾病或病况发生之前、期间或之后施用，并且施用含有化合物的组合物的时机可变化。因此，例如，所述化合物可用作预防剂并可连续施用于具有发展病症或疾病倾向的受试者以预防所述疾病或病症的发生。化合物及组合物可在症状发作期间或在症状发作后尽快施用于受试者。化合物的施用可在症状发作的前48小时内，在症状发作的前6小时内或在症状发作的3小时内开始。初始施用可经由任何可行的途径，例如静脉内注射、快速注射、在5分钟至约5小时内输注、丸剂、胶囊、经皮贴片、经颊递送等，或其组合。化合物应在检测到或怀疑疾病或病症发作后尽可能快地施用，并持续治疗疾病所需的时间长度，例如约1个月至约3个月。治疗的长度可针对每个受试者而变化，并且所述长度可使用已知标准来确定。例如，化合物或含有所述化合物的制剂可施用至少2周、约1个月至约5年、或约1个月至约3年。10.与flt3抑制剂化合物组合使用的示例性治疗剂可与flt3抑制剂化合物组合使用的其他抗癌剂包括：阿霉素(adriamycin)、放线菌素d(dactinomycin)、博来霉素(bleomycin)、长春花碱(vinblastine)、顺铂(cisplatin)、阿西维辛(acivicin)；阿柔比星(aclarubicin)；盐酸阿考达唑(acodazolehydrochloride)；甘油柑碱(acronine)；阿多来新(adozelesin)；阿地白介素(aldesleukin)；六甲蜜胺(altretamine)；安波霉素(ambomycin)；乙酸阿美蒽醌(ametantrone acetate)；安鲁米特(aminoglutethimide)；安吖啶(amsacrine)；阿那曲唑(anastrozole)；氨茴霉素(anthramycin)；天冬氨酸酶；曲林菌素(asperlin)；阿扎胞苷(azacitidine)；阿扎替派(azetepa)；阿佐霉素(azotomycin)；巴马司他(batimastat)；苯佐替派(benzodepa)；比卡鲁胺(bicalutamide)；盐酸比生群(bisantrenehydrochloride)；二甲磺酸双奈法德(bisnafide dimesylate)；比折来新(bizelesin)；硫酸博来霉素(bleomycin sulfate)；布喹那钠(brequinar sodium)；溴匹立明(bropirimine)；白消安(busulfan)；放线菌素c(cactinomycin)；卡鲁睾酮(calusterone)；卡醋胺(caracemide)；卡贝替姆(carbetimer)；卡铂(carboplatin)；卡莫司汀(carmustine)；盐酸卡柔比星(carubicin hydrochloride)；卡折来新(carzelesin)；西地芬戈(cedefingol)；苯丁酸氮芥(chlorambucil)；西罗霉素(cirolemycin)；克拉屈滨(cladribine)；甲磺酸克立那托(crisnatol mesylate)；环磷酰胺；阿糖胞苷(cytarabine)；达卡巴嗪(dacarbazine)；盐酸道诺霉素(daunorubicin hydrochloride)；地西他滨(decitabine)；右奥马铂(dexormaplatin)；地扎胍宁(dezaguanine)；甲磺酸地扎胍宁(dezaguanine mesylate)；地吖醌(diaziquone)；多柔比星(doxorubicin)；盐酸多柔比星(doxorubicin hydrochloride)；屈洛昔芬(droloxifene)；柠檬酸屈洛昔芬(droloxifene citrate)；丙酸屈他雄酮(dromostanolone propionate)；偶氮霉素(duazomycin)；依达曲沙(edatrexate)；盐酸依氟鸟氨酸(eflornithine hydrochloride)；依沙芦星(elsamitrucin)；恩洛铂(enloplatin)；恩普氨酯(enpromate)；依匹哌啶(epipropidine)；盐酸表柔比星(epirubicin hydrochloride)；厄布洛唑(erbulozole)；盐酸依索比星(esorubicin hydrochloride)；雌氮芥(estramustine)；雌氮芥磷酸钠盐；依他硝唑(etanidazole)；依托泊苷(etoposide)；磷酸依托泊苷；氯苯乙嘧胺(etoprine)；盐酸法倔唑(fadrozole hydrochloride)；法扎拉滨(fazarabine)；芬维a胺(fenretinide)；氟脲嘧啶脱氧核苷(floxuridine)；磷酸氟达拉滨(fludarabine phosphate)；氟尿嘧啶(fluorouracil)；氟西他滨(flurocitabine)；磷喹酮(fosquidone)；福司曲星钠(fostriecin sodium)；吉西他滨(gemcitabine)；盐酸吉西他滨；羟基脲；盐酸伊达比星(idarubicin hydrochloride)；异环磷酰胺(ifosfamide)；伊莫福新(iimofosine)；白介素ii(包括重组白介素ii、或rll2)、干扰素α-2a；干扰素α-2b；干扰素α-n1；干扰素α-n3；干扰素β-1a；干扰素γ-1b；异丙铂(iproplatin)；盐酸伊立替康(irinotecan hydrochloride)；乙酸兰瑞肽(lanreotide acetate)；来曲唑(letrozole)；乙酸亮丙瑞林(leuprolideacetate)；盐酸利阿唑(liarozole hydrochloride)；洛美曲索钠(lometrexol sodium)；洛莫司汀(lomustine)；盐酸洛索蒽醌(losoxantrone hydrochloride)；马索罗酚(masoprocol)；美登素(maytansine)；二氯甲基二乙胺盐酸盐(mechlorethaminehydrochloride)；乙酸甲地孕酮(megestrol acetate)；乙酸美仑孕酮(melengestrolacetate)；马法兰(melphalan)；美诺立尔(menogaril)；巯基嘌呤；甲氨蝶呤(methotrexate)；甲氨蝶呤钠(methotrexate sodium)；氯苯氨啶(metoprine)；美妥替哌(meturedepa)；米丁度胺(mitindomide)；米托卡星(mitocarcin)；丝裂红素(mitocromin)；米托洁林(mitogillin)；米托马星(mitomalcin)；丝裂霉素(mitomycin)；米托司培(mitosper)；米托坦(mitotane)；盐酸米托蒽醌(mitoxantrone hydrochloride)；霉酚酸(mycophenolic acid)；诺考达唑(nocodazoie)；诺拉霉素(nogalamycin)；奥马铂(ormaplatin)；奥昔舒仑(oxisuran)；培门冬酶(pegaspargase)；培利霉素(peliomycin)；戊氮芥(pentamustine)；硫酸培洛霉素(peplomycin sulfate)；培磷酰胺(perfosfamide)；双溴丙基哌嗪(pipobroman)；哌泊舒凡(piposulfan)；盐酸吡罗蒽醌(piroxantronehydrochloride)；普卡霉素(plicamycin)；普洛美坦(plomestane)；卜吩姆钠(porfimersodium)；泊非霉素(porfiromycin)；泼尼莫司汀(prednimustine)；盐酸丙卡巴肼(procarbazine hydrochloride)；嘌呤霉素(puromycin)；盐酸嘌呤霉素(puromycinhydrochloride)；吡唑呋喃菌素(pyrazofurin)；利波腺苷(riboprine)；罗谷亚胺(rogletimide)；沙芬戈(safingol)；盐酸沙芬戈；司莫司汀(semustine)；辛曲秦(simtrazene)；磷乙酰天冬氨酸钠(sparfosate sodium)；稀疏霉素(sparsomycin)；盐酸锗螺胺(spirogermanium hydrochloride)；螺莫司汀(spiromustine)；螺铂(spiroplatin)；链黑霉素(streptonigrin)；链脲佐菌素(streptozocin)；磺氯苯脲(sulofenur)；他利霉素(talisomycin)；替可加兰钠(tecogalan sodium)；替加氟(tegafur)；盐酸替洛蒽醌(teloxantrone hydrochloride)；替莫泊芬(temoporfin)；替尼泊苷(teniposide)；替罗昔隆(teroxirone)；睾内酯(testolactone)；硫咪嘌呤(thiamiprine)；硫鸟嘌呤(thioguanine)；噻替哌(thiotepa)；噻唑羧胺核苷(tiazofurin)；替拉扎明(tirapazamine)；柠檬酸托瑞米芬(toremifene citrate)；乙酸曲托龙(trestoloneacetate)；磷酸曲西立滨(triciribine phosphate)；三甲曲沙(trimetrexate)；葡糖醛酸三甲曲沙(trimetrexate glucoronate)；曲普瑞林(triptorelin)；盐酸妥布氯唑(tubulozole hydrochloride)；尿嘧啶氮芥(uracil mustard)；乌瑞替派(uredepa)；伐普肽(vapreotide)；维替泊芬(verteporfin)；硫酸长春花碱(vinblastine sulfate)；硫酸长春新碱(vincristine sulfate)；长春地辛(vindesine)；硫酸长春地辛(vindesinesulfate)；硫酸长春匹定(vinepidine sulfate)；硫酸长春甘酯(vinglycinate sulfate)；硫酸长春罗辛(vinleurosine sulfate)；酒石酸长春瑞滨(vinorelbine tartrate)；硫酸长春罗定(vinrosidine sulfate)；硫酸长春利定(vinzolidine sulfate)；伏氯唑(vorozole)；折尼铂(zeniplatin)；净司他丁(zinostatin)；盐酸佐柔比星(zorubicinhydrochloride)。可与flt3抑制剂化合物组合使用的其他抗癌剂包括：20-表-1,25二羟基维生素d3；5-乙炔基尿嘧啶；阿比特龙(abiraterone)；阿柔比星(aclarubicin)；酰基富烯(acylfulvene)；腺环戊醇(adecypenol)；阿多来新(adozelesin)；阿地白介素(aldesleukin)；all-tk拮抗剂类；六甲蜜胺(altretamine)；氨莫司汀(ambamustine)；2,4二氯苯氧乙酸(amidox)；阿米福汀(amifostine)；氨基酮戊酸(aminolevulinic acid)；氨柔比星(amrubicin)；安吖啶(amsacrine)；阿那格雷(anagrelide)；阿那曲唑(anastrozole)；穿心莲内酯(andrographolide)；血管生成不可逆抑制剂类；拮抗剂d；拮抗剂g；安塔利斯(antarelix)；抗背部形态发生蛋白-1；抗雄激素，前列腺癌；抗雌激素；抗肿瘤物质(antineoplaston)；反义寡核苷酸；艾菲地可宁甘氨酸盐(aphidicolinglycinate)；细胞凋亡基因调控剂类；细胞凋亡调节剂类；类嘌呤酸(apurinic acid)；ara-cdp-dl-ptba；精氨酸脱氨酶；阿舒拉克林(asulacrine)；阿他美坦(atamestane)；阿莫司汀(atrimustine)；洋虫胶抑制素1(axinastatin 1)；洋虫胶抑制素2(axinastatin 2)；洋虫胶抑制素3(axinastatin3)；阿扎司琼(azasetron)；阿扎毒素(azatoxin)；氮杂酪氨酸；浆果赤霉素iii(baccatin iii)衍生物类；博拉诺(balanol)；巴马司他(batimastat)；bcr/abl拮抗剂类；苯并二氢氯吩(benzochlorins)；苯甲酰星形孢菌素(benzoylstaurosporine)；β-内酰胺衍生物类；β-艾利辛(β-alethine)；紫红霉素b(betaclamycin b)；桦木酸；bfgf抑制剂；比卡鲁胺(bicalutamide)；比生群(bisantrene)；双乙烯亚氨基精胺(bisaziridinylspermine)；双奈法德(bisnafide)；双崔特a(bistratene a)；比折来新(bizelesin)；布来福林(breflate)；溴匹立明(bropirimine)；布度钛(budotitane)；丁硫氨酸亚砜胺(buthionine sulfoximine)；卡泊三醇(calcipotriol)；钙磷酸蛋白(calphostin c)；喜树碱衍生物类；金丝雀痘il-2(canarypoxil-2)；卡培他滨(capecitabine)；羧酰胺-氨基-三唑；羧酰胺基三唑；carest m3；carn700；软骨源抑制剂；卡折来新(carzelesin)；酪蛋白激酶不可逆抑制剂类(icos)；粟精胺(castanospermine)；天蚕抗菌肽b(cecropin b)；西曲瑞克(cetrorelix)；二氢卟酚(chlorlns)；磺胺氯代喹喔啉(chloroquinoxaline sulfonamide)；西卡前列素(cicaprost)；顺卟啉(cis-porphyrin)；克拉屈滨(cladribine)；氯米芬类似物(clomifeneanalogues)；克霉唑(clotrimazole)；克里斯霉素(collismycin)a；克里斯霉素(collismycin)b；康普瑞丁a4(combretastatin a4)；康普瑞丁类似物；康进宁(conagenin)；五环胍类生物碱(crambescidin 816)；克立那托(crisnatol)；念珠藻环肽8(cryptophycin 8)；念珠藻环肽a(cryptophycin a)衍生物类；鞘丝藻素(curacin a)；环戊烷蒽醌类(cyclopentanthraquinones)；环铂(cycloplatam)；环青霉素(cypemycin)、阿糖胞苷十八烷基磷酸盐(cytarabine ocfosfate)；溶胞因子；磷酸己烷雌酚(cytostatin)；达昔单抗(dacliximab)；地西他滨(decitabine)；脱氢膜海鞘素b(dehydrodidemnin b)；地洛瑞林(deslorelin)；地塞米松(dexamethasone)；右异环磷酰胺(dexifosfamide)；右雷佐生(dexrazoxane)；右维拉帕米(dexverapamil)；地吖醌(diaziquone)；膜海鞘素b(didemninb)；第达(didox)；二乙基去甲精胺(diethylnorspermine)；二氢-5-氮杂胞苷；9-二氧黄溶霉素(9-dioxamycin)；二苯基螺莫司汀(diphenylspiromustine)；二十二烷醇(docosanol)；多拉司琼(dolasetron)；脱氧氟尿苷(doxifluridine)；屈洛昔芬(droloxifene)；屈大麻酚(dronabinol)；倍癌霉素(duocannycin sa)；依布硒(ebselen)；依考莫司汀(ecomustine)；依地福新(edelfosine)；依决洛单抗(edrecolomab)；依氟鸟氨酸(eflornithine)；榄香烯(elemene)；乙嘧替氟(emitefur)；表柔比星(epirubicin)；爱普列特(epristeride)；雌氮芥类似物(estramustine analogue)；雌激素激动剂；雌激素拮抗剂；依他硝唑(etanidazole)；磷酸依托泊苷(etoposide phosphate)；依西美坦(exemestane)；法倔唑(fadrozole)；法扎拉滨(fazarabine)；芬维a胺(fenretinide)；非格司亭(filgrastim)；非那雄胺(finasteride)；夫拉平度(flavopiridol)；氟卓斯汀(flezelastine)；氟海星酮(fluasterone)；氟达拉滨(fludarabine)；盐酸氟代柔红霉素(fluorodaunorunicin hydrochloride)；福酚美克(forfenimex)；福美坦(formestane)；福司曲星(fostriecin)；福莫司汀(fotemustine)；德克萨卟啉钆(gadolinium texaphyrin)；硝酸镓(gallium nitrate)；加洛他滨(galocitabine)；加尼瑞克(ganirelix)；明胶酶不可逆抑制剂；吉西他滨(gemcitabine)；谷胱甘肽不可逆抑制剂；赫素磺酰胺(hepsulfam)；调蛋白(heregulin)；六亚甲基双乙酰胺；金丝桃素(hypericin)；伊班膦酸(ibandronicacid)；伊达比星(idarubicin)；艾多昔芬(idoxifene)；伊决孟酮(idramantone)；伊莫福新(ilmofosine)；伊洛马司他(ilomastat)；咪唑吖啶酮类(imidazoacridones)；咪喹莫特(imiquimod)；免疫刺激肽；胰岛素样生长因子-1受体抑制剂；干扰素激动剂；干扰素；白介素；碘苄胍(iobenguane)；碘多柔比星(iododoxorubicin)；甘薯苦醇(ipomeanol,4-)；伊罗普拉(iroplact)；伊索拉定(irsogladine)；异苯唑(isobengazole)；同功软海棉素(isohomohalicondrin)b；伊他司琼(itasetron)；促微丝聚合剂(jasplakinolide)；环缩肽(kahalalide f)；三乙酸片螺素(lamellarin-n triacetate)；兰瑞肽(lanreotide)；雷拉霉素(leinamycin)；来格司亭(lenograstim)；硫酸蘑菇多糖(lentinan sulfate)；来泊司汀(leptolstatin)；来曲唑(letrozole)；白血病抑制因子；白细胞α干扰素；亮丙瑞林(leuprolide)+雌激素+黄体酮；亮丙瑞林(leuprorelin)；左旋咪唑(levamisole)；利阿唑(liarozole)；线性聚胺类似物；亲脂性双醣肽；亲脂性铂化合物；利丝酰胺(lissoclinamide)7；洛铂(lobaplatin)；胍乙基磷酸丝氨酸(lombricine)；洛美曲索(lometrexol)；氯尼达明(lonidamine)；洛索蒽醌(losoxantrone)；洛伐他汀(lovastatin)；洛索立宾(loxoribine)；勒托替康(lurtotecan)；蓝花赝靛素镏(lutetiumtexaphyrin)；利索茶碱(lysofylline)；裂解肽类(lytic peptides)；美坦辛(maitansine)；抑甘露糖苷酶素(mannostatin a)；马立马司他(marimastat)；马索罗酚(masoprocol)；乳腺丝氨酸蛋白酶抑制剂(maspin)；基质溶解因子(matrilysin)不可逆抑制剂；基质金属蛋白酶不可逆抑制剂；美诺立尔(menogaril)；美巴龙(merbarone)；美替瑞林(meterelin)；甲硫氨酸酶；甲氧氯普胺(metoclopramide)；mif抑制剂；米非司酮(mifepristone)；米替福新(miltefosine)；米立司亭(mirimostim)；错配双股rna；米托胍腙(mitoguazone)；二溴卫矛醇(mitolactol)；丝裂霉素(mitomycin)类似物；米托萘胺(mitonafide)；丝裂毒素(mitotoxin)纤维母细胞生长因子-皂草素；米托蒽醌(mitoxantrone)；莫法罗汀(mofarotene)；莫拉司亭(molgramostim)；单株抗体，人类绒毛膜促性腺激素；单磷酰基脂质a+分支杆菌(myobacterium)细胞壁sk；莫哌达醇(mopidamol)；多种抗药性基因抑制剂；基于多重肿瘤抑制基因-1的疗法；氮芥抗癌剂；印度洋海绵b(mycaperoxide b)；分枝杆菌细胞壁提取物(mycobacterial cell wallextract)；苔藓虫海绵(myriaporone)；n-乙酰基地那林(n-acetyldinaline)；n-取代的苯甲酰胺；那法瑞林(nafarelin)；那哥斯普(nagrestip)；纳洛酮(naloxone)+喷他佐辛(pentazocine)；纳帕维(napavin)；萘萜二醇(naphterpin)；那托司亭(nartograstim)；奈达铂(nedaplatin)；奈莫柔比星(nemorubicin)；奈立膦酸(neridronic acid)；中性肽内切肽酶；尼鲁米特(nilutamide)；尼萨霉素(nisamycin)；一氧化氮调节剂；硝基氧抗氧化剂；尼楚林(nitrullyn)；o6-苯甲基鸟嘌呤；奥曲肽(octreotide)；奥克三诺(okicenone)；寡核苷酸；奥那司酮(onapristone)；昂丹司琼(ondansetron)；昂丹司琼(ondansetron)；奥瑞森(oracin)；口服细胞素诱导剂；奥马铂(ormaplatin)；奥沙特隆(osaterone)；奥沙利铂(oxaliplatin)；奥诺霉素(oxaunomycin)；钯铵(palauamine)；棕榈酰根霉素(palmitoylrhizoxin)；帕米磷酸(pamidronic acid)；人参三醇(panaxytriol)；帕诺米芬(panomifene)；副菌铁素(parabactin)；帕折普汀(pazelliptine)；培门冬酶(pegaspargase)；培得星(peldesine)；戊聚糖多硫酸钠(pentosan polysulfate sodium)；喷司他汀(pentostatin)；喷曲唑(pentrozole)；全氟溴烷(perflubron)；培磷酰胺(perfosfamide)；紫苏子醇(perillyl alcohol)；吩嗪霉素(phenazinomycin)；乙酸苯酯；磷酸酶不可逆抑制剂；溶链菌制剂(picibanil)；毛果芸香碱盐酸盐(pilocarpinehydrochloride)；吡柔比星(pirarubicin)；吡曲克辛(piritrexim)；普拉汀(placetin)a；普拉汀(placetin)b；纤溶酶原活化因子抑制剂；铂复合物；铂化合物；铂-三胺复合物；卟吩姆钠(porfimer sodium)；泊非霉素(porfiromycin)；泼尼松(prednisone)；丙基双吖啶酮(propyl bis-acridone)；前列腺素j2；蛋白酶体不可逆抑制剂；基于蛋白质a的免疫调控剂；蛋白质激酶c不可逆抑制剂；蛋白质激酶c不可逆抑制剂；微海藻类(microalgal)；蛋白质酪氨酸磷酸酶不可逆抑制剂；嘌呤核苷磷酸化酶抑制剂；红紫素(purpurins)；吡唑并吖啶(pyrazoloacridine)；吡哆醇酸化血红蛋白聚氧乙烯偶联物；raf拮抗剂；雷替曲塞(raltitrexed)；雷莫司琼(ramosetron)；ras法呢基(ras farnesyl)蛋白质转移酶不可逆抑制剂；ras不可逆抑制剂；ras-gap抑制剂；脱甲基瑞替普汀(retelliptinedemethylated)；铼re 186依替膦酸盐(rhenium re 186etidronate)；根霉素(rhizoxin)；核酶；rii视黄酸酰胺(retinamide)；罗谷亚胺(rogletimide)；罗稀吐碱(rohitukine)；罗莫肽(romurtide)；罗喹美克(roquinimex)；如彼给诺(rubiginone)b1；如波斯(ruboxyl)；沙芬戈(safingol)；沙托品(saintopin)；sarcnu；肌肉叶绿醇(sarcophytol)a；沙格司亭(sargramostim)；sdi 1拟似物；司莫司汀(semustine)；衰老细胞衍生的抑制剂1；正义寡核苷酸；信号转导不可逆抑制剂；信号转导调控剂；单链抗原结合性蛋白质；西佐喃(sizofiran)；索布佐生(sobuzoxane)；硼卡钠(sodium borocaptate)；苯乙酸钠；索菲醇(solverol)；生长调节素结合性蛋白质；索纳明(sonermin)；磷乙酰天冬氨酸(sparfosicacid)；穗霉素d(spicamycin d)；螺莫司汀(spiromustine)；脾五肽(splenopentin)；海绵他汀素1(spongistatin 1)；角鲨胺(squalamine)；干细胞抑制剂；干细胞分化不可逆抑制剂；斯替匹酰胺(stipiamide)；基质溶素(stromelysin)不可逆抑制剂；硫福辛(sulfinosine)；强效血管活性肠肽拮抗剂；磺酸偏端霉素(suradista)；苏拉明(suramin)；苦马豆素(swainsonine)；合成性葡糖氨基聚醣类；他莫司汀(tallimustine)；它莫西芬甲碘化物(tamoxifen methiodide)；牛磺莫司汀(tauromustine)；他扎罗汀(tazarotene)；替可加兰钠(tecogalan sodium)；替加氟(tegafur)；缔哌喃铁(tellurapyrylium)；端粒酶(telomerase)不可逆抑制剂；替莫泊芬(emoporfin)；替莫唑胺(temozolomide)；替尼泊苷(teniposide)；四氯十氧化物(tetrachlorodecaoxide)；四氢唑环(tetrazomine)；白蓬草硝酸钠(thaliblastine)；噻可拉林(thiocoraline)；血小板生成素；血小板生成素拟似物；胸腺法新(thymalfasin)；胸腺生成素受体激动剂；胸腺曲南(thymotrinan)；甲状腺刺激激素；本紫红素乙酯锡(tin ethyl etiopurpurin)；替拉扎明(tirapazamine)；二氯环戊二烯钛(titanocene bichloride)；浅水海绵素(topsentin)；托瑞米芬(toremifene)；全能干细胞因子；转译不可逆抑制剂；维甲酸(tretinoin)；三乙酰尿苷(triacetyluridine)；曲西立滨(triciribine)；三甲曲沙(trimetrexate)；曲普瑞林(triptorelin)；托烷司琼(tropisetron)；妥罗雄脲(turosteride)；酪胺酸激酶不可逆抑制剂；酪氨酸磷酸化抑制剂(tyrphostins)；ubc不可逆抑制剂；乌苯美司(ubenimex)；泌尿生殖窦衍生之生长抑制因子；尿激酶受体拮抗剂；伐普肽(vapreotide)；瓦里奥林b(variolin b)；载体系统，红细胞基因疗法；维拉雷琐(velaresol)；藜芦胺(veramine)；维尔定(verdins)；维替泊芬(verteporfin)；长春瑞滨(vinorelbine)；维夏汀(vinxaltine)；维它新(vitaxin)；伏氯唑(vorozole)；扎诺特隆(zanoterone)；折尼铂(zeniplatin)；亚苄维c(zilascorb)；净司他丁斯酯(zinostatin stimalamer)。可与flt3抑制剂化合物组合使用的其他抗癌剂包括烷化剂类、抗代谢物类、天然产物类或激素类，例如氮芥类(例如，氯乙胺、环磷酰胺、丁酸氮芥等)、烷基磺酸酯类(例如，白消安)、亚硝基脲类(例如，卡莫司汀、洛莫司汀等)、或三氮烯类(氮烯咪胺等)。抗代谢物的实例包括但不限于叶酸类似物(例如，甲氨蝶呤)或嘧啶类似物(例如，阿糖胞苷)、嘌呤类似物(例如，巯嘌呤、硫鸟嘌呤、喷司他丁)。可与本发明所述flt3抑制剂化合物组合使用的其他抗癌剂包括menin抑制剂。可与本发明所述flt3抑制剂化合物组合使用的抗癌剂包括wdr5抑制剂。可与本发明所述flt3抑制剂化合物组合使用的抗癌剂包括kras抑制剂。可与本发明所述flt3抑制剂化合物组合使用的其他抗癌剂包括mek抑制剂。在一个实施方案，所述mek抑制剂是曲美替尼(trametinib)。可与本发明所述flt3抑制剂化合物组合使用的其他抗癌剂包括bcl2抑制剂。在一个实施方案，所述bcl2抑制剂是维奈克拉(venetoclax)。可与本发明所述flt3抑制剂化合物组合使用的天然产物的实例包括但不限于长春花生物碱类(例如长春花碱、长春新碱)、表鬼臼毒素类(例如依托泊苷)、抗生素类(例如柔红霉素、多柔比星、博来霉素)、酶类(例如l-天冬酰胺酶)、或生物反应调节剂类(例如干扰素α)。可与本发明所述flt3抑制剂化合物组合使用的烷化剂的实例包括但不限于氮芥类(例如，氯乙胺、环磷酰胺、苯丁酸氮芥、美法仑等)、氮丙啶和甲基蜜胺类(例如，六甲蜜胺、噻替派)、烷基磺酸酯类(例如，白消安)、亚硝基脲类(例如，卡莫司汀、洛莫司汀、司莫司汀、链佐星等)或三氮烯类(氮烯咪胺等)。抗代谢物的实例包括但不限于叶酸类似物(例如，甲氨蝶呤)或嘧啶类似物(例如，氟尿嘧啶、氟尿苷、阿糖胞苷)、嘌呤类似物(例如，巯基嘌呤、硫鸟嘌呤、喷司他丁)。可与本发明所述flt3抑制剂化合物组合使用的激素和拮抗剂的实例包括但不限于肾上腺皮质类固醇类(例如，泼尼松)、孕激素类(例如，己酸羟孕酮、醋酸甲地孕酮、醋酸甲羟孕酮)、雌激素类(例如，二乙基己烯雌酚、炔雌醇)、抗雌激素(例如，他莫昔芬)、雄激素类(例如，丙酸睾酮、氟甲睾酮)、抗雄激素(例如，氟他胺)、促性腺激素释放激素类似物(例如，亮丙瑞林)。可用于本发明所述方法和组合物中用于治疗或预防癌症的其他药剂包括铂配位络合物(例如，顺铂、卡铂)、蒽醌(例如，米托蒽醌)、取代脲(例如，羟基脲)、甲基肼衍生物(例如，丙卡巴肼)、肾上腺皮质抑制剂(例如，米托坦、氨鲁米特)。由于稳定的微管而使细胞停滞在g2-m期并可与本发明所述flt3抑制剂化合物组合使用的抗癌剂的实例包括但不限于以下市售药物和开发中的药物：厄布洛唑(erbulozole)(亦称为r-55104)、海兔毒素10(dolastatin 10)(亦称为dls-10和nsc-376128)、米弗林羟乙磺酸盐(mivobulin isethionate)(亦称为ci-980)、长春新碱(vincristine)、nsc-639829、圆皮海绵内酯(discodermolide)(亦称为nvp-xx-a-296)、abt-751(abbott，亦称为e-7010)、altorhyrtins(例如altorhyrtin a和altorhyrtin c)、海绵抑制素类(spongistatins)(例如海绵抑制素1、海绵抑制素2、海绵抑制素3、海绵抑制素4、海绵抑制素5、海绵抑制素6、海绵抑制素7、海绵抑制素8和海绵抑制素9)、盐酸西马多亭(cemadotin hydrochloride)(亦即lu-103793与nsc-d-669356)、埃坡霉素类(例如埃坡霉素a、埃坡霉素b、埃坡霉素c(亦称为脱氧埃坡霉素(desoxyepothilone)a或depoa)、埃坡霉素d(亦称为kos-862、depob和脱氧埃坡霉素b)、埃坡霉素e、埃坡霉素f、埃坡霉素b n-氧化物、埃坡霉素a n-氧化物、16-氮杂-埃坡霉素b、21-氨基埃坡霉素b(亦称为bms-310705)、21-羟基埃坡霉素d(亦称为脱氧埃坡霉素f和depof)、26-氟埃坡霉素、澳瑞他汀(auristatin)pe(亦称为nsc-654663)、舒碧利婷(soblidotin)(亦称为tzt-1027)、ls-4559-p(pharmacia，亦称为ls-4577)、ls-4578(pharmacia,亦称为ls-477-p)、ls-4477(pharmacia)、ls-4559(pharmacia)、rpr-112378(aventis)、硫酸长春新碱(vincristinesulfate)、dz-3358(daiichi)、fr-182877(fujisawa，亦称为ws-9885b)、gs-164(takeda)、gs-198(takeda)、kar-2(hungarian academy of sciences)、bsf-223651(basf，亦称为ilx-651和lu-223651)、sah-49960(lilly/novartis)、sdz-268970(lilly/novartis)、am-97(armad/kyowa hakko)、am-132(armad)、am-138(armad/kyowa hakko)、idn-5005(indena)、念珠藻素52(亦称为ly-355703)、ac-7739(ajinomoto，亦称为ave-8063a和cs-39.hci)、ac-7700(ajinomoto，亦称为ave-8062、ave-8062a、cs-39-l-ser.hci和rpr-258062a)、维替维胺(vitilevuamide)、微管溶素a(tubulysin a)、卡纳登索(canadensol)、矢车菊黄素(centaureidin)(亦称为nsc-106969)、t-138067(tularik，亦称为t-67、tl-138067和ti-138067)、cobra 1(parker hughes institute，亦称为dde-261和whi-261)、h10(kansas state university)、h16(kansas state university)、恩考司丁a1(oncocidin a1)(亦称为bto-956和dime)、dde-313(parker hughes institute)、富吉耐德b(fijianolide b)、莱利霉素(laulimalide)、spa-2(parker hughes institute)、spa-1(parker hughes institute，亦称为spiket-p)、3-iaabu(cytoskeleton/mt.sinai schoolof medicine，亦称为mf-569)、那可丁(narcosine)(亦称为nsc-5366)、那卡丁(nascapine)、d-24851(asta medica)、a-105972(abbott)、哈米特林(hemiasterlin)、3-baabu(cytoskeleton/mt.sinai school of medicine，亦称为mf-191)、tmpn(arizonastate university)、乙酰丙酮二茂钒(vanadocene acetylacetonate)、t-138026(tularik)、莫那撒尔(monsatrol)、依那斯纳(lnanocine)(亦称为nsc-698666)、3-laabe(cytoskeleton/mt.sinai school of medicine)、a-204197(abbott)、t-607(tuiarik，亦称为t-900607)、rpr-115781(aventis)、艾榴塞洛素类(eleutherobins)(例如去甲基艾榴塞洛素(desmethyleleutherobin)、去乙酰基艾榴塞洛素(desaetyleleutherobin)、异艾榴塞洛素-a(lsoeleutherobin a)和z-艾榴塞洛素(z-eleutherobin))、卡利贝苷(caribaeoside)、卡利贝林(caribaeolin)、软海绵素(halichondrin)b、d-64131(astamedica)、d-68144(asta medica)、重氮酰胺(diazonamide)a、a-293620(abbott)、npi-2350(nereus)、根薯酮内酯(taccalonolide)a、tub-245(aventis)、a-259754(abbott)、代佐他汀(diozostatin)、(-)-苯基阿西斯丁(phenylahistin)(亦称为nscl-96f037)、d-68838(asta medica)、d-68836(asta medica)、肌基质蛋白(myoseverin)b、d-43411(zentaris，亦称为d-81862)、a-289099(abbott)、a-318315(abbott)、hti-286(亦称为spa-110，三氟乙酸盐)(wyeth)、d-82317(zentaris)、d-82318(zentaris)、sc-12983(nci)、瑞伐斯他汀磷酸钠(resverastatin phosphate sodium)、bpr-0y-007(national health researchinstitutes)、和ssr-250411(sanofi)。本发明所述flt3抑制剂还可与其他flt3抑制剂组合施用，所述其他flt3抑制剂包括但不限于索拉非尼、米哚妥林、来他替尼、舒尼替尼、坦度替尼、吉瑞替尼、克莱拉尼、奎扎替尼、ff-10101和hm43239。11.试剂盒/制品针对用于本发明所述的治疗性应用，本发明还描述了试剂盒和制品。此类试剂盒可包括载体、包装或容器，其被分隔以容纳一个或多个容器，例如小瓶、管等，每个容器包括在本发明所述方法中使用的单独元件之一。合适的容器包括例如瓶子、小瓶、注射器和试管。容器可由各种材料例如玻璃或塑料形成。本发明提供的制品包含包装材料。用于包装药物产品的包装材料是所属通常知识者公知的。参见例如美国专利号us5,323,907、us5,052,558和us5,033,252。药物包装材料的实例包括但不限于：泡罩包装、瓶、管、吸入器、泵、袋、小瓶、容器、注射器、瓶子及适合于所选制剂和预期施用和治疗模式的任何包装材料。本发明提供的化合物和组合物的多种制剂均可用于治疗得益于抑制flt3或其中flt3是症状或病因的介质或促进因素的任何疾病、病症或病况。例如，容器可包含本发明所述的一种或多种化合物，任选地以组合物形式或与本发明公开的另一种药剂组合。容器任选地具有无菌接入端口(例如，容器可是静脉内溶液袋或具有可被皮下注射针刺穿的塞子的小瓶)。此类试剂盒任选地包含化合物，其具有与其在本发明所述方法中的使用相关的鉴别说明或标签或说明书。试剂盒将通常包括一个或多个另外的容器，每个容器具有从商业和使用者角度来看对于使用本发明所述化合物所期望的一种或多种不同材料(例如试剂，任选地以浓缩形式，和/或装置)。此类材料的非限制性实例包括但不限于缓冲剂、稀释剂、过滤器、针头、注射器；列出内容物和/或使用说明书的载体、包装、容器、小瓶和/或管标签，以及具有使用说明书的包装插页。通常还包括一套说明书。标签可位于容器上或与容器相关联。当形成标签的字母、数字或其他字符附着、模制或蚀刻至容器本身时，标签可位于容器上；当标签存在于容纳容器的容器或载体内时，标签可与容器相关联，例如作为包装插页。标签可用于指示内容物将用于特定的治疗应用。标签还可指示内容物的使用说明，例如在本发明所述方法中。在某些实施方案，药物组合物可存在于包装或分配器装置中，其可含有一个或多个含有本发明提供的化合物的单位剂型。包装可例如包含金属箔或塑料箔，例如泡罩包装。包装或分配器装置可附有施用说明书。包装或分配器还可附有与容器相关联的由管理药物的制造、使用或销售的政府机构规定形式的注意事项，所述注意事项反映该机构批准用于人类或兽医给药的药物形式。例如，所述注意事项可以是美国食品药品监督管理局批准用于处方药的标签，或批准的产品插页。还可制备在相容的药物载体中配制的包含本发明提供的化合物的组合物，将其置于合适的容器中，并贴上标签用于治疗指定的病症。实施例以下具体和非限制性实施例仅用于说明，而不以任何方式限制本发明。在没有进一步详细阐述的情况下，相信所属通常知识者可基于本发明说明书最大程度地利用本发明。本发明引用的所有出版物均通过引用其整体并入本发明。当参考url或其他此类标识符或地址时，应当理解，此类标识符可发生变化，并且因特网上的特定信息可来来去去，但可通过搜索因特网获悉等效信息。对此的引用证明了此类信息的可用性和公开传播。下文实施例以及整个申请中，以下缩写具有以下含义。如果未定义，则这些术语具有其通常接受的含义。aq＝水性，水溶液boc＝叔丁氧羰基t-buoh＝叔丁醇dce＝1,2-二氯乙烷dcm＝二氯甲烷diad＝偶氮二甲酸二异丙酯diea或dipea＝n,n-二异丙基乙胺dmap＝二甲基氨基吡啶dmf＝二甲基甲酰胺dmso＝二甲基亚砜esi＝电喷雾电离ea＝乙酸乙酯g＝克hcl＝氯化氢，盐酸hplc＝高效液相色谱hr＝小时1h nmr＝质子核磁共振ipa＝异丙醇koac＝乙酸钾lc-ms＝液相色谱质谱法m＝摩尔浓度mecn＝乙腈meoh＝甲醇mg＝毫克min＝分钟ml＝ml，毫升mm＝毫摩尔浓度mmol＝毫摩尔，毫克分子量m.p.＝熔点ms＝质谱m/z＝质荷比n＝正常nis＝n-碘代丁二酰亚胺nm＝纳摩尔浓度nm＝纳米pd(dppf)cl2＝[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(ii)pe＝石油醚pybop＝苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基鏻六氟磷酸盐quant.＝定量rp＝反相rt或r.t.＝室温sat.＝饱和tea＝三乙胺tfa＝三氟乙酸μl＝微升μm＝微摩尔浓度一般合成方案i其中l3、r1、r4、r5和r7均如本发明所述。中间体的合成中间体6(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-甲氧基苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯步骤1：(3-氨基-5-甲氧基苯乙基)氨基甲酸叔丁酯在25℃下，向ni(723.77mg，12.33mmol，1当量)的thf(50ml)溶液中加入2-(3-氨基-5-甲氧基苯基)乙腈(2g，12.33mmol，1当量)、(boc)2o(2.69g，12.33mmol，2.83ml，1当量)、dipea(3.19g，24.66mmol，4.30ml，2当量)。混合物在25℃和50psi的h2下搅拌2小时。tlc显示检测到一个极性较大的主要新斑点。粗制混合物减压浓缩。粗产物通过硅胶硫醇凝胶色谱法(chromatography on silica thiol gel)纯化(石油醚/etoac＝3/1)。得到(3-氨基-5-甲氧基苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.3g，4.88mmol，收率：39.58％)，为白色固体。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ＝6.81(br t,j＝5.4hz,1h),6.00-5.96(m,2h),5.92(s,1h),4.98(s,2h),3.63(s,3h),3.11-3.01(m,2h),2.49-2.45(m,2h),1.38(s,9h)。步骤2：(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-甲氧基苯乙基)氨基甲酸叔丁酯向(3-氨基-5-甲氧基苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.65g，7.51mmol，1当量)、3,5-二氯-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(2g，7.51mmol，1当量)的872-50-4(5ml)溶液中加入dipea(19.41g，150.19mmol，26.16ml，20当量)。将混合物在n2下于140℃搅拌24小时。lcms显示反应完成。将反应物倒入水(30ml)中，用etoac(20ml*3)萃取。合并有机层，用水(50ml*2)和饱和盐水(100ml)清洗，经无水na2so4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。粗产物通过硅胶硫醇凝胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯/二氯甲烷＝2/1/1)纯化。得到(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-甲氧基苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.93g，4.01mmol，收率：53.40％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.27(s,1h),8.33(s,1h),8.11(s,1h),7.42(s,1h),6.92(br t,j＝5.3hz,1h),6.86(s,1h),6.54(s,1h),3.81(s,3h),3.21(q,j＝6.6hz,2h),3.30–3.26(m,2h),2.81-2.79(m,2h)2.50-2.48(m,2h),1.42(s,9h),1.32(t,j＝7.5hz,4h).lc-ms(es+,m/z):351.4[(m+h)+]；rt＝0.824min。步骤3：3-((3-(2-氨基乙基)-5-甲氧基苯基)氨基)-5-氯-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺将(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-甲氧基苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.93g，3.43mmol，纯度：80％，1当量)溶于hcl/etoac(100ml)溶液，混合物在25℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。通过过滤将粗制混合物后处理。将粗产物通过在25℃下用etoac(20ml)重结晶纯化，得到3-((3-(2-氨基乙基)-5-甲氧基苯基)氨基)-5-氯-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(1.3g，3.30mmol，收率：96.11％，hcl)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):350.1[(m+h)+]；rt＝0.698min。注意：hcl/etoac(4m)：hcl在0℃下鼓泡导入到etoac溶液中，持续0.5小时，然后称取所得溶液，得到hcl/etoac(4m)。步骤4：(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-甲氧基苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯向3-((3-(2-氨基乙基)-5-甲氧基苯基)氨基)-5-氯-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(1.3g，3.65mmol，纯度：98.2％，1当量)、n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基-l-丙氨酸(1.11g，5.47mmol，1.5当量)的dmf(10ml)溶液中加入bop(1.54g，5.47mmol，1.5当量)、dipea(3.00g，36.49mmol，2.91ml，10当量)。将混合物在n2下于25℃搅拌10小时。lcms显示反应完成。粗产物通过硅胶硫醇凝胶色谱法纯化(石油醚/etoac＝1/2)。得到(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-甲氧基苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.84g，2.48mmol，收率：67.85％)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.22(s,1h),8.28(s,1h),8.06(s,1h),7.81(br s,1h),7.34(s,1h),6.85(s,1h),6.50(s,1h),4.55-4.52(m,1h),3.76(s,3h),3.30-3.24(m,2h),2.90-2.78(m,2h),2.74-2.66(m,5h),1.36(br s,9h),1.28-1.11(m,6h).lc-ms(es+,m/z):435.2[(m+h)+]；rt＝0.884min；hrms:435.1911。中间体7(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯步骤1：(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯在25℃下，向(3-氨基苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(2.25g，9.52mmol，1当量)、3,5-二氯-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(2.10g，9.52mmol，1当量)的二氧六环(20ml)溶液中加入dipea(12.31g，95.21mmol，16.58ml，10当量)。将混合物在130℃搅拌10小时。lcms显示反应完成。将混合物倒入水(40ml)中，用etoac(20ml*2)萃取。有机层用水(40ml*2)和饱和盐水(80ml*2)清洗，经无水na2so4干燥、过滤，减压浓缩，得到残余物。将粗产物通过硅胶色谱法(石油醚/etoac＝1:1)纯化，得到(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(3g，4.79mmol，收率：50.27％)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):420.2[(m+h)+]；rt＝0.939min。步骤2：3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-氯-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺将n-[2-[3-[(3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基-吡嗪-2-基)氨基]苯基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(2g，4.76mmol，1当量)和hcl/etoac(4m，50ml，41.99当量)的混合物在25℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。将混合物减压浓缩，得到残余物。粗产物通过硅胶色谱法(石油醚/etoac＝1:1)纯化，得到3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-氯-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(1.38g，4.32mmol，收率：90.60％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):320.2[(m+h)+]；rt＝0.671min。注意：hcl/etoac(4m)：hcl在0℃下鼓泡导入到etoac溶液中，持续0.5小时，然后称取所得溶液，得到hcl/etoac(4m)。步骤3：(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在25℃，向3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-氯-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(1.38g，4.32mmol，1当量)、tcfh(1.82g，6.47mmol，1.5当量)、nmi(3.54g，43.15mmol，10当量)的dmf(15ml)溶液中加入n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基-l-丙氨酸(1.32g，6.47mmol，1.5当量)。将混合物在25℃下搅拌10小时。lcms显示反应完成。将混合物倒入水(30ml)中，用etoac(15ml*2)萃取。有机层用水(30ml*2)和饱和盐水(30ml*2)清洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物通过硅胶色谱法(石油醚/etoac＝1:1)纯化，得到n-[(1s)-2-[2-[3-[(3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基-吡嗪-2-基)氨基]苯基]乙基氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]-n-甲基-氨基甲酸叔丁酯(2.55g，粗制)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):505.2[(m+h)+]；rt＝7.177min。中间体8(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯步骤1：(3-溴-5-氟苯基)甲醇在0℃下，向3-溴-5-氟苯甲酸(50g，228.30mmol，1当量)的thf(500ml)溶液中加入bh3.thf(1m，570.76ml，2.5当量)。将混合物升温至25℃，持续4小时。lcms显示反应完成。在0℃下，将反应混合物缓慢加入meoh(300ml)中。然后将合并的有机相在70℃下搅拌1小时，过滤，真空浓缩。将残余物倒入etoac(500ml)和h2o(1升)中。分离水相，用乙酸乙酯(600ml*3)萃取。合并的有机相用饱和盐水(600ml*3)洗，经无水na2so4干燥，过滤，浓缩，得到(3-溴-5-氟苯基)甲醇(50g，粗品)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝7.49-7.36(m,2h),7.17(dd,j＝1.0,9.7hz,1h),5.45(t,j＝5.8hz,1h),4.52(d,j＝5.8hz,2h).lc-ms(es+,m/z):202.9[(m-h)-]；rt＝1.493min。步骤2：1-溴-3-(溴甲基)-5-氟苯向(3-溴-5-氟-苯基)甲醇(50g，243.87mmol，1当量)的dcm(500ml)溶液中加入pbr3(132.03g，487.75mmol，2当量)，将混合物在25℃和n2气氛下搅拌2小时。tlc显示反应完成。浓缩混合物。将残余物用饱和nahco3(800ml)稀释，用etoac(800ml*2)萃取，合并有机层，用水(800ml*2)、饱和盐水(800ml)洗，经无水na2so4干燥、过滤，浓缩，得到1-溴-3-(溴甲基)-5-氟苯(60g，粗品)，为白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝7.47(s,1h),7.46-7.41(m,1h),7.32-7.25(m,1h),4.62(s,2h)。步骤3：2-(3-溴-5-氟苯基)乙腈在25℃下，向1-溴-3-(溴甲基)-5-氟苯(50g，186.62mmol，1当量)和tmscn(24.07g，242.61mmol，30.35ml，1.3当量)的ch3cn(600ml)溶液中加入tbaf的thf溶液(1m，242.61ml，1.3当量)。将混合物在25℃下搅拌5小时。tlc显示反应完成。浓缩混合物。残余物用h2o(1000ml)稀释，然后用etoac(800ml*2)萃取，合并有机层，用水(800ml*2)、饱和盐水(800ml)清，经无水na2so4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。将粗产物通过硅胶色谱法(石油醚/etoac＝20/1)纯化，得到2-(3-溴-5-氟苯基)乙腈(29.1g，135.96mmol，收率：72.85％)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝7.54(td,j＝2.0,8.4hz,1h),7.46(s,1h),7.28(br d,j＝9.4hz,1h),4.10(s,2h)。步骤4：(3-(氰基甲基)-5-氟苯基)氨基甲酸叔丁酯将2-(3-溴-5-氟苯基)乙腈(10g，46.72mmol，1当量)、氨基甲酸叔丁酯(8.21g，70.08mmol，1.5当量)、t-bu xphos(991.99mg，2.34mmol，0.05当量)、tbuxphos pd g3(1.86g，2.34mmol，0.05当量)和cs2co3(30.45g，93.44mmol，2当量)的甲苯(100ml)混合物脱气，用氮气吹扫3次，然后将混合物在100℃和n2气氛下搅拌10小时。lc-ms显示反应完成。将反应混合物过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至1/1)纯化，得到(3-(氰基甲基)-5-氟苯基)氨基甲酸叔丁酯(9g，35.96mmol，收率：76.97％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝9.70(s,1h),7.34(s,1h),7.25(br d,j＝11.5hz,1h),6.77(br d,j＝8.8hz,1h),4.03(s,2h),1.48(s,9h).lc-ms(es+,m/z):251.2[(m+h)+]；rt＝0.795min。步骤5：2-(3-氨基-5-氟苯基)乙腈将n-[3-(氰基甲基)-5-氟-苯基]氨基甲酸叔丁酯(9g，35.96mmol，1当量)的hcl/etoac(4m，99.96ml，11.12当量)混合物在25℃下搅拌2小时。lc-ms显示反应完成。将反应液倒入饱和na2co3(50ml)中，用ea 150ml(50ml*3)萃取。将合并的有机层用饱和盐水60ml(20ml*3)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到2-(3-氨基-5-氟苯基)乙腈(4.3g，粗品)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):151.2[(m+h)+]；rt＝0.120min。注意：hcl/etoac(4m)：hcl在0℃下鼓泡到etoac溶液中，持续0.5小时，然后称取所得溶液，得到hcl/etoac(4m)。步骤6：3-(2-氨基乙基)-5-氟苯胺在n2气氛下，向2-(3-氨基-5-氟-苯基)乙腈(4.3g，28.64mmol，1当量)和nh3.h2o(4.55g，45.44mmol，5.00ml，纯度：35％，1.59当量)的thf(100ml)溶液中加入兰尼镍(raney-ni)(15.00g，175.08mmol，6.11当量)。将悬浮液脱气并用h2吹扫3次。将混合物在50psi的h2(57.85mg，28.64mmol，1当量)下于25℃搅拌2小时。lc-ms显示反应完成。将反应混合物过滤，减压浓缩，得到3-(2-氨基乙基)-5-氟苯胺(4.3g，粗品)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):155.1[(m+h)+]；rt＝0.146min。步骤7：(3-氨基-5-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯将3-(2-氨基乙基)-5-氟苯胺(4.3g，27.89mmol，1当量)、(boc)2o(6.09g，27.89mmol，6.41ml，1当量)、dipea(7.21g，55.78mmol，9.72ml，2当量)的dcm(50ml)混合物脱气，用n2吹扫3次，然后将混合物在25℃下于n2气氛下搅拌10小时。lc-ms显示反应完成。将反应混合物减压浓缩以除去dcm。将残余物用h2o 10ml稀释，用ea(30ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(100ml*1)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至1/1)纯化，得到n-[2-(3-氨基-5-氟-苯基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(3.4g，13.37mmol，收率：47.94％)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝6.91-6.76(m,1h),6.24-6.03(m,3h),5.37-5.25(m,2h),3.19-3.15(d,1h),3.11-3.03(m,2h),2.57-2.52(m,1h),1.42-1.34(m,9h).lc-ms(es+,m/z):155.2[(m+h-100)+],199.2[(m+h-56)+]；rt＝0.666min。步骤8：(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯向(3-氨基-5-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(2g，7.86mmol，1当量)和3,5-二氯-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(1.73g，7.86mmol，1当量)的nmp(4ml)溶液中加入dipea(40.66g，314.59mmol，54.80ml，40当量)。将混合物在140℃下搅拌36小时。lc-ms显示反应完成。将反应混合物倒入h2o(15ml)中，过滤得到残余物。将残余物用ea 15ml稀释并倒入h2o 15ml中，然后用ea(15ml*3)萃取。分离有机相，用饱和盐水(10ml*3)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至1/1)纯化，得到(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.78g，3.13mmol，收率：39.86％，纯度：77.12％)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.36(s,1h),8.30(br s,1h),8.09(br s,1h),7.65(br d,j＝11.5hz,1h),6.98(s,1h),6.87(br t,j＝5.0hz,1h),6.71(br d,j＝9.4hz,1h),3.19-3.13(m,2h),2.83(q,j＝7.4hz,2h),2.69(br t,j＝6.9hz,2h),1.34(s,9h),1.26(t,j＝7.4hz,3h).lc-ms(es+,m/z):438.2[(m+h)+]；rt＝0.914min；77.12％纯度。步骤9：3-((3-(2-氨基乙基)-5-氟苯基)氨基)-5-氯-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺将(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.3g，2.97mmol，1当量)的hcl/meoh(4m，50ml，67.37当量)溶液于25℃搅拌2小时。lc-ms显示反应完成。将反应混合物过滤，减压浓缩，得到残余物，得到3-((3-(2-氨基乙基)-5-氟苯基)氨基)-5-氯-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(1g，粗品，hcl)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):338.2[(m+h)+]；rt＝0.710min。注意：hcl/meoh(4m)：在0℃下，将hcl鼓泡导入到溶液中，持续0.5小时。步骤10：(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯向3-((3-(2-氨基乙基)-5-氟苯基)氨基)-5-氯-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(1g，2.96mmol，1当量)和n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基-l-丙氨酸(902.52mg，4.44mmol，1.5当量)的dmf(15ml)溶液中加入1-甲基-1h-咪唑(2.43g，29.61mmol，2.36ml，10当量)和n,n,n’,n’-四甲基氯甲脒六氟磷酸盐(1.25g，4.44mmol，1.5当量)。将混合物在25℃下搅拌10小时。lc-ms显示反应完成。将反应混合物倒入h2o(15ml)中，用ea(10ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(10ml*3)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至1/5)纯化，得到(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.5g，2.87mmol，收率：96.88％)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.42-11.35(m,1h),8.38-8.05(m,2h),7.96(s,1h),7.82(br t,j＝5.1hz,1h),7.70-7.61(m,1h),7.08-7.00(m,1h),6.76-6.70(m,1h),3.32(s,3h),2.89(s,2h),2.87(s,2h),2.73(s,2h),1.35(br s,9h),1.27(t,j＝7.5hz,3h),1.22-1.16(m,3h).lc-ms(es+,m/z):415.1[(m+h)+]；rt＝1.901min,99.09％纯度；hrms:415.2488。中间体93,5-二氯-6-乙基-n-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：3,5-二氯-6-乙基吡嗪-2-甲酸甲酯将3,5-二氯-6-乙基-吡嗪-2-甲酰胺(15g，68.16mmol，1.0当量)、hcl/meoh(4m，350.03ml，20.54当量)的混合物在90℃下搅拌10小时。lcms显示反应完成。将混合物浓缩。残余物用饱和nahco3(500ml)稀释，用etoac(400ml*2)萃取。合并有机层，用水(300ml*2)、饱和盐水(300ml)洗，经无水na2co3干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。粗产物经硅胶色谱法(石油醚/etoac＝100/1)、tlc(板1)rf＝0.67)纯化，得到3,5-二氯-6-乙基-吡嗪-2-甲酸甲酯(13g，55.30mmol，收率：81.13％)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):235.1[(m+h)+]；rt＝0.830min。注意：hcl/meoh(4m)：在0℃下，将hcl鼓泡到meoh溶液中，持续0.5小时。步骤2：3,5-二氯-6-乙基吡嗪-2-甲酸将3,5-二氯-6-乙基-吡嗪-2-甲酸甲酯(4.8g，20.42mmol，1.0当量)的hcl(12m，671.40ml，131.52当量)混合物反应。lcms显示反应完成。将反应物倾入h2o(100ml)中。水相用乙酸乙酯(50ml*3)萃取。合并的有机相用饱和盐水(100ml*1)洗，经无水na2so4干燥。过滤，真空浓缩，得到3,5-二氯-6-乙基-吡嗪-2-甲酸(3g，13.57mmol，收率：66.47％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):221.1[(m+h)+]；rt＝0.688min。步骤3：3,5-二氯-6-乙基吡嗪-2-甲酰氯向3,5-二氯-6-乙基-吡嗪-2-羧酸(1g，4.52mmol，1.0当量)的dcm(10ml)混合物中加入dmf(16.53mg，226.20μmol，0.05当量)，最后一次性加入(cocl)2(1.15g，9.05mmol，2.0当量)，混合物在0℃和n2下反应1小时。tlc显示反应完成。将残余物真空浓缩，得到3,5-二氯-6-乙基-吡嗪-2-甲酰氯(0.8g，3.34mmol，收率：73.84％)，为黄色固体。步骤4：3,5-二氯-6-乙基-n-甲基吡嗪-2-甲酰胺将3,5-二氯-6-乙基-吡嗪-2-甲酰氯(0.8g，3.34mmol，1.0当量)、甲胺盐酸盐(451.08mg，6.68mmol，2.0当量)和dipea(2.16g，16.70mmol，5.0当量)溶于dcm(10ml)溶液。将混合物在25℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。将反应物倾入h2o(50ml)中。水相用乙酸乙酯(10ml*3)萃取。合并的有机相用饱和盐水(50ml*1)洗，经无水na2so4干燥，过滤，真空浓缩。残余物经硅胶色谱法纯化(色谱柱高：250mm，直径：100mm，100-200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝1/1、10/1)，得到3,5-二氯-6-乙基-n-甲基-吡嗪-2-甲酰胺(500mg，2.14mmol，收率：63.94％)，为棕色固体。lc-ms(es+,m/z):234.1[(m+h)+]；rt＝0.705min。中间体10(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸步骤1：n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸叔丁酯在25℃下，向甲基-l-丙氨酸叔丁酯盐酸盐(3g，15.33mmol，1当量)、(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(2.79g，16.86mmol，1.1当量)、edci(4.41g，23.00mmol，1.5当量)、hobt(2.07g，15.33mmol，1当量)的dmf(30ml)溶液中加入dipea(19.81g，153.31mmol，26.70ml，10当量)。将混合物在25℃下搅拌10小时。lcms显示反应完成。将混合物倒入水(100ml)中，用etoac(60ml*2)萃取。有机层用水(60ml*2)、饱和盐水(60ml*2)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经硅胶色谱法纯化(二氯甲烷：甲醇＝10:1)，得到(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸叔丁酯(2.75g，9.56mmol，收率：62.37％，纯度：94％)，为黑褐色油状物。lc-ms(es+,m/z):217.3[(m+h)+]；rt＝0.556min。步骤2：(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸在25℃下，将(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸叔丁酯(1g，3.70mmol，1当量)、tfa(7.70g，67.53mmol，5ml，18.26当量)溶于dcm(10ml)溶液。所得混合物于25℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。将混合物减压浓缩，得到(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸(760mg，粗品)，为黑褐色油状物。lc-ms(es+,m/z):215.2[(m+h)+]；rt＝0.339min。中间体113-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-(二甲基氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺.hcl步骤1：(3-((3-氨基甲酰基-6-(二甲基氨基)-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯在25℃下，将(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(3g，7.14mmol，1当量)、diea(9.23g，71.44mmol，12.44ml，10当量)、n-甲基甲胺(3.22g，39.50mmol，3.62ml，5.53当量，hcl)溶于dma(20ml)溶液，混合物在100℃下搅拌10小时。lcms显示反应完成。将反应物倒入水(50ml)中，用etoac(30ml*3)萃取。合并有机层，用水(10ml*2)、饱和盐水(10ml)洗，经无水na2so4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。粗产物经硅胶硫醇凝胶色谱法(石油醚/etoac＝1/1)纯化，得到(3-((3-氨基甲酰基-6-(二甲基氨基)-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.34g，3.13mmol，收率：43.77％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):429.3[(m+h)+]；rt＝0.929min。步骤2：3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-(二甲基氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺将(3-((3-氨基甲酰基-6-(二甲基氨基)-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.3g，3.03mmol，1当量)、hcl/etoac(4m，30ml，39.56当量)的混合物在25℃下搅拌3小时。lcms显示反应完成。将混合物减压浓缩，得到3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-(二甲基氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(900mg，粗品，hcl)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):329.4[(m+h)+]；rt＝0.641min。注意：hcl/meoh(4m)：将hcl气体在0℃下鼓泡到meoh溶液中，持续0.5小时，然后称取所得溶液，得到hcl/meoh(4m)。中间体12(s)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯在25℃下，向(3-氨基苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(2g，8.46mmol，1当量)、3,5-二氯-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(1.86g，8.46mmol，1当量)的nmp(5ml)混合物中加入dipea(21.88g，169.27mmol，29.48ml，20当量)。将混合物在140℃下搅拌10小时。lcms显示反应完成。将反应物倒入h2o(50ml)中。水相用乙酸乙酯(20ml*3)萃取。合并的有机相用饱和盐水(50ml*1)洗，经无水na2so4干燥，过滤，真空浓缩。残余物经硅胶色谱法(柱高：250mm，直径：100mm，100-200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝1/1、10/1)纯化，得到(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(3.5g，6.67mmol，收率：78.79％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.19(s,1h),8.26(s,1h),8.04(br s,1h),7.59(br d,j＝7.9hz,1h),7.32-7.23(m,2h),6.93-6.83(m,2h),3.16(q,j＝6.5hz,2h),2.82(q,j＝7.5hz,2h),2.69(t,j＝7.3hz,2h),1.36(s,9h),1.28-1.24(m,3h).lc-ms(es+,m/z):420.3[(m+h)+]；rt＝0.941min。步骤2：(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯在20℃下，向(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，952.60μmol，1当量)和n-甲基丙烷-2-胺(696.70mg，9.53mmol，992.44μl，10当量)的dma(10ml)溶液中加入dipea(123.12mg，952.60μmol，165.93μl，1当量)。将混合物在密封管中于100℃下搅拌10小时。lcms显示反应完成。将反应物倒入水(30ml)中，用etoac(30ml*2)萃取。合并有机层，用水(15ml*2)、饱和盐水(10ml)洗，干燥(na2so4)，过滤，浓缩，得到粗产物。将粗产物经硅胶硫醇凝胶色谱法(石油醚/etoac＝1/2)纯化，得到(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(350mg，766.57μmol，收率：80.47％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):457.5[(m+h)+]；rt＝0.992min。步骤3：3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(350mg，766.57μmol，1当量)和hcl/meoh(4m，10.94ml，57.07当量)的溶液在25℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。将混合物减压浓缩，得到3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(260mg，粗品)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):357.3[(m+h)+]；rt＝0.716min。注意：hcl/meoh(4m)：在0℃下，将hcl气体鼓泡到meoh溶液中，持续0.5小时，然后称重所得溶液，得到hcl/meoh(4m)。步骤4：(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯向3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(260mg，729.39μmol，1当量)、nmi(598.85mg，7.29mmol，581.41μl，10当量)、n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基-l-丙氨酸(222.36mg，1.09mmol，1.5当量)的dmf(3ml)溶液中加入tcfh(306.98mg，1.09mmol，1.5当量)。将混合物在0℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。将反应液倒入水(15ml)中，用etoac(10ml*2)萃取。合并有机层，用水(10ml*2)、饱和盐水(5ml)洗，干燥(na2so4)，过滤，浓缩，得到粗产物。粗产物经硅胶硫醇凝胶色谱法(石油醚/etoac＝1/1)tlc(板1rf＝0.75)纯化，得到(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(350mg，646.13μmol，收率：88.59％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):542.4[(m+h)+]；rt＝0.945min。步骤5：(s)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)-氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(350mg，646.13μmol，1当量)和hcl/meoh(4m，10ml，61.91当量)的混合物在15℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。将混合物减压浓缩，得到(s)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(270mg，粗品)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):442.3[(m+h)+]；rt＝0.726min。注意：hcl/meoh(4m)：hcl气体在0℃下鼓泡进入meoh溶液中，持续0.5小时，然后称取所得溶液，得到hcl/meoh(4m)。中间体13(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯步骤1：3,5-二氯-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺在25℃下，向3,5-二氯-2-甲基吡嗪(8g，49.08mmol，1当量)的甲酰胺(53.05g，1.18mol，46.95ml，24当量)溶液中，在90℃下分批加入na2s2o8(18.70g，78.53mmol，17.00ml，1.6当量)。混合物在90℃下搅拌1小时。lcms显示反应完成。将混合物倒入水(150ml)中，用dcm(100ml*2)萃取。有机层用水(100ml*2)、饱和盐水(100ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经硅胶色谱法(石油醚/etoac＝3:1)纯化，得到3,5-二氯-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(3g，14.56mmol，收率：29.67％)，为白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝8.27-8.13(m,1h),8.02(br s,1h),2.67(s,3h)；lc-ms(es+,m/z):206.2[(m+h)+].rt＝0.627min。步骤2：(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯在16℃下，向3,5-二氯-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(5.3g，25.72mmol，1当量)、(3-氨基苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(6.08g，25.72mmol，1当量)的nmp(50ml)溶液中加入dipea(66.49g，514.49mmol，89.61ml，20当量)。将混合物在140℃下搅拌10小时。lcms显示反应完成。将混合物倒入水(150ml)中，用etoac(100ml*2)萃取。有机层用水(100ml*2)、饱和盐水(100ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经硅胶色谱法(石油醚/etoac＝1:1)tlc(板1)纯化，得到(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(6g，14.78mmol，收率：57.47％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):406.2[(m+h)+].rt＝0.880min。中间体14(s)-5-环丙基-6-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯在16℃下，向(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(3.47g，8.55mmol，1当量)、环丙基硼酸(7.34g，85.49mmol，10当量)、k2co3(3.54g，25.65mmol，3当量)的dma(24ml)和h2o(12ml)溶液中加入pd(dppf)cl2(625.57mg，854.94μmol，0.1当量)。混合物在n2气氛下于100℃搅拌15小时。lcms显示反应完成。将残余物溶于dcm(40ml)中，加入清除剂(pd)，然后在25℃搅拌1小时，然后过滤。将混合物倒入水(120ml)中，用etoac(80ml*2)萃取。有机层用水(80ml*2)、饱和盐水(80ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经硅胶色谱法(石油醚/etoac＝1:1)纯化，得到(3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.9g，4.62mmol，收率：54.01％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):412.2[(m+h)+].rt＝0.893min。步骤2：3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺将(3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.9g，4.62mmol，1当量)和hcl/meoh(4m，50ml，43.32当量)的混合物在25℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。将混合物减压浓缩，得到3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(1.8g，粗品)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):312.2[(m+h)+]；rt＝0.643min。注意：hcl/meoh(4m)：在0℃下将hcl鼓泡到meoh溶液中，持续0.5小时。步骤3：(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基-l-丙氨酸(1.16g，5.69mmol，1.1当量)的dmf(15ml)溶液中加入dipea(6.69g，51.75mmol，10当量)、3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(1.8g，5.17mmol，1当量，hcl)，然后在0℃下加入bop(3.43g，7.76mmol，1.5当量)。混合物在0℃下搅拌1小时。lcms显示反应完成。将混合物倒入水(80ml)中，用etoac(50ml*2)萃取。有机层用水(50ml*2)和饱和盐水(50ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经硅胶色谱法(石油醚：乙酸乙酯＝2:1)纯化，得到(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(2.42g，4.87mmol，收率：94.17％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):497.3[(m+h)+]；rt＝0.860min。步骤4：(s)-5-环丙基-6-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.5g，3.02mmol，1当量)和hcl/meoh(4m，50ml，66.21当量)的混合物在16℃下搅拌1小时。lcms显示反应完成。将混合物减压浓缩，得到(s)-5-环丙基-6-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(1.23g，粗品)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):397.3[(m+h)+]；rt＝0.680min。中间体15(s)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：3,5-二氯-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺在25℃下，向3,5-二氯-2-甲基吡嗪(8g，49.08mmol，1当量)的甲酰胺(53.05g，1.18mol，46.95ml，24当量)溶液中，在90℃下分批加入na2s2o8(18.70g，78.53mmol，17.00ml，1.6当量)。混合物在90℃下搅拌1小时。lcms显示反应完成。将混合物倒入水(150ml)中，用dcm(100ml*2)萃取。有机层用水(100ml*2)、饱和盐水(100ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经硅胶色谱法(石油醚/etoac＝3:1)纯化，得到3,5-二氯-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(3g，14.56mmol，收率：29.67％)，为白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝8.27-8.13(m,1h),8.02(br s,1h),2.67(s,3h)；lc-ms(es+,m/z):206.2[(m+h)+].rt＝0.627min。步骤2：(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯在25℃下，向3,5-二氯-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(1.7g，8.25mmol，1当量)、(3-氨基苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.95g，8.25mmol，1当量)的nmp(30ml)溶液中加入dipea(31.99g，247.54mmol，43.12ml，30当量)。将混合物在140℃下搅拌15小时。lcms显示反应完成。将混合物倒入水(100ml)中，用etoac(60ml*2)萃取。有机层用水(60ml*2)、饱和盐水(60ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经硅胶色谱法(石油醚/etoac＝1:1)tlc纯化，得到(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(2.52g，6.21mmol，收率：75.25％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):406.3[(m+h)+].rt＝0.893min。步骤3：(3-((3-氨基甲酰基-6-(异丙基(甲基)氨基)-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯在100ml高压釜中，将(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(2.5g，6.16mmol，1当量)的用n-甲基丙烷-2-胺(2.25g，30.80mmol，3.21ml，5当量)、diea(7.96g，61.59mmol，10.73ml，10当量)饱和的dma(30ml)溶液在100℃下搅拌10小时。lcms显示反应完成。通过添加水(400ml)使反应液骤冷，然后用etoac(300ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(350ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至1/1)纯化，得到(3-((3-氨基甲酰基-6-(异丙基(甲基)氨基)-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯，为黄色固体(9g，18.30mmol，收率：74.29％，纯度：90％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.10(s,1h),7.77(br d,j＝2.1hz,1h),7.61-7.53(m,1h),7.45-7.35(m,2h),7.23-7.15(m,1h),6.95-6.82(m,1h),6.81-6.75(m,1h),4.40-4.30(m,1h),3.16-3.09(m,2h),2.94-2.85(m,3h),2.69-2.63(m,2h),2.44(s,3h),1.39-1.32(m,9h),1.21(d,j＝6.6hz,6h)lc-ms(es+,m/z):443.3[(m+h)+]；rt＝0.947min。步骤4：3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺向(3-((3-氨基甲酰基-6-(异丙基(甲基)氨基)-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(9g，20.34mmol，1当量)的混合物中加入hcl/meoh(4m，100ml)，混合物于16℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。将反应混合物减压浓缩，得到残余物。粗产物用etoac在25℃研磨10分钟，然后过滤，得到3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(7.7g，18.29mmol，收率：89.94％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.13(s,1h),8.12-8.00(m,3h),7.93-7.67(m,1h),7.60-7.36(m,3h),7.28-7.23(m,1h),6.88-6.83(m,1h),4.36-4.28(m,1h),3.07-2.99(m,2h),2.91-2.85(m,5h),2.44(s,3h),1.23-1.19(m,6h)(hcl盐)。lc-ms(es+,m/z):343.2[(m+h)+]；rt＝0.691min。注意：hcl/etoac(4m)：hcl在0℃下鼓泡到etoac溶液中0.5小时，然后称重溶液，得到hcl/etoac(4m)。步骤5：(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-(异丙基(甲基)氨基)-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基-l-丙氨酸(2.49g，12.27mmol，1.2当量)、1-甲基咪唑(8.39g，102.21mmol，8.15ml，10当量)的dmf(35ml)溶液中加入3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(3.5g，10.22mmol，1当量)，然后加入tcfh(3.44g，12.27mmol，1.2当量)。将混合物在0℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。反应混合物通过加入水(120ml)淬灭，然后用etoac(100ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(150ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至5/1)纯化，得到(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-(异丙基(甲基)氨基)-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(4.1g，7.38mmol，收率：72.22％，纯度：95％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.11(s,1h),7.84-7.73(m,2h),7.56(s,1h),7.44-7.37(m,2h),7.24-7.14(m,1h),6.83-6.75(m,1h),4.41-4.31(m,1h),4.04-4.01(m,1h),3.31-3.22(m,2h),2.93-2.86(m,3h),2.72-2.65(m,5h),2.46-2.41(m,3h),1.42-1.32(m,9h),1.17(s,9h).lc-ms(es+,m/z):528.4[(m+h)+]；rt＝0.902min。步骤6：(s)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-(异丙基(甲基)氨基)-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(4.1g，7.77mmol，1当量)、hcl/meoh(4m，21.67ml，11.15当量)的混合物在0℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。将反应混合物减压浓缩，得到残余物。浓缩粗产物，得到(s)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(4.1g，粗品，hcl)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.14-11.05(m,1h),9.49-9.38(m,1h),8.90-8.78(m,1h),8.76-8.70(m,1h),7.52-7.47(m,2h),7.23-7.18(m,1h),6.82(br d,j＝7.5hz,1h),6.71-6.64(m,2h),4.30(s,1h),3.73-3.65(m,1h),3.45-3.33(m,2h),3.16-3.16(m,3h),2.91-2.88(m,3h),2.77-2.71(m,2h),2.44(s,3h),1.33-1.29(m,3h),1.22-1.18(m,6h).lc-ms(es+,m/z):428.3[(m+h)+]；rt＝0.693min；95.9％纯度。注意：hcl/etoac(4m)：在0℃下，将hcl鼓泡导入etoac溶液中，持续0.5小时，然后称取所得溶液，得到hcl/etoac(4m)。实施例1(化合物137)(s,e)-5-(二甲基氨基)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-(二甲基氨基)-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在25℃下，向(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(600mg，1.19mmol，1当量)、me2nh(968.83mg，11.88mmol，10当量，hcl)的dma(6ml)溶液中加入dipea(1.54g，11.88mmol，10当量)。将混合物在100℃下搅拌10小时。lcms显示反应完成。将混合物倒入水(20ml)中，用etoac(15ml*2)萃取。有机层用水(15ml*2)、饱和盐水(15ml*2)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经制备型hplc(色谱柱：c18-1150*30mm*5um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：35％-80％，8分钟)纯化，得到n-[(1s)-2-[2-[3-[[3-氨基甲酰基-6-(二甲基氨基)-5-乙基-吡嗪-2-基]氨基]苯基]乙基氨基]-1-甲基-2-氧代-乙基]-n-甲基-氨基甲酸叔丁酯(251mg，449.58μmol，收率：37.84％)，为棕色固体。1h nmr(400mhz,cdcl3-d)δ＝10.67(s,1h),7.65-7.39(m,4h),7.17-7.12(m,2h),6.74-6.71(m,1h),4.17-3.94(m,1h),3.51-3.39(m,2h),3.03(s,6h),2.72-2.68(m,4h),2.60(s,3h),1.34(s,9h),1.24(brd,j＝7.1hz,3h),1.21-1.19(m,3h)；lc-ms(es+,m/z):514.3[(m+h)+]；rt＝0.872min。步骤2：(s)-5-(二甲基氨基)-6-乙基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-(二甲基氨基)-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(251mg，488.68μmol，1当量)和hcl/meoh(4m，50ml，409.27当量)的混合物在25℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。将混合物减压浓缩，得到(s)-5-(二甲基氨基)-6-乙基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(230mg，粗品)，为棕色固体。lc-ms(es+,m/z):414.3[(m+h)+]；rt＝0.684min。注意：hcl/meoh(4m)：hcl气体在0℃下鼓泡进入meoh溶液中，持续0.5小时，然后称取所得溶液，得到hcl/meoh(4m)。步骤3：(s,e)-5-(二甲基氨基)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺在25℃下，向(s)-5-(二甲基氨基)-6-乙基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(230mg，556.21μmol，1当量)、(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(138.18mg，834.31μmol，1.5当量)、bop(369.00mg，834.31μmol，1.5当量)的dmf(4ml)溶液中加入dipea(718.86mg，5.56mmol，10当量)。将混合物在25℃搅拌1小时。lcms显示反应完成。过滤混合物，得到残余物。粗产物经制备型hplc(色谱柱：c18-1150*30mm*5um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：5％-50％，8分钟)纯化，得到(s,e)-5-(二甲基氨基)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(155.89mg，293.50μmol，收率：52.77％，纯度：98.78％)，为棕色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6,tfa)δ＝11.15-11.07(m,1h),9.76-9.63(m,1h),8.10-7.85(m,1h),7.76(br d,j＝2.5hz,1h),7.58-7.40(m,3h),7.25-7.17(m,1h),6.86-6.76(m,2h),6.64-6.46(m,1h),5.01-4.51(m,1h),3.95-3.78(m,2h),3.32-3.26(m,2h),3.07(s,6h),2.90(s,2h),2.80-2.67(m,11h),1.30-1.21(m,6h)；lc-ms(es+,m/z):525.3[(m+h)+]；rt＝2.099min；98.777％纯度；hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:525.3279。实施例2(化合物138)(s,e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在25℃下，向(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(600mg，1.19mmol，1当量)、环丙基硼酸(1.02g，11.88mmol，10当量)、k2co3(492.61mg，3.56mmol，3当量)的dma(4ml)和h2o(2ml)溶液中加入pd(dppf)cl2(86.93mg，118.81μmol，0.1当量)。将混合物在100℃下搅拌10小时。lcms显示反应完成。将混合物倒入饱和edta(10ml)、ea(5ml)中，用etoac(5ml*2)萃取。有机层用水(10ml*2)和饱和盐水(10ml*2)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经制备型hplc(色谱柱：c18-1150*30mm*5um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：35％-80％，8分钟)纯化，得到(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(338mg，661.93μmol，收率：55.71％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,cdcl3-d)δ＝10.61-10.54(m,1h),7.86-7.75(m,1h),7.48-7.40(m,2h),7.19-7.13(m,1h),6.76-6.73(m,1h),6.18-5.88(m,1h),5.58-5.41(m,1h),4.10-4.00(m,1h),3.58-3.41(m,2h),2.84(q,j＝7.5hz,2h),2.77-2.69(m,2h),2.65-2.57(m,3h),2.12-2.06(m,1h),1.36-1.32(m,9h),1.25-1.17(m,6h),1.17-1.11(m,2h),1.06-1.00(m,2h)；lc-ms(es+,m/z):511.3[(m+h)+]；rt＝0.924min。步骤2：(s)-5-环丙基-6-乙基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(338mg，661.93μmol，1当量)和hcl/meoh(4m，50ml，302.15当量)的混合物在25℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。将混合物减压浓缩，得到(s)-5-环丙基-6-乙基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(300mg，粗品)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):411.3[(m+h)+]；rt＝0.707min。注意：hcl/meoh(4m)：hcl气体在0℃下鼓泡进入meoh溶液中，持续0.5小时，然后称取所得溶液，得到hcl/meoh(4m)。步骤3：(s,e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺在25℃下，向(s)-5-环丙基-6-乙基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(300mg，730.80μmol，1当量)、(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(181.55mg，1.10mmol，1.5当量)、bop(484.83mg，1.10mmol，1.5当量)的dmf(4ml)溶液中加入dipea(944.50mg，7.31mmol，10当量)。将混合物在25℃下搅拌1小时。lcms显示反应完成。过滤混合物，得到残余物。粗产物经制备型hplc(色谱柱：c18-1150*30mm*5um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：5％-50％，8分钟)纯化，得到(s,e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(207.25mg，395.71μmol，收率：54.15％，纯度：99.60％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,d2o)δ＝7.39-7.30(m,1h),7.12-7.05(m,2h),6.78-6.72(m,1h),6.66-6.56(m,1h),6.51-6.40(m,1h),4.86-4.75(m,1h),3.74-3.62(m,2h),3.49-3.29(m,2h),2.79-2.60(m,13h),2.14-2.06(m,1h),1.28-1.13(m,6h),1.03-0.97(m,2h),0.90(br s,2h)；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.10-11.00(m,1h),9.74-9.59(m,1h),8.21-8.12(m,1h),8.07(br s,1h),7.87-7.79(m,1h),7.50-7.40(m,2h),7.27-7.19(m,1h),6.88-6.77(m,2h),6.65-6.45(m,1h),5.01-4.53(m,1h),3.92-3.81(m,2h),3.32-3.27(m,2h),2.95-2.87(m,5h),2.80-2.76(m,6h),2.70(br s,2h),2.35-2.31(m,1h),1.31-1.20(m,6h),1.14-1.05(m,4h)；lc-ms(es+,m/z):522.3[(m+h)+]；rt＝2.171min；hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:522.3166。实施例3(化合物142a)(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯在25℃下，向(3-氨基苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(2g，8.46mmol，1当量)、3,5-二氯-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(1.86g，8.46mmol，1当量)的nmp(5ml)混合物中加入dipea(21.88g，169.27mmol，29.48ml，20当量)。将混合物在140℃下搅拌10小时。lcms显示反应完成。将反应物倾入h2o(50ml)中。水相用乙酸乙酯(20ml*3)萃取。合并的有机相用饱和盐水(50ml*1)洗，经无水na2so4干燥。过滤，真空浓缩。残余物经硅胶色谱法(柱高：250mm，直径：100mm，100-200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝1/1、10/1)纯化，得到(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(3.5g，6.67mmol，收率：78.79％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.19(s,1h),8.26(s,1h),8.04(br s,1h),7.59(br d,j＝7.9hz,1h),7.32-7.23(m,2h),6.93-6.83(m,2h),3.16(q,j＝6.5hz,2h),2.82(q,j＝7.5hz,2h),2.69(t,j＝7.3hz,2h),1.36(s,9h),1.28-1.24(m,3h).lc-ms(es+,m/z):420.3[(m+h)+]；rt＝0.941min。步骤2：(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯向(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(1g，2.38mmol，1当量)、2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼杂环己烷(1.49g，11.91mmol，5当量)的dma(12ml)和h2o(3ml)溶液中加入k2co3(987.41mg，7.14mmol，3当量)和pd(dppf)cl2(174.26mg，238.15μmol，0.1当量)，将混合物在100℃下搅拌10小时。lcms显示反应完成。将残余物倾入饱和edta(100ml)和etoac(30ml)中，搅拌60分钟。浓缩混合物。残余物用nahco3(50ml)稀释，然后用etoac(50ml*4)萃取。合并有机层，用水(50ml*2)、饱和盐水(50ml)洗，经无水na2so4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。残余物经硅胶色谱法纯化(柱高：250mm，直径：100mm，100-200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝1/1、10/1)。得到(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(650mg，1.63mmol，收率：68.32％)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.05(s,1h),8.14(br d,j＝1.6hz,1h),7.86(br d,j＝1.6hz,1h),7.65(br d,j＝8.1hz,1h),7.44-7.42(m,1h),7.22(t,j＝7.8hz,1h),6.88-6.80(m,2h),3.18-3.13(m,2h),2.78-2.72(m,2h),2.71-2.67(m,2h),1.36(s,9h),1.26-1.22(m,3h),1.20-1.10(m,3h).lc-ms(es+,m/z):400.3[(m+h)+]；rt＝0.912min。步骤3：3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺将(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(650mg，1.63mmol，1当量)的hcl/meoh(4m，20ml，49.17当量)混合物中在14℃下反应1小时。lcms显示反应完成。过滤，真空浓缩，得到3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺(450mg，1.50mmol，收率：92.38％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.08(s,1h),8.15(br s,1h),7.87(br s,1h),7.71(dd,j＝1.3,8.1hz,1h),7.49(s,1h),7.31-7.19(m,2h),7.18-7.12(m,1h),6.88(d,j＝7.6hz,1h),3.07-3.01(m,2h),2.91-2.86(m,2h),2.74(q,j＝7.5hz,2h),1.33-1.11(m,5h),1.10-0.76(m,1h).lc-ms(es+,m/z):300.3[(m+h)+]；rt＝0.647min。hcl/meoh(4m)：在0℃下，将hcl鼓泡到meoh溶液中，持续0.5小时。步骤4：(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯向3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺(450mg，1.50mmol，1当量)、n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基-l-丙氨酸(366.59mg，1.80mmol，1.2当量)的dmf(8ml)溶液中加入tcfh(632.63mg，2.25mmol，1.5当量)和1-甲基咪唑(1.23g，15.03mmol，1.20ml，10当量)，将混合物在14℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。将反应物倾入h2o(30ml)中。水相用乙酸乙酯(10ml*6)萃取。合并的有机相用饱和盐水(30ml*1)洗，经无水na2so4干燥。过滤，真空浓缩。残余物经硅胶色谱法纯化(柱高：250mm，直径：100mm，100-200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝1/1、10/1)，得到(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1g，1.28mmol，收率：85.12％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.06(s,1h),8.14(br d,j＝2.0hz,1h),7.85(br d,j＝2.1hz,1h),7.83-7.76(m,1h),7.67-7.60(m,1h),7.45(br s,1h),7.22(t,j＝7.8hz,1h),6.82(d,j＝7.7hz,1h),4.61-4.16(d,1h),3.30(brd,j＝6.8hz,2h),2.94-2.89(m,2h),2.78-2.73(m,2h),2.69(br d,j＝8.3hz,3h),1.36(brs,9h),1.25-1.21(m,3h),1.19-1.15(m,3h).lc-ms(es+,m/z):485.4[(m+h)+]；rt＝0.877min。步骤5：(s)-6-乙基-5-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1g，1.28mmol，1当量)的hcl/meoh(4m，20ml，62.53当量)混合物在14℃下反应1小时。lcms显示反应完成。过滤，真空浓缩，得到(s)-6-乙基-5-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(430mg，1.12mmol，收率：87.41％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):385.3[(m+h)+]；rt＝0.671min。注意：0℃下，将hcl鼓泡到meoh溶液中，持续0.5小时。步骤6：(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺在14℃下，向(s)-6-乙基-5-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(400mg，1.04mmol，1当量)、(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(161.25mg，1.25mmol，1.2当量)的dmf(5ml)溶液中加入bop(690.21mg，1.56mmol，1.5当量)和dipea(1.34g，10.40mmol，1.81ml，10当量)，将混合物在14℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c18 250*50mm*10μm；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：20％-50％，10分钟)，得到(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺(100.3mg，202.37μmol，收率：19.45％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.09-11.03(m,1h),9.75(s,1h)8.16(br s,1h),7.92(br t,j＝5.5hz,1h),7.86(br s,1h),7.66(br d,j＝7.7hz,1h),7.43(s,1h),7.28-7.17(m,1h),6.88-6.73(m,2h),6.66-6.44(m,1h),5.03-4.51(m,1h),3.94-3.78(m,2h),3.34-3.26(m,2h),2.90(s,2h),2.78 -2.70(m,11h),2.50(m,3h),1.29(d,j＝6.9hz,1h),1.27-1.19(m,5h).lc-ms(es+,m/z):496.4[(m+h)+]；rt＝0.682min；hrms:496.3003。实施例4(化合物143)(s,e)-5-(二甲基氨基)-6-乙基-3-((3-甲氧基-5-(2-(2-(n-甲基-4-(甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤5：(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-甲氧基苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯向(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-甲氧基苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，934.52μmol，1当量)、n-甲基甲胺盐酸盐(762.05mg，9.35mmol，10当量)的dma(5ml)溶液中加入diea(1.21g，9.35mmol，1.63ml，10当量)。将混合物在n2下于100℃搅拌10小时。lcms显示反应完成。将反应物倒入水(10ml)中，用etoac(5ml*2)萃取。合并有机层，用水(20ml*2)、饱和盐水(20ml)洗，经无水na2so4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。粗产物经硅胶硫醇凝胶色谱法(石油醚/etoac＝1/2)纯化。得到(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-(二甲基氨基)-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-甲氧基苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，551.82μmol)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,cdcl3-d)δ＝10.73(s,1h),7.51(br s,1h),7.22(s,1h),7.06(s,1h),6.31(s,1h),5.27-5.22(m,1h),4.70-4.42(m,1h),3.72(s,3h),3.52-3.41(m,3h),3.04(s,6h),2.72-2.66(m,4h),2.62(s,3h),1.33(s,9h),1.27-1.19(m,6h).lc-ms(es+,m/z):544.4[(m+h)+]；rt＝0.870min。步骤1：(s)-5-(二甲基氨基)-6-乙基-3-((3-甲氧基-5-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-(二甲基氨基)-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-甲氧基苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，551.82μmol，1当量)溶于hcl/meoh(50ml)溶液，混合物在25℃下搅拌1小时。lcms显示反应完成。粗制混合物减压浓缩。得到(s)-5-(二甲基氨基)-6-乙基-3-((3-甲氧基-5-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺的粗制混合物(230mg，518.55μmol，收率：93.97％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):444.3[(m+h)+]；rt＝0.734min。注意：hcl/meoh(4m)：hcl在0℃下鼓泡到meoh溶液中，持续0.5小时，然后称重所得溶液，得到hcl/meoh(4m)。步骤2：(s,e)-5-(二甲基氨基)-6-乙基-3-((3-甲氧基-5-(2-(2-(n-甲基-4-(甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺向(s)-5-(二甲基氨基)-6-乙基-3-((3-甲氧基-5-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(230mg，518.55μmol，1当量)、(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(171.76mg，1.04mmol，2当量，hcl)的dmf(4ml)溶液中加入diea(670.19mg，5.19mmol，903.23μl，10当量)、bop(344.02mg，777.83μmol，1.5当量)。混合物在n2气氛下于25℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。混合物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna 80*30mm*3um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：20％-50％，8分钟)纯化，得到(s,e)-5-(二甲基氨基)-6-乙基-3-((3-甲氧基-5-(2-(2-(n-甲基-4-(甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(60mg，108.17μmol，收率：20.86％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6,tfa)δ＝11.24-11.00(m,1h),9.74(br d,j＝2.7hz,1h),8.12-7.86(m,1h),7.77(br s,1h),7.47(br s,1h),7.41-7.35(m,1h),6.90(s,1h),6.85-6.77(m,1h),6.64-6.48(m,1h),6.38(s,1h),5.05-4.53(m,1h),3.90-3.80(m,2h),3.75(s,3h),3.34-3.24(m,2h),3.08(s,6h),2.91(s,2h),2.81-2.63(m,11h),1.32-1.20(m,6h).lc-ms(es+,m/z):555.3[(m+h)+]；rt＝2.117min；hrms:555.3435。实施例5(化合物144)(s,e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)-5-甲氧基苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-甲氧基苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯将(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-甲氧基苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，934.52μmol，1当量)、环丙基硼酸(802.73mg，9.35mmol，10当量)溶于dma(4ml)、h2o(2ml)溶液，混合物在n2气氛于100℃下搅拌10小时。lcms显示反应完成。将反应物倒入饱和edta(10ml)、etoac(5ml)中，搅拌60分钟，用etoac(5ml*3)萃取。合并有机层，用水(20ml*2)、饱和盐水(20ml)洗，经无水na2so3干燥、过滤，浓缩，得到粗产物。粗产物经硅胶硫醇凝胶色谱法(石油醚/etoac＝1/1)纯化，得到(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-甲氧基苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(330mg，610.37μmol，收率：65.31％)，为白色固体。lc-ms(es+,m/z):541.3[(m+h)+]；rt＝0.890min。步骤2：(s)-5-环丙基-6-乙基-3-((3-甲氧基-5-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺向(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-甲氧基苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(330mg，610.37μmol，1当量)的dcm(40ml)溶液中加入tfa(20ml)。将混合物在25℃搅拌1小时。lcms显示反应完成。粗制混合物减压浓缩。然后，将混合物直接投入下一步骤，得到(s)-5-环丙基-6-乙基-3-((3-甲氧基-5-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺的粗制混合物(250mg，567.49μmol，收率：92.97％)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):441.3[(m+h)+]；rt＝0.753min。步骤3：(s,e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)-5-甲氧基苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺向(s)-5-环丙基-6-乙基-3-((3-甲氧基-5-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(250mg，567.49μmol，1当量)、(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(187.97mg，1.13mmol，2当量，hcl)的dmf(4ml)溶液中加入bop(376.48mg，851.23μmol，1.5当量)、diea(733.44mg，5.67mmol，988.46μl，10当量)。混合物在n2气氛下于25℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。粗制混合物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna 80*30mm*3um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：20％-50％，8分钟)纯化，得到(s,e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)-5-甲氧基苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(70mg，126.89μmol，收率：22.36％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6,tfa)δ＝11.18-11.02(m,1h),9.75(br s,1h),8.15(s,1h),7.92(t,j＝5.6hz,1h),7.84(br s,1h),7.38(br d,j＝1.9hz,1h),6.86-6.78(m,1h),6.78-6.75(m,1h),6.65-6.48(m,1h),6.40(s,1h),5.02-4.54(m,1h),3.92-3.81(m,2h),3.77(s,3h),3.35-3.25(m,2h),2.96-2.87(m,4h),2.82-2.64(m,9h),2.39-2.27(m,1h),1.32-1.19(m,6h),1.15-1.07(m,4h).lc-ms(es+,m/z):552.3[(m+h)+]；rt＝2.188min；hrms:552.3289。实施例6(化合物156)步骤1：(e)-n-(4-溴丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸叔丁酯在20℃和n2下，向甲基-l-丙氨酸叔丁酯盐酸盐(9g，45.99mmol，1当量)和(e)-4-溴丁-2-烯酸(8.35g，50.59mmol，1.1当量)的dmf(90ml)混合物中，一次性加入2-溴-1-乙基-吡啶-1-鎓四氟硼酸盐(18.89g，68.99mmol，1.5当量)和diea(59.44g，459.92mmol，80.11ml，10当量)。将混合物在20℃搅拌1小时。lcms显示反应完成。将残余物倒入水(200ml)中。水相用乙酸乙酯(100ml*3)萃取。合并的有机相用饱和盐水(400ml*1)洗，经无水na2so4干燥，过滤，真空浓缩。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚：乙酸乙酯＝30/1至1/1)纯化。得到目标化合物(e)-n-(4-溴丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸叔丁酯(8g，26.13mmol，收率：28.40％)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):206.3[(m+h)+].rt＝1.837min。步骤2：(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸叔丁酯在25℃和n2下，向(e)-n-(4-溴丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸叔丁酯(8g，26.13mmol，1当量)和氮杂环丁烷盐酸盐(2.44g，26.13mmol，1当量)的dmf(80ml)混合物中一次性加入dipea(10.13g，78.38mmol，3当量)。将混合物在25℃搅拌10小时。lcms显示反应完成。将反应混合物减压过滤，得到残余物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚：乙酸乙酯＝1/1至1/1)纯化。得到目标化合物(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸叔丁酯(550mg，1.95mmol，收率：2.48％)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):283.4[(m+h)+].rt＝0.546min。步骤3：(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸在20℃和n2下，向(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸叔丁酯(500mg，1.77mmol，1当量)的dcm(1.5ml)混合物中一次性加入tfa(77.00g，675.30mmol，50.00ml，381.38当量)。将混合物在20℃搅拌1小时。lcms显示反应完成。将反应混合物减压浓缩，得到残余物。得到目标化合物(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸(480mg，粗品)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):227.3[(m+h)+].rt＝0.177min。步骤4：(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(二甲基氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺在25℃和n2下，向(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸丙酸(109.44mg，483.66μmol，2当量)和3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-(二甲基氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(100mg，241.83μmol，1当量)的dmf(2ml)混合物中，一次性加入bop(160.43mg，362.74μmol，1.5当量)和dipea(312.55mg，2.42mmol，421.22μl，10当量)。将混合物在25℃搅拌4小时，lcms显示反应完成。将反应混合物减压浓缩，得到残余物。残余物经制备型hplc((tfa条件)色谱柱：c18-1150*30mm*5μm；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：10％-55％，8分钟)纯化。得到目标化合物(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(二甲基氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(25.1mg，45.85μmol，收率：18.96％)，为棕色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6,tfa)δ＝11.22-11.07(m,1h),10.02-9.71(m,1h),8.11-7.86(m,1h),7.79-7.72(m,1h),7.56-7.42(m,3h),7.26-7.15(m,1h),6.82-6.67(m,2h),6.52-6.19(m,1h),4.97-4.56(m,1h),4.14(br d,j＝6.2hz,2h),4.00 -3.98(m,4h),3.35-3.24(m,2h),3.09-3.04(m,6h),2.92-2.86(m,2h),2.80-2.67(m,6h),2.44-2.35(m,2h),1.28-1.19(m,6h).1h nmr(400mhz,d2o)δ＝7.55-7.39(m,1h),7.26-7.05(m,2h),6.80(br d,j＝7.3hz,1h),6.58-6.40(m,1h),6.38(s,1h),4.85-4.41(m,1h),4.31-4.07(m,2h),4.05-3.86(m,2h),3.84-3.59(m,2h),3.53-3.27(m,2h),3.05-2.93(m,6h),2.79-2.62(m,7h),2.58-2.29(m,2h),1.32-1.12(m,6h)lc-ms(es+,m/z):537.3[(m+h)+].rt＝2.117min.hrms(ei):m/z[m]+实测值:537.3306。实施例7(化合物158)(s,e)-5-(二甲基氨基)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)-5-氟苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-(二甲基氨基)-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯向(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，956.03μmol，1当量)的dma(5ml)溶液中加入dipea(1.24g，9.56mmol，1.67ml，10当量)和二甲胺(779.58mg，9.56mmol，875.94μl，10当量，hcl)。将混合物在100℃下在密封管中搅拌10小时。lc-ms显示反应完成。将反应液倒入h2o(5ml)中，用ea(10ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(10ml*3)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至1/5)纯化，得到(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-(二甲基氨基)-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，564.31μmol，收率：59.03％)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.38-11.23(m,1h),7.87-7.73(m,2h),7.72-7.60(m,1h),7.58-7.47(m,1h),7.17-7.05(m,1h),6.68-6.55(m,1h),4.57-4.22(m,1h),3.17(d,j＝5.3hz,2h),3.07(s,5h),2.79-2.74(m,4h),2.71-2.68(m,4h),1.40-1.20(m,15h).lc-ms(es+,m/z):532.3[(m+h)+]；rt＝0.886min。步骤2：(s)-5-(二甲基氨基)-6-乙基-3-((3-氟-5-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-(二甲基氨基)-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，564.31μmol，1当量)的hcl/meoh(4m，48.70ml，345.21当量)混合物于25℃下搅拌2小时。lc-ms显示反应完成。将反应混合物过滤，减压浓缩，得到(s)-5-(二甲基氨基)-6-乙基-3-((3-氟-5-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)-氨基)-吡嗪-2-甲酰胺(287.4mg，粗品，hcl)，为黄色油状物(150mg，粗品)。lc-ms(es+,m/z):432.2[(m+h)+]；rt＝0.755min。注意：hcl/meoh(4m)：hcl在0℃下鼓泡进入meoh溶液中，持续0.5小时。步骤3：(s,e)-5-(二甲基氨基)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)-5-氟苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺向(s)-5-(二甲基氨基)-6-乙基-3-((3-氟-5-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(287mg，665.11μmol，1当量)的dmf(4ml)溶液中加入bop(441.25mg，997.67μmol，1.5当量)、dipea(1.60g，12.40mmol，2.16ml，18.64当量)和(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(352.36mg，2.73mmol，4.10当量)。lcms显示反应完成。将反应混合物过滤，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna 80*30mm*3um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：20％-50％，8分钟)纯化，得到(s,e)-5-(二甲基氨基)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)-5-氟苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(246mg，449.25μmol，收率：67.55％，纯度：99.10％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6,tfa)δ＝11.37-11.24(m,1h),9.65(br s,1h),8.14-7.86(m,1h),7.79(brs,1h),7.73-7.66(m,1h),7.52(br s,1h),7.08(s,1h),6.86-6.75(m,1h),6.65-6.46(m,2h),4.96-4.55(m,1h),3.91-3.86(m,2h),3.33-3.24(m,2h),3.10-3.06(m,6h),2.89(s,2h),2.77(br d,j＝7.3hz,7h),2.73-2.66(m,4h),1.28-1.19(m,6h).lc-ms(es+,m/z):543.3[(m+h)+]；rt＝2.200min；99.10％纯度；hrms:543.3200。实施例8(化合物159)(s,e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)-5-氟苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在25℃下，向(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，956.03μmol，1当量)的dma(4ml)和h2o(2ml)溶液中加入pd(dppf)cl2(69.95mg，95.60μmol，0.1当量)、环丙基硼酸(821.20mg，9.56mmol，10当量)和k2co3(396.39mg，2.87mmol，3当量)。混合物于100℃下搅拌10小时。lcms显示反应完成。将反应液倒入饱和edta(10ml)、ea(5ml)中，搅拌60分钟后，用ea(5ml*3)萃取。将合并的有机层用饱和盐水(10ml*3)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至1/1)纯化，得到(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(70mg，132.42μmol，收率：13.85％)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):529.3[(m+h)+]；rt＝0.904min。步骤2：(s)-5-环丙基-6-乙基-3-((3-氟-5-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(310mg，586.44μmol，1当量)和tfa(2.45g，21.47mmol，1.59ml，36.61当量)的dcm(5ml)混合物于25℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。将反应混合物过滤，减压浓缩，得到(s)-5-环丙基-6-乙基-3-((3-氟-5-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(440mg，粗品，tfa)，为黄色固体。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.28-11.19(m,1h),8.79-8.67(m,2h),8.54-8.47(m,1h),8.18(br s,1h),7.93-7.84(m,1h),7.63(br d,j＝11.9hz,1h),7.07-7.00(m,1h),6.68(br d,j＝8.8hz,1h),3.70-3.64(m,1h),3.51-3.35(m,2h),2.93-2.90(m,1h),2.79-2.72(m,2h),2.70-2.67(m,1h),2.45-2.43(m,3h),1.30-1.26(m,6h),1.13(br s,2h),1.09-1.05(m,2h).lc-ms(es+,m/z):429.3[(m+h)+]；rt＝0.744min；91.31％纯度。步骤3：(s,e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)-5-氟苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺向(s)-5-环丙基-6-乙基-3-((3-氟-5-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(220mg，405.51μmol，1当量，tfa)和(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸的dmf(2ml)溶液中加入bop(269.02mg，608.27μmol，1.5当量)、dipea(524.10mg，4.06mmol，706.33μl，10当量)。将混合物在25℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。将反应混合物过滤，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna 80*30mm*3um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：20％-50％，8分钟)纯化，得到(s,e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)-5-氟苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(60.81mg，106.44μmol，收率：26.25％，纯度：94.46％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.23(br s,1h),9.79-9.57(m,1h),8.50-8.18(m,1h),8.06 -7.93(m,2h),7.91-7.88(m,1h),7.01-7.09(m,1h),6.83-6.79(m,1h),6.65-6.60(m,2h),5.08-4.49(m,1h),3.97-3.78(m,2h),3.51-3.39(m,2h),2.94-2.88(m,4h),2.79-2.68(m,9h),2.36-2.29(m,1h),1.38-1.23(m,6h),1.15-1.05(m,4h).lc-ms(es+,m/z):540.2[(m+h)+]；rt＝2.261min；94.46纯度；hrms:540.3116。实施例9(化合物162)(s,z)-5-(二甲基氨基)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-2-氟-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(z)-4-(二甲基氨基)-2-氟丁-2-烯酸乙酯在0℃下，向2-二乙氧基磷酰基-2-氟-乙酸乙酯(10g，41.29mmol，8.40ml，1当量)的dcm(100ml)溶液中加入dbu(31.43g，206.46mmol，31.12ml，5当量)。在加入后，混合物于此温度下搅拌30分钟，然后在0℃下加入2-(二甲基氨基)乙醛(10.48g，61.94mmol，1.5当量，h2so3)。所得混合物在25℃搅拌10小时。hplc显示反应完成。反应混合物在0℃下通过加入饱和nh4cl(200ml)水溶液淬灭，然后用dcm(100ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(50ml*2)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到(z)-4-(二甲基氨基)-2-氟-丁-2-烯酸乙酯(4g，粗品)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):176.4[(m+h)+].rt＝0.247min。步骤2：(z)-4-(二甲基氨基)-2-氟丁-2-烯酸在0℃下，向(z)-4-(二甲基氨基)-2-氟-丁-2-烯酸乙酯(1g，5.71mmol，1当量)的thf(10ml)和h2o(1ml)溶液中加入lioh.h2o(718.55mg，17.12mmol，3当量)。加入后，将混合物在25℃搅拌2小时。lc-ms显示反应完成。用1m hcl中和反应混合物，减压浓缩，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c18 100*30mm*5um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：95％-70％，10分钟)纯化，得到化合物(z)-4-(二甲基氨基)-2-氟丁-2-烯酸(620mg，4.21mmol，收率：73.82％)，为白色固体。lc-ms(es+,m/z):148.3[(m+h)+].rt＝0.183min。步骤3：(s,z)-5-(二甲氨基)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲氨基)-2-氟-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺向(s)-5-(二甲基氨基)-6-乙基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(s,z)-5-(二甲基氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)-丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(100mg，241.83μmol，1.0当量)、(z)-4-(二甲基氨基)-2-氟丁-2-烯酸(284.68mg，1.93mmol，8.0当量)的dmf(3ml)溶液中加入bop(160.43mg，362.74μmol，1.5当量)和dipea(312.54mg，2.42mmol，10当量)，将混合物在10℃下搅拌10小时。lcms显示反应完成。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex c18 75*30mm*3um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：35％-65％，8分钟)纯化，得到(s,z)-5-(二甲基氨基)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-2-氟-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(13.41mg，24.61μmol，收率：10.17％)，为棕色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.12-11.09(m,1h),7.98(br d,j＝5.4hz,1h),7.74(br d,j＝2.5hz,1h),7.56(s,1h),7.49-7.42(m,2h),7.20(t,j＝7.8hz,1h),6.79(d,j＝7.6hz,1h),5.76-5.45(m,1h),4.82-4.25(m,1h),3.31-3.24(m,2h),3.06(s,6h),3.05-3.02(m,2h),2.92-2.82(m,2h),2.79-2.80(m,3h),2.70(br t,j＝7.2hz,2h),2.16-2.13(f,6h),1.22-1.17(t,j＝7.4hz,6h).lc-ms(es+,m/z):543.4[(m+h)+]；rt＝2.894min；hrms:543.3257。实施例10(化合物202)(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(e)-n-(4-溴丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸叔丁酯在20℃和n2下，向甲基-l-丙氨酸叔丁基酯盐酸盐(9g，45.99mmol，纯度n/a，1当量)和(e)-4-溴丁-2-烯酸(8.35g，50.59mmol，1.1当量)的dmf(90ml)混合物中一次性加入bep(18.89g，68.99mmol，1.5当量)和diea(59.44g，459.92mmol，80.11ml，10当量)。将混合物在20℃搅拌1小时。lcms显示反应完成。将残余物倒入冰水(w/w＝1/1)(120ml)中。水相用乙酸乙酯(20ml*3)萃取。合并的有机相用饱和盐水(20ml*2)洗，经无水na2so4干燥，过滤，真空浓缩。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚：乙酸乙酯＝30/1至1/1)纯化，得到(e)-n-(4-溴丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸叔丁酯(8g，26.13mmol，收率：28.40％)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):206.3[(m+h-100)+].rt＝1.837min。步骤2：(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸叔丁酯在25℃下，向(e)-n-(4-溴丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸叔丁酯(8g，26.13mmol，1当量)和盐酸氮杂环丁烷(2.44g，26.13mmol，1当量)的dmf(80ml)混合物中一次性加入dipea(10.13g，78.38mmol，13.65ml，3当量)。将混合物在25℃下搅拌10小时。lcms显示反应完成。将反应混合物减压过滤，得到残余物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚：乙酸乙酯＝1/1至1/1)纯化。得到目标化合物(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸叔丁酯(550mg，1.95mmol，收率：2.48％)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):283.4[(m+h)+].rt＝0.546min。步骤3：(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸在20℃下，向(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸叔丁酯(500mg，1.77mmol，1当量)的dcm(1.5ml)混合物中一次性加入tfa(77.00g，675.30mmol，381.38当量)。将混合物在20℃下搅拌1小时。lcms显示反应完成。反应物减压浓缩，得到残余物。得到目标化合物(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸(480mg，粗品)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):227.3[(m+h)+].rt＝0.177min。步骤4：(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺(250mg，835.09μmol，1当量)和(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基-l-丙氨酸(188.96mg，835.09μmol，1当量)的dmf(2.5ml)混合物中，一次性加入bop(554.01mg，1.25mmol，1.5当量)和dipea(1.08g，8.35mmol，1.45ml，10当量)。混合物在0℃下搅拌4小时。lcms显示反应完成。将反应混合物减压过滤，得到残余物。残余物经制备型hplc(tfa条件)(色谱柱：c18-1 150*30mm*5μm；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：5％-50％，8分钟)纯化。得到目标化合物(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺(60.43mg，117.29μmol，收率：14.05％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.12-10.98(m,1h),10.10-9.95(m,1h),8.16(br s,1h),8.07-7.74(m,2h),7.66(br d,j＝8.0hz,1h),7.43(s,1h),7.28-7.19(m,1h),6.89-6.62(m,2h),6.55-6.31(m,1h),5.00-4.52(m,1h),4.22-4.07(m,2h),4.06-3.89(m,4h),3.36-3.25(m,2h),2.94-2.86(m,2h),2.80-2.71(m,3h),2.71-2.65(m,2h),2.52-2.50(m,3h),2.43-2.19(m,2h),1.30-1.20(m,6h)(tfa,盐).1h nmr(400mhz,d2o)δ＝7.27-7.22(m,1h),7.19-7.12(m,1h),7.08-7.01(m,1h),6.77-6.70(m,1h),6.53(br d,j＝15.5hz,1h),6.47-6.29(m,1h),4.85-4.80(m,1h),4.53(d,j＝6.9hz,1h),4.28-4.17(m,2h),4.05-3.93(m,2h),3.91-3.80(m,2h),3.44-3.29(m,2h),2.83(s,2h),2.70-2.65(m,2h),2.57-2.43(m,3h),2.19-2.18(m,1h),2.19-2.13(m,3h),1.33-1.25(m,1h),1.24-1.19(m,2h),1.08-1.03(m,3h).lc-ms(es+,m/z):508.3[(m+h)+]；rt＝2.076min.hrms(ei):m/z[m]+实测值:508.3055。实施例11(化合物203)(s)-5-(二甲氨基)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲氨基)-n-甲基丁-2-炔酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺向n-(4-(二甲基氨基)丁-2-炔酰基)-n-甲基-l-丙氨酸(198.69mg，608.99μmol，2当量，tfa)、bop(202.01mg，456.74μmol，1.5当量)、diea(393.54mg，3.04mmol，530.38μl，10当量)的dmf(2.5ml)溶液中加入3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-(二甲基氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(100mg，304.50μmol，1当量)。将混合物在0℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。浓缩反应物。粗产物经制备型hplc(色谱柱：c18-1150*30mm*5um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：10％-55％，8分钟)纯化，然后经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c18100*30mm*5um；流动相：[水(tfa)-meoh]；b％：45％-75％，10分钟)进一步纯化，得到(s)-5-(二甲氨基)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲氨基)-n-甲基丁-2-炔酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(6.67mg，12.76μmol，收率：4.19％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.11(d,j＝3.9hz,1h),10.85-10.60(m,1h),8.23-7.97(m,1h),7.74(br s,1h),7.55(br d,j＝6.1hz,1h),7.52-7.43(m,2h),7.21(dt,j＝3.5,7.8hz,1h),6.79(td,j＝1.4,7.6hz,1h),4.93-4.79(m,1h),4.24(br d,j＝16.0hz,2h),3.34-3.27(m,2h),3.26-3.03(m,8h),2.79-2.66(m,11h),1.34-1.21(m,6h)(tfa盐).lc-ms(es+,m/z):523.3[(m+h)+]；rt＝2.813min；hrms(ei):m/z[m]+实测值:523.3130；sfc:95.58％。实施例12(化合物204)(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺向(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(118.46mg，917.19μmol，1.5当量)的dmf(2.5ml)溶液中加入diea(790.27mg，6.11mmol，1.07ml，10当量)和(s)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(270mg，611.46μmol，1当量)，然后加入bop(405.65mg，917.19μmol，1.5当量)。将混合物在0℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。浓缩反应物。粗产物经制备型hplc(色谱柱：phenomenexluna c18 150*30mm*5um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：15％-45％，8分钟)纯化，得到(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(64.81mg，116.25μmol，收率：19.01％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.15-11.06(m,1h),9.67(br s,1h),8.11-7.88(m,1h),7.76(br d,j＝2.1hz,1h),7.55-7.50(m,1h),7.49-7.42(m,2h),7.24-7.16(m,1h),6.86-6.75(m,2h),6.65-6.46(m,1h),4.99-4.54(m,1h),4.25(td,j＝6.6,13.2hz,1h),3.90-3.81(m,2h),3.33-3.23(m,2h),2.91-2.84(m,5h),2.80-2.67(m,11h),1.30-1.19(m,12h).lc-ms(es+,m/z):553.4[(m+h)+]；rt＝2.247min；hrms(ei):m/z[m]+实测值:553.3696；sfc:99.14％。实施例13(化合物205)(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯向(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(200mg，476.30μmol，1当量)的dma(2ml)溶液中加入丙-2-胺(140.77mg，2.38mmol，5当量)和dipea(615.58mg，4.76mmol，829.63μl，10当量)。将混合物在100℃下搅拌10小时。lcms显示反应完成。在25℃下，通过加入水(50ml)淬灭反应混合物，然后用etoac(30ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(20ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至1/1)纯化，得到(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(180mg，389.97μmol，收率：81.88％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.22(s,1h),7.73-7.68(m,1h),7.57-7.53(m,1h),7.33-7.24(m,2h),7.21-7.15(m,1h),6.92(t,j＝5.3hz,1h),6.78-6.74(m,2h),4.31-3.98(m,1h),3.15-3.10(m,2h),2.67-2.63(m,2h),2.61-2.55(m,2h),1.37(s,9h),1.27(d,j＝6.6hz,6h),1.21-1.17(m,3h).lc-ms(es+,m/z):443.3[(m+h)+]；rt＝0.887min。步骤2：3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基氨基)吡嗪-2-甲酰胺向(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(180mg，406.73μmol，1当量)中加入hcl/meoh(4m，101.68μl)。将混合物在16℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。将反应混合物减压浓缩，得到残余物。粗产物用etoac在25℃下研磨10分钟，得到3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基氨基)吡嗪-2-甲酰胺(130mg，367.71μmol，收率：90.41％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.25(br s,1h),8.08(br s,3h),7.57(s,1h),7.53(br d,j＝8.1hz,1h),7.24(t,j＝7.8hz,2h),6.86-6.82(m,1h),6.82-6.74(m,1h),4.29-4.18(m,1h),3.05-2.96(m,2h),2.90-2.83(m,2h),2.61-2.55(m,2h),1.28(d,j＝6.5hz,6h),1.19(t,j＝7.4hz,3h)；lc-ms(es+,m/z):343.2[(m+h)+]；rt＝0.684min。步骤3：(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基氨基)吡嗪-2-甲酰胺(130mg，379.63μmol，1当量)、1-甲基咪唑(311.68mg，3.80mmol，302.60μl，10当量)、n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基-l-丙氨酸(115.73mg，569.45μmol，1.5当量)、1-甲基咪唑(311.68mg，3.80mmol，302.60μl，10当量)的dmf(1.5ml)溶液中加入tcfh(159.78mg，569.45μmol，1.5当量)。将混合物在0℃下搅拌4小时。lcms显示反应完成。在25℃下，通过加入水(50ml)淬灭反应混合物，然后用etoac(30ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(20ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至5/1)纯化，得到(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(130mg，204.32μmol，收率：53.82％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.21(s,1h),7.84-7.77(m,1h),7.67(s,1h),7.57-7.51(m,1h),7.35(br d,j＝8.1hz,1h),7.24(br d,j＝2.4hz,1h),7.18(t,j＝7.8hz,1h),6.76(t,j＝8.3hz,2h),4.29-4.23(m,1h),3.32-3.26(m,3h),2.69(s,5h),2.58(q,j＝7.4hz,2h),1.37(br s,9h),1.28-1.17(m,12h),lc-ms(es+,m/z):528.4[(m+h)+]；rt＝0.929min。步骤4：(s)-6-乙基-5-(异丙基氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(130mg，246.37μmol，1当量)、hcl/meoh(4m，61.59μl，1当量)的混合物在16℃下搅拌1小时。lcms显示反应完成。将反应混合物减压浓缩，得到残余物。粗产物用etoac在25℃研磨10分钟，得到(s)-6-乙基-5-(异丙基氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺为黄色固体(100mg，215.39μmol，收率：87.43％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.21(br s,1h),9.24-9.15(m,1h),8.85-8.76(m,1h),8.64(br t,j＝5.4hz,1h),7.58(s,1h),7.45(br d,j＝8.0hz,1h),7.20(t,j＝7.8hz,1h),6.80(br d,j＝7.4hz,2h),4.27(br s,1h),3.74-3.64(m,1h),3.43-3.37(m,1h),2.85-2.67(m,4h),2.59(q,j＝7.4hz,3h),2.42-2.40(m,2h),1.32-1.17(m,12h)；lc-ms(es+,m/z):428.3[(m+h)+]；rt＝0.731min.；lc-ms(es+,m/z):428.3[(m+h)+]；rt＝0.731min。注意：hcl/etoac(4m)：hcl在0℃下鼓泡到etoac溶液中，持续0.5小时，然后称取所得溶液，得到hcl/etoac(4m)。步骤5：(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基氨基)吡嗪-2-甲酰胺向(s)-6-乙基-5-(异丙基氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(100mg，233.90μmol，1当量)的dmf(3ml)溶液中加入bop(124.14mg，280.67μmol，1.2当量)和dipea(302.29mg，2.34mmol，407.40μl，10当量)、(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(36.25mg，280.67μmol，1.2当量)。将混合物在0℃搅拌4小时。lc-ms显示混合物反应完全。在25℃下，通过加入水(50ml)淬灭反应混合物，然后用etoac(30ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(20ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c18150*30mm*5um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：15％-45％，8分钟)纯化，得到所需化合物，得到(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基氨基)吡嗪-2-甲酰胺(13.13mg，23.96μmol，收率：10.24％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.25-11.18(m,1h),9.90(br s,1h),7.92(br t,j＝5.5hz,1h),7.64-7.52(m,2h),7.44-7.37(m,1h),7.25(br s,1h),7.21-7.15(m,1h),6.85-6.73(m,3h),6.66-6.47(m,1h),4.57(q,j＝6.7hz,1h),4.26(qd,j＝6.7,13.6hz,1h),3.93-3.81(m,2h),3.34-3.23(m,2h),2.90(s,2h),2.80-2.74(m,6h),2.73-2.66(m,3h),2.62-2.56(m,2h),1.29-1.16(m,12h)(tfa,盐)；lc-ms(es+,m/z):539.3[(m+h)+]；rt＝2.117min；98.31％纯度；hrms:539.3476。实施例14(化合物213)(s)-5-(二甲基氨基)-6-乙基-3-((3-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-(二甲基氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺向(3-((3-氨基甲酰基-6-(二甲基氨基)-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，933.43μmol，1当量)的meoh(7ml)混合物中加入meoh/hcl(933.43μmol，30ml，1当量)。混合物在16℃搅拌2小时。将粗产物减压浓缩，得到3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-(二甲基氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):329.3[(m+h)+]；rt＝0.646min。注意：hcl/meoh(4m)：hcl在0℃下鼓泡到meoh溶液中，持续0.5小时，然后称重所得溶液，得到hcl/meoh(4m)。步骤2：(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-(二甲基氨基)-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在0℃，向n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基-l-丙氨酸(631.22mg，3.11mmol，1.2当量)、1-甲基咪唑(2.12g，25.88mmol，2.06ml，10当量)、3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-(二甲基氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(850mg，2.59mmol，1当量)的dmf(6ml)混合物中加入tcfh(1.09g，3.88mmol，1.5当量)。将混合物在0℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。将残余物倒入冰水(w/w＝1/1)(200ml)中。水相用乙酸乙酯(100ml*3)萃取。合并的有机相用饱和盐水(100ml*2)洗，经无水na2so4干燥，过滤，真空浓缩。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚：乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到目标化合物(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-(二甲基氨基)-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1g，1.95mmol，收率：91.34％)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):514.4[(m+h)+]；rt＝0.892min。步骤3：(s)-5-(二甲基氨基)-6-乙基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-(二甲基氨基)-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(700mg，1.36mmol，1当量)溶于hcl/meoh(60ml)溶液。混合物在16℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。将粗产物减压浓缩，得到(s)-5-(二甲基氨基)-6-乙基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(700mg，粗品)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):414.3[(m+h)+]；rt＝0.690min。注意：hcl/meoh(4m)：在0℃下，将hcl鼓泡到meoh溶液中，持续0.5小时。然后，称取所得溶液以获得hcl/meoh(4m)。步骤4：(s)-5-(二甲基氨基)-6-乙基-3-((3-(2-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺在冰浴下，将(s)-5-(二甲基氨基)-6-乙基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(700mg，1.69mmol，1当量)溶于dmf(2ml)。所得混合物在0℃下搅拌，加入diea(1.09g，8.46mmol，1.47ml，5当量)，然后加入丙烯酰氯(183.86mg，2.03mmol，165.64μl，1.2当量)。将混合物在0℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。粗制混合物经制备型hplc(色谱柱：waters xbridge beh c18 100*30mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：30％-60％，8分钟)纯化，得到(s)-5-(二甲基氨基)-6-乙基-3-((3-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(150mg,320.81μmol,收率：18.95％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.11(s,1h),8.10-7.82(m,1h),7.75(br d,j＝2.4hz,1h),7.56(s,1h),7.46(br s,2h),7.20(t,j＝7.8hz,1h),6.79(d,j＝7.6hz,1h),6.71(dd,j＝10.3,16.5hz,1h),6.15-6.01(m,1h),5.70-5.58(m,1h),4.56(br s,1h),3.30-3.22(m,2h),3.07(s,6h),2.86(s,2h),2.79-2.67(m,5h),1.27-1.15(m,6h).lc-ms(es+,m/z):468.3[(m+h)+]；rt＝2.535min；hrms:468.2704。实施例15(化合物219)(e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯向(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(1g，2.38mmol，1当量)的dma(10ml)溶液中加入k2co3(1.15g，8.34mmol，3.5当量)、pd(dppf)cl2(1.74g，2.38mmol，1当量)、环丙基硼酸(245.48mg，2.86mmol，1.2当量)。混合物在n2气氛下于100℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。在25℃下，通过加入水(50ml)淬灭反应混合物，将反应混合物倒入饱和edta(50ml)中并搅拌60分钟，然后用etoac(30ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(20ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至5/1)纯化，得到(3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯，为黄色固体(1g，2.04mmol，收率：85.85％，纯度：87％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.06-11.00(m,1h),8.13-8.09(m,1h),7.81(brd,j＝1.5hz,1h),7.41(s,1h),7.26(s,1h),7.21(t,j＝7.8hz,1h),6.81(br d,j＝7.5hz,1h),4.07-3.97(m,1h),3.19-3.12(m,2h),2.92-2.85(m,2h),2.67(br t,j＝7.3hz,2h),2.31-2.23(m,1h),1.35-1.15(m,12h),1.13-1.06(m,4h).lc-ms(es+,m/z):426.2[(m+h)+]；rt＝0.928min。步骤2：3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺盐酸盐向(3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(1g，2.35mmol，1当量)中加入hcl/meoh(4m，25.00ml，42.55当量)。将混合物在16℃搅拌2小时。lcms显示反应完成，将反应混合物减压浓缩，得到3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺盐酸盐，为黄色固体(0.9g，粗品，hcl)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.07(s,1h),8.13(br s,4h),7.88-7.78(m,1h),7.59-7.48(m,1h),7.46-7.40(m,1h),7.33-7.22(m,1h),6.95-6.81(m,1h),3.10-2.99(m,2h),2.96-2.83(m,4h),2.37-2.21(m,1h),1.27(t,j＝7.5hz,3h),1.14-1.03(m,4h)(hcl盐)；lc-ms(es+,m/z):362.2[(m+h)+].rt＝0.711min。注意：hcl/meoh(4m)：hcl气体在0℃下鼓泡进入meoh溶液中，持续0.5小时。步骤3：(e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺向3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(80mg，245.85μmol，1当量)的dmf(0.5ml)溶液中加入diea(317.73mg，2.46mmol，428.21μl，10当量)、(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸(172.29mg，344.18μmol，纯度：40％，1.4当量)，然后加入bop(152.23mg，344.18μmol，1.4当量)。将混合物在0℃搅拌4小时。lcms显示反应完成。通过加入水(50ml)淬灭反应，然后用etoac(30ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(20ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c18 150*30mm*5um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：15％-35％，8分钟)纯化，得到所需化合物(e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(10.37mg，20.43μmol，收率：8.31％，纯度：100％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.05(d,j＝2.3hz,1h),9.69(br d,j＝1.5hz,1h),8.23-7.99(m,2h),7.84-7.78(m,1h),7.50-7.38(m,2h),7.27-7.20(m,1h),6.91-6.67(m,2h),6.63-6.49(m,1h),4.04-3.94(m,2h),3.92-3.79(m,2h),3.31-3.27(m,2h),3.06-3.02(m,2h),2.94-2.87(m,2h),2.80-2.66(m,9h),2.32-2.24(m,1h),1.27(t,j＝7.5hz,3h),1.13-1.04(m,4h),lc-ms(es+,m/z):508.3[(m+h)+].rt＝2.182min.hrms(ei):m/z[m]+实测值:508.3000。实施例16(化合物221)(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯在20℃下，向(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯的dma(10ml)溶液中加入dipea(1.54g，11.91mmol，2.07ml，10当量)和n-甲基乙胺(703.85mg，11.91mmol，1.02ml，10当量)。将混合物在100℃下于密封管中搅拌10小时。lcms显示反应完成。将反应液倒入水(15ml)中，用etoac(20ml*3)萃取。合并有机层，用水(10ml*3)、饱和盐水(10ml*3)洗，干燥(na2so4)，过滤，浓缩，得到粗产物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至1/1)纯化，得到(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(430mg，971.63μmol，收率：81.60％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.12-11.06(m,1h),7.81-7.65(m,1h),7.61-7.52(m,1h),7.49-7.36(m,2h),7.23-7.16(m,1h),6.92-6.83(m,1h),6.78(d,j＝7.4hz,1h),3.52-3.40(m,2h),3.17-3.14(m,2h),3.04(s,3h),2.76-2.64(m,4h),1.38-1.33(m,9h),1.24-1.18(m,6h).lc-ms(es+,m/z):443.3[(m+h)+]；rt＝0.908min。步骤2：3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，903.85μmol，1当量)的hcl/meoh(40ml)混合物在16℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。将反应混合物过滤，减压浓缩，得到3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(410mg，粗品)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.14(s,1h),7.75(br s,4h),7.61-7.55(m,1h),7.52(s,1h),7.50-7.41(m,1h),7.26(t,j＝7.8hz,1h),6.89-6.83(m,1h),4.11(br s,2h),3.46(q,j＝7.0hz,2h),3.04(s,3h),2.88-2.81(m,2h),2.74(q,j＝7.4hz,2h),1.25-1.18(m,6h).lc-ms(es+,m/z):343.1[(m+h)+]；rt＝0.703min。hcl/meoh(4m)：在0℃下，将hcl鼓泡至meoh溶液中，持续0.5小时。步骤3：(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(390mg，1.14mmol，1当量)和n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基-l-丙氨酸(347.19mg，1.71mmol，1.5当量)的dmf(4ml)溶液中加入1-甲基咪唑(935.07mg，11.39mmol，907.84μl，10当量)，然后加入tcfh(479.32mg，1.71mmol，1.5当量)。将混合物在0℃下搅拌3小时。lcms显示反应完成。将反应液倒入水(10ml)中，用etoac(15ml*3)萃取。合并有机层，用水(10ml*3)、饱和盐水(10ml*3)洗，干燥(na2so4)，过滤，浓缩，得到粗产物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至1/1)纯化，得到(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(506mg，958.96μmol，收率：84.20％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝10.95-10.87(m,1h),7.68-7.50(m,2h),7.42-7.34(m,1h),7.31-7.19(m,2h),7.05-6.97(m,1h),6.60(d,j＝7.5hz,1h),4.43-3.99(m,1h),3.27(q,j＝7.0hz,2h),3.12-3.05(m,2h),2.88-2.82(m,3h),2.57-2.53(m,2h),2.32-2.31(m,5h),1.21-1.13(m,9h),1.06-0.98(m,9h).lc-ms(es+,m/z):528.2[(m+h)+]；rt＝0.890min。步骤4：(s)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，568.55μmol，1当量)的hcl/meoh(30ml)混合物在16℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。过滤反应混合物，减压浓缩，得到(s)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(298mg，粗品)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):428.2[(m+h)+]；rt＝0.721min。注意：在0℃下，将hcl鼓泡到meoh溶液中，持续0.5小时。步骤5：(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(131.41mg，1.02mmol，1.5当量)的dmf(2.5ml)溶液中加入dipea(876.63mg，6.78mmol，1.18ml，10当量)、(s)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(290mg，678.30μmol，1当量)和bop(450.00mg，1.02mmol，1.5当量)。将混合物在0℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。过滤反应混合物，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c18 75*30mm*3um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：20％-50％，7分钟)纯化。得到(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(89.46mg，165.14μmol，收率：24.35％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.16-11.05(m,1h),10.10-9.61(m,1h),8.15-7.85(m,1h),7.74(br d,j＝1.9hz,1h),7.59-7.50(m,1h),7.50-7.40(m,2h),7.26-7.16(m,1h),6.87-6.75(m,2h),6.65-6.46(m,1h),5.00-4.54(m,1h),3.91-3.82(m,2h),3.50-3.41(m,2h),3.35-3.24(m,2h),3.04(s,3h),2.89(s,2h),2.80-2.66(m,11h),1.30-1.17(m,9h)(tfa盐).lc-ms(es+,m/z):539.3[(m+h)+]；rt＝2.205min；hrms(ei):m/z[m]+实测值:539.3488。实施例17(化合物224)(s,e)-5-环丙基-6-乙基-3-((3-(2-(2-(n-甲基-4-(甲氨基)丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向1-甲基咪唑(1.51g，18.44mmol，1.47ml，10当量)、n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基-l-丙氨酸(449.68mg，2.21mmol，1.20当量)、3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺盐酸盐(600mg，1.84mmol，1当量)的dmf(5ml)溶液中加入tcfh(620.81mg，2.21mmol，1.2当量)。将混合物在0℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。在25℃下，通过加入水(50ml)淬灭反应混合物，然后用etoac(30ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(20ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至5/1)纯化，得到(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯，为黄色固体(400mg，721.86μmol，收率：39.15％，纯度：92.15％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.05(s,1h),8.14-8.09(m,1h),7.98-7.93(m,1h),7.82-7.80(m,1h),7.42(br s,2h),7.21(t,j＝7.9hz,1h),6.81(d,j＝7.5hz,1h),4.27(br s,1h),4.02(q,j＝7.1hz,2h),2.93-2.88(m,4h),2.71(br s,3h),2.31-2.24(m,1h),1.36-1.16(m,15h),1.10-1.05(m,4h)；lc-ms(es+,m/z):511.4[(m+h)+]；rt＝0.889min。步骤2：(s,e)-(4-((1-((3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基)-4-氧代丁-2-烯-1-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向(s)-5-环丙基-6-乙基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺盐酸盐(300mg，671.18μmol，1当量，hcl)和(e)-4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)丁-2-烯酸(175.36mg，814.70μmol，1.21当量)的dmf(3ml)溶液中加入diea(433.73mg，3.36mmol，584.54μl，5当量)，然后加入bop(296.85mg，671.18μmol，1当量)。将混合物在0℃下搅拌2小时。lc-ms显示反应完成。通过加入水(100ml)淬灭反应混合物，然后用etoac(50ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(30ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经制备型tlc(sio2，pe：etoac＝0:1)纯化，得到(s,e)-(4-((1-((3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基)-4-氧代丁-2-烯-1-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯，为黄色胶状物(200mg，329.09μmol，收率：49.03％)。lc-ms(es+,m/z):608.5[(m+h)+].rt＝0.894min。步骤2：(s,e)-5-环丙基-6-乙基-3-((3-(2-(2-(n-甲基-4-(甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺向(s,e)-(4-((1-((3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基)-4-氧代丁-2-烯-1-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(200mg，329.09μmol，1当量)的溶液中加入hcl/meoh(4m，82.27μl，1当量)。将混合物在16℃下搅拌2小时。lc-ms显示反应完成。将反应混合物减压浓缩，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c18150*30mm*5um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：15％-45％，8分钟)纯化，得到化合物(s,e)-5-环丙基-6-乙基-3-((3-(2-(2-(n-甲基-4-(甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(60.74mg，97.33μmol，收率：29.57％，纯度：99.61％，tfa)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.04(s,1h),8.81(br s,2h),8.22-7.87(m,2h),7.86-7.77(m,1h),7.49-7.37(m,2h),7.21(br t,j＝7.7hz,1h),6.85-6.70(m,2h),6.64-6.46(m,1h),5.01-4.55(m,1h),3.80-3.66(m,2h),3.37(br s,2h),2.96-2.84(m,4h),2.77-2.65(m,3h),2.63-2.53(m,3h),2.34-2.23(m,1h),1.31-1.19(m,6h),1.14-1.03(m,4h)(tfa盐).lc-ms(es+,m/z):508.3[(m+h)+].rt＝2.202min；注意：hcl/meoh(4m)：在0℃下，将hcl气体鼓泡至meoh溶液中，持续0.5小时。实施例18(化合物226)(e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸叔丁酯向(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(1.52g，9.17mmol，2当量，hcl)的dmf(5ml)溶液中加入dipea(5.93g，45.85mmol，7.99ml，10当量)、甲基甘氨酸叔丁酯(1.00g，4.58mmol，1当量，hcl)、hobt(619.49mg，4.58mmol，1当量)和edci(1.32g，6.88mmol，1.5当量)。将混合物在25℃搅拌10小时。lcms显示反应完成。将反应混合物过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：c18(250*50mm*10um)；流动相：[水(nh4 hco3)-acn]；b％：15％-40％，10分钟)纯化，得到(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸叔丁酯(540mg，2.1mmol，收率：45.95％)，为棕色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝6.68-6.34(m,2h),4.23-3.95(m,2h),3.11-2.84(m,5h),2.18-2.07(m,6h),1.45-1.37(m,9h).lc-ms(es+,m/z):257.1[(m+h)+]；rt＝1.329min。步骤2：(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸向(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸叔丁酯(270mg，1.05mmol，1当量)的dcm(2ml)溶液中加入tfa(3.08g，27.01mmol，2ml，25.65当量)。混合物在16℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。将反应混合物减压浓缩，得到(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸(466mg，粗品)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝9.97(br d,j＝17.4hz,1h),6.97-6.48(m,2h),4.28-4.02(m,2h),3.95-3.82(m,2h),3.10(s,3h),2.76(br d,j＝13.4hz,6h).lc-ms(es+,m/z):201.1[(m+h)+]；rt＝0.089min。步骤3：(e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺向(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸(200.66mg，400.84μmol，纯度：40％，1.5当量)的dmf(1ml)溶液中加入dipea(345.37mg，2.67mmol，465.46μl，10当量)、3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺(80mg，267.23μmol，1当量)，然后加入bop(177.28mg，400.84μmol，1.5当量)。混合物在16℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。将反应混合物过滤，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：c18-1150*30mm*5um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：5％-50％，8分钟)纯化，得到(e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺(84.28mg，174.48μmol，收率：65.29％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.09-11.04(m,1h),9.84-9.67(m,1h),8.21(br s,2h),7.89-7.83(m,1h),7.72-7.63(m,1h),7.47-7.41(m,1h),7.27-7.21(m,1h),6.91-6.68(m,2h),6.63-6.48(m,1h),4.03-3.95(m,2h),3.91-3.81(m,2h),3.36-3.29(m,2h),3.04(s,2h),2.80-2.70(m,11h),2.50-2.47(m,3h),1.26-1.21(m,3h)(tfa盐).lc-ms(es+,m/z):482.3[(m+h)+]；rt＝2.056min.hrms(ei):m/z[m+h]+:482.2882。实施例19(化合物227)(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s,e)-(4-((1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基)-4-氧代丁-2-烯-1-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向(e)-4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)丁-2-烯酸(279.92mg，1.30mmol，2当量)的dmf(3ml)溶液中加入dipea(840.39mg，6.50mmol，1.13ml，10当量)、(s)-6-乙基-5-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(250mg，650.24μmol，1当量)，然后加入bop(431.38mg，975.36μmol，1.5当量)。将混合物在0℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。将反应液倒入水(5ml)中，用etoac(10ml*3)萃取。合并有机层，用水(10ml*3)、饱和盐水(10ml*3)洗，干燥(na2so4)，过滤，浓缩，得到粗产物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至1/1)纯化，得到(s,e)-(4-((1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基)-4-氧代丁-2-烯-1-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，515.73μmol，收率：79.31％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):582.3[(m+h)+]；rt＝0.782min。步骤2：(s,e)-6-乙基-5-甲基-3-((3-(2-(2-(n-甲基-4-(甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(s,e)-(4-((1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基)-4-氧代丁-2-烯-1-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(280mg，481.34μmol，1当量)的hcl/meoh(30ml)混合物在0℃搅拌4小时。lcms显示反应完成。将反应混合物过滤，得到残余物。残余物经制备型hplc(柱：phenomenex luna c18 75*30mm*3um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：15％-45％，7分钟)纯化，得到(s,e)-6-乙基-5-甲基-3-((3-(2-(2-(n-甲基-4-(甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(96.08mg，196.89μmol，收率：40.90％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.08-11.04(m,1h),8.73-8.52(m,2h),8.19-8.12(m,1h),8.10-7.90(m,1h),7.89-7.83(m,1h),7.69-7.64(m,1h),7.46-7.41(m,1h),7.28-7.19(m,1h),6.85-6.79(m,1h),6.79-6.69(m,1h),6.63-6.45(m,1h),5.01-4.53(m,1h),3.77-3.67(m,2h),3.32-3.26(m,2h),2.93-2.87(m,2h),2.77-2.67(m,5h),2.59-2.54(m,3h),2.49-2.47(m,3h),1.30-1.18(m,6h).lc-ms(es+,m/z):482.3[(m+h)+]；rt＝2.084min；hrms(ei):m/z[m]+实测值:482.2899。注意：在0℃下，将hcl鼓泡到meoh溶液中，持续0.5小时。实施例20(化合物228)(s,e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s,e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺在0℃，向(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(573.80mg，3.46mmol，1.5当量，hcl)的dmf(8ml)混合物中加入dipea(2.99g，23.10mmol，10当量)、(s)-5-环丙基-6-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(1g，2.31mmol，1当量，hcl)，然后加入bop(1.53g，3.46mmol，1.5当量)。混合物在0℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。将混合物浓缩至干燥。混合物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c18 250*50mm*10μm；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：20％-50％，10分钟)纯化，得到(s,e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(320mg，622.44μmol，收率：26.95％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.05(s,1h),9.70(br s,1h),8.20(br s,1h),8.11-7.88(m,1h),7.80(br s,1h),7.54-7.36(m,2h),7.22(br t,j＝7.8hz,1h),6.81(q,j＝8.0hz,2h),6.66-6.45(m,1h),5.05-4.51(m,1h),3.98-3.80(m,2h),3.45-3.28(m,2h),2.90(s,2h),2.81-2.66(m,9h),2.56(s,3h),2.30-2.20(m,1h),1.33-1.18(m,3h),1.14-1.01(m,4h)(tfa,盐)；lcms(es+,m/z):508.2[(m+h)+]；rt＝2.117min；hrms(ei):m/z[m]+实测值:508.3014。实施例21(化合物230)(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(二甲基氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-溴-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(二甲基氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺在0℃、n2下，向(e)-4-溴丁-2-烯酸(45.43mg，275.35μmol，1.1当量)的dmf(1ml)混合物中加入dipea(323.52mg，2.50mmol，10当量)和(s)-5-(二甲基氨基)-6-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(100mg，250.32μmol，1当量)，最后一次性加入bop(166.07mg，375.48μmol，1.5当量)。混合物在0℃下搅拌1小时。lcms显示反应完成。将残余物倒入水(20ml)中。水相用乙酸乙酯(20ml*3)萃取。合并的有机相用饱和盐水(20ml)洗，经无水na2so4干燥，过滤，真空浓缩。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚：乙酸乙酯＝0：1)纯化。得到化合物(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-溴-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(二甲氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(100mg，183.00μmol，收率：73.11％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):546.3[(m+h)+].rt＝0.804min。步骤2：(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(二甲基氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺在25℃、n2下，向氮杂环丁烷盐酸盐(18.83mg，201.30μmol，1.1当量)的dma(2ml)混合物中加入nai(82.29mg，548.99μmol，3当量)和dipea(236.51mg，1.83mmol，10当量)，最后一次性加入(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-溴-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(二甲基氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(100mg，183.00μmol，1当量)。将混合物在25℃下搅拌12小时。lcms显示反应完成。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex c18 80*30mm*3um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：15％-45％，7分钟)纯化。得到化合物(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(二甲基氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(10.27mg，19.65μmol，收率：10.74％)，为黄色固体。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.15-11.09(m,1h),10.03-9.91(m,1h),8.11-7.90(m,1h),7.83-7.77(m,1h),7.54(s,1h),7.51-7.41(m,2h),7.24-7.17(m,1h),6.81-6.76(m,1h),6.75-6.68(m,1h),6.51-6.33(m,1h),4.95-4.57(m,1h),4.18-4.10(m,2h),4.03-3.89(m,4h),3.28(td,j＝6.6,13.3hz,2h),3.10(s,6h),2.89(s,2h),2.74-2.64(m,3h),2.47(s,3h),2.42-2.30(m,2h),1.29-1.19(m,3h)(tfa盐).lc-ms(es+,m/z):523.3[(m+h)+].rt＝2.046min；hrms(ei):m/z[m]+实测值:523.3141。实施例22(化合物232)(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺向(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(1.49g，11.51mmol，1.2当量)的dmf(40ml)溶液中加入diea(12.39g，95.90mmol，16.70ml，10当量)、(s)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(4.1g，9.59mmol，1当量)，然后加入bop(5.09g，11.51mmol，1.2当量)。将混合物在0℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。通过加入水(120ml)淬灭反应混合物，然后用etoac(90ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(100ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经柱色谱法(sio2，dcm/meoh＝30/1至5/1)纯化，得到(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(96.13mg，198.40μmol，收率：32.58％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.11(s,1h),8.07(br s,1h),7.81-7.77(m,1h),7.55-7.51(m,1h),7.46-7.41(m,2h),7.22-7.16(m,1h),6.80-6.75(m,1h),6.62-6.49(m,2h),5.02-4.94(m,1h),4.34(quin,j＝6.6hz,1h),3.32-3.24(m,2h),3.16-3.08(m,2h),2.91-2.88(m,3h),2.86-2.83(m,2h),2.67(brs,3h),2.44(s,3h),2.24-2.20(m,6h),1.24-1.16(m,9h).lc-ms(es+,m/z):539.4[(m+h)+]；rt＝2.178min；hrms(ei):m/z[m]+实测值:539.3435。实施例23(化合物233)(s,e)-5-(二甲基氨基)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(e)-1-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)环丁烷-1-羧酸在0℃、n2下，向(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(41.46mg，250.32μmol，1当量)的dmf(1ml)混合物中加入dipea(323.51mg，2.50mmol，10当量)和(s)-5-(二甲基氨基)-6-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(100mg，250.32μmol，1当量)，最后一次性加入bop(166.07mg，375.48μmol，1.5当量)。混合物在0℃搅拌1小时。lcms显示反应完成。将残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex c1880*30mm*3um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：10％-40％，7分钟)纯化，得到化合物(s,e)-5-(二甲基氨基)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(10.43mg，20.43μmol，收率：8.16％)，为白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.15-11.10(m,1h),9.81-9.69(m,1h),8.12-7.90(m,1h),7.83-7.79(m,1h),7.55-7.53(m,1h),7.51-7.41(m,2h),7.20(br t,j＝7.7hz,1h),6.86-6.75(m,2h),6.63-6.45(m,1h),5.02-4.50(m,1h),3.91-3.80(m,2h),3.35-3.24(m,2h),3.12-3.09(m,6h),2.89(s,2h),2.80-2.75(m,6h),2.72-2.65(m,3h),2.47(s,3h),1.31-1.18(m,3h)(tfa盐).lc-ms(es+,m/z):511.3[(m+h)+].rt＝2.031min；hrms(ei):m/z[m]+实测值:511.3134。实施例24(化合物241)(e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺在16℃下，向(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸(500.00mg，636.42μmol，纯度：40％，9.91e-1当量，tfa)的dmf(3ml)溶液中加入dipea(830.13mg，6.42mmol，1.12ml，10当量)、3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(200mg，642.30μmol，1当量)和bop(426.12mg，963.45μmol，1.5当量)。将混合物在16℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。过滤反应混合物，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex c1880*30mm*3um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：10％-40％，8min)纯化，得到(e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(121.59mg，185.02μmol，收率：28.81％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.13-10.99(m,1h),9.80-9.61(m,1h),8.03(br t,j＝5.6hz,2h),7.83-7.76(m,1h),7.49-7.39(m,2h),7.27-7.18(m,1h),6.91-6.68(m,2h),6.63-6.49(m,1h),4.03-3.81(m,4h),3.37-3.33(m,2h),3.05-3.03(m,1.5h),2.81-2.70(m,9.5h),2.57-2.55(m,3h),2.28-2.21(m,1h),1.13-1.05(m,4h)(tfa盐).lc-ms(es+,m/z):494.3[(m+h)+]；rt＝2.088min；hrms(ei):m/z[m]+实测值:494.2855。实施例25(化合物242)(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺在20℃下，向氮杂环丁烷盐酸盐(28.40mg，303.61μmol，1.1当量)、nai(124.12mg，828.04μmol，3当量)、dipea(356.73mg，2.76mmol，480.76μl，10当量)的dma(1ml)溶液中加入(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-溴-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(150mg，276.01μmol，1当量)。将混合物在20℃搅拌12小时。lcms显示反应完成。过滤混合物，得到残余物。粗产物经制备型hplc(色谱柱：waters xbridgebeh c18100*30mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：30％)纯化，得到(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(5.85mg，11.26μmol，收率：4.08％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.13-10.98(m,1h),8.24-8.12(m,1h),8.10-7.72(m,2h),7.49-7.35(m,2h),7.26-7.17(m,1h),6.84-6.78(m,1h),6.60-6.28(m,2h),5.02-4.46(m,1h),3.32-3.03(m,8h),2.85-2.64(m,5h),2.56(s,3h),2.28-2.21(m,1h),2.05-1.77(m,2h),1.17(br d,j＝7.2hz,3h),1.14-1.04(m,4h)；lc-ms(es+,m/z):520.3[(m+h)+].rt＝2.132min；hrms(ei):m/z[m]+实测值:520.3032。实施例26(化合物243)(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺在0℃、n2下，向(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(91.43mg，552.07μmol，1.1当量，hcl)的dmf(0.5ml)混合物中加入diea(648.65mg，5.02mmol，874.19μl，10当量)和(s)-5,6-二乙基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基苯基氨基)吡嗪-2-甲酰胺(200mg，501.88μmol，1当量)，然后一次性地加入bop(332.96mg，752.82μmol，1.5当量)。混合物在0℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。将残余物倒入水(10ml)中，然后用乙酸乙酯(20ml*3)萃取。合并的有机相用饱和盐水(20ml*2)洗，经无水na2so4干燥，过滤，真空浓缩。残余物经制备型hplc(tfa条件)(色谱柱：phenomenex luna c18150*30mm*5um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：20％-50％,8分钟)纯化，得到目标化合物(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺(26.08mg，51.02μmol，收率：10.16％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.22-10.90(m,1h),9.76-9.52(m,1h),8.22-8.10(m,1h),7.92(br t,j＝5.6hz,1h),7.90-7.80(m,1h),7.66-7.59(m,1h),7.52(s,1h),7.28-7.18(m,1h),6.90-6.73(m,2h),6.66-6.42(m,1h),5.07-4.44(m,1h),3.93-3.77(m,2h),3.32-3.27(m,2h),2.90(s,2h),2.88-2.82(m,2h),2.81-2.69(m,11h),1.33-1.21(m,9h)(tfa盐).1h nmr(400mhz,d2o)δ＝7.56-7.44(m,1h),7.32-7.24(m,1h),7.24-7.08(m,1h),6.86(br d,j＝7.2hz,1h),6.80-6.55(m,1h),6.54(br s,1h),4.84(br d,j＝7.3hz,1h),3.86-3.67(m,2h),3.54-3.33(m,2h),2.84-2.63(m,15h),1.35-1.16(m,9h).lc-ms(es+,m/z):510.4[(m+h)+]；rt＝2.199min.hrms(ei):m/z[m]+实测值:510.3169。实施例271(化合物244)(s)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-炔酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-炔酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺在0℃，向4-(二甲基氨基)丁-2-炔酸(148.81mg，1.17mmol，3当量)(150mg，390.14μmol，1当量)的dmf(3ml)溶液中加入diea(504.23mg，3.90mmol，679.56μl，10当量)、(s)-6-乙基-5-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺，然后在0℃下加入bop(517.66mg，1.17mmol，3当量)。将混合物在0℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。通过加入水(50ml)淬灭反应混合物，然后用etoac(30ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(20ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex lunac18 150*30mm*5um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：15％-45％，8分钟)纯化，得到(s)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-炔酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺，为黄色固体(96.13mg，198.40μmol，收率：32.58％，纯度：98.36％)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.11-11.01(m,1h),8.05(br t,j＝5.6hz,2h),7.90-7.81(m,1h),7.71-7.63(m,1h),7.47-7.41(m,1h),7.26-7.19(m,1h),6.85-6.80(m,1h),4.89-4.78(m,1h),4.44-4.24(m,2h),3.40-3.24(m,2h),3.08-3.06(m,2h),2.87-2.68(m,10h),2.77-2.66(m,1h),2.50(br s,3h),1.36-1.20(m,6h).lc-ms(es+,m/z):494.3[(m+h)+]；rt＝2.122min；hrms(ei):m/z[m+h]+:494.2875。实施例28(化合物246)(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(双(甲基-d3)氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(双(甲基-d3)氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺在0℃，将苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)-磷鎓六氟磷酸盐(429mg，0.970mmol，3当量)的n,n-二甲基甲酰胺(1ml)溶液加至(e)-4-[双(三氘代甲基)氨基]丁-2-烯酸盐酸盐(290mg，0.970mmol，3当量)与作为杂质的氯化锂、(s)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺盐酸盐(150mg，0.323mmol，1当量)和n,n-二异丙基乙胺(0.45ml，2.59mmol，8当量)的n,n-二甲基甲酰胺(0.5ml)混合物中。1小时后，将反应物用乙酸乙酯(20ml)稀释，并在0℃用饱和碳酸氢钠(10ml)淬灭。有机相用5％氯化锂(3*10ml)和盐水(10ml)洗。有机相经硫酸钠干燥，减压除去溶剂。将残余物进行快速色谱法(0-40％甲醇/二氯甲烷)。合并含有产物的干净级分，减压除去溶剂。将残余物与乙腈(10ml)共蒸发。将残余物吸收在乙腈(10ml)和水(10ml)中，并进行冻干，得到(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(双(甲基-d3)氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(61mg，0.112mmol，收率：34.53％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.12(s,1h),7.85(s,1h),7.75(s,1h),7.55(s,1h),7.51–7.42(m,2h),7.21(t,j＝7.9hz,1h),6.80(d,j＝7.5hz,1h),6.65–6.57(m,1h),6.56–6.41(m,1h),4.99(m,1h),3.47(q,j＝7.2hz,2h),3.33–3.20(m,2h),3.05(s,3h),3.03–2.93(m,2h),2.85(s,2h),2.80–2.65(m,5h),1.31–1.14(m,9h).lc-ms(es+,m/z):545.3[(m+h)+]；rt＝3.818min。实施例29(化合物247)(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(双(甲基-d3)氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(双(甲基-d3)氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺在0℃搅拌下，向5-[异丙基(甲基)氨基]-6-甲基-3-[3-[2-[[(2s)-2-(甲基氨基)丙酰基]氨基]乙基]苯胺基]吡嗪-2-甲酰胺；甲烷；盐酸盐(120mg，0.25mmol，1当量)和(e)-4-[双(三氘代甲基)氨基]丁-2-烯酸(135mg，1.002，4.0当量)的dmf(0.25ml)溶液中加入dipea(194mg，1.5mmol，0.26ml，5当量)，随后加入hobt(444mg，1.002mmol，4.0当量)。悬浮液澄清，然后变为深棕色。将反应物在相同温度下搅拌3小时。lcms显示反应未完成。在0℃下加入乙酸乙酯(10ml)。合并的有机层用碳酸氢钠(饱和)洗2次，然后用盐水洗2次。合并的有机层经硫酸钠干燥。浓缩溶剂，得到黄色固体(170mg)。将混合物使用24g硅胶正相柱(silicagel normal phase column)纯化，在30分钟内使用从dcm调整至含10％甲醇的dcm进行洗脱。收集产物，浓缩，冻干，得到(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(双(甲基-d3)氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(29mg，0.0532mmol，收率：21.2％)，为灰白色固体。1h nmr(400mhz,dmso)δ11.12(s,1h),7.92(s,1h),7.81(s,1h),7.61–7.35(m,3h),7.22(t,j＝7.7hz,1h),6.88–6.70(m,2h),6.70–6.40(m,1h),4.99(d,j＝7.5hz,1h),4.48–4.23(m,1h),3.66(s,1h),2.90(d,j＝6.1hz,6h),2.71(s,4h),2.45(d,j＝2.2hz,4h),1.43–0.99(m,11h).lc-ms(es+,m/z):545.3[(m+h)+]；rt＝3.906min。实施例30(化合物248)(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二(甲基-d3)氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二(甲基-d3)氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺向(e)-4-[双(三氘代甲基)氨基]丁-2-烯酸；氯化锂；盐酸盐(248.49mg，831.5μmol，3.0当量)的dmf(0.7ml)浆液中加入diea(358.21mg，2.77mmol，0.48ml，10当量)和(s)-5-环丙基-6-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(120mg，277.17μmol，1当量)，然后加入bop(367.76mg，831.5μmol，3当量)的0.8ml dmf溶液。混合物在0℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。将反应混合物浓缩，残余物经硅胶柱纯化，得到(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(双(甲基-d3)氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(35mg，66.8μmol，收率：24.09％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ10.71(s,1h),7.85(s,1h),7.49(m,2h),7.20(m,1h),6.87-6.80(m,2h),6.41m,2h),5.94(s,1h),5.18(m,1h),3.63(m,1h),3.45(m,1h),3.20–3.09(m,2h),2.87(s,3h),2.79(m,2h),2.56(m,3h),2.11(m,1h),1.35 -01.32(m,3h),1.20(m,2h),1.11(m,2h).lc-ms(es+,m/z):514.3[(m+h)+]；rt＝3.790min。实施例31(化合物249)(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二(甲基-d3)氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二(甲基-d3)氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺向(e)-4-[双(三氘代甲基)氨基]丁-2-烯酸(1.50当量，164mg，0.631mmol)和n,n-二异丙基乙胺(10.0当量，0.73ml，4.20mmol)的dmf(0.75ml)混合物中加入6-乙基-5-[异丙基(甲基)氨基]-3-[3-[2-[[(2s)-2-(甲基氨基)丙酰基]氨基]乙基]苯胺基]吡嗪-2-甲酰胺盐酸盐(1.00当量，201mg，0.420mmol)。在n2下，将混合物冷却至0℃，滴加bop(1.50当量，279mg，0.631mmol)的dmf(0.75ml)溶液。反应在0℃下搅拌2小时。反应混合物用etoac(30ml)和nahco3(水溶液)(10ml)稀释，用nahco3(水溶液)(1x)、水(2x)和盐水(1x)洗。分离有机层，经na2so4干燥、过滤，浓缩。粗产物经硅胶柱纯化，用0-10％ meoh/dcm洗脱，得到(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二(甲基-d3)氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(61mg，0.109mmol，收率：25.96％)，为灰白色固体。1h nmr(400mhz,cd3od)δ10.66(s,1h),7.49(d,j＝10.9hz,1h),7.40(d,j＝8.2hz,1h),7.10(t,j＝7.9hz,1h),6.74(d,j＝7.6hz,1h),6.70–6.52(m,1h),6.40(dd,j＝25.3,15.1hz,1h),4.96(q,j＝7.0hz,1h),4.24(p,j＝6.8hz,1h),3.35(ddd,j＝42.2,13.3,6.3hz,2h),3.08–2.95(m,2h),2.88–2.76(m,5h),2.68(dt,j＝14.8,6.4hz,5h),1.39–1.07(m,12h).lc-ms(es+,m/z):559.4[(m+h)+]；rt＝3.992min。实施例32(化合物250)(e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺向(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸(248.82mg，395.88μmol，1.5当量，tfa)、bop(175.09mg，395.88μmol，1.5当量)的dmf(0.5ml)溶液中加入3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(100mg，263.92μmol，1当量，hcl)的dmf(0.5ml)溶液，然后加入dipea(341.09mg，2.64mmol，10当量)，将混合物在0℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex lunac18 150*30mm*5um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：10％-40％，8分钟)纯化，得到(e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(10.95mg，20.87μmol，收率：7.91％，纯度：100％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.11(d,j＝1.5hz,1h),8.24-7.99(m,1h),7.79(br s,1h),7.56-7.37(m,3h),7.21(dt,j＝3.2,7.7hz,1h),6.92-6.67(m,2h),6.64-6.48(m,1h),4.34(td,j＝6.6,13.2hz,1h),4.03-3.94(m,2h),3.93-3.82(m,2h),3.37-3.25(m,2h),3.04(s,1.5h),2.89(s,3h),2.82-2.77(m,4.5h),2.76-2.66(m,5h),2.44(s,3h),1.20(d,j＝6.6hz,6h).lc-ms(es+,m/z):525.3[(m+h)+]；rt＝2.170min.hrms:525.3257.sfc:100％。中间体4d(s)-5-(乙基(甲基)氨基)-6-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(3-((3-氨基甲酰基-6-(乙基(甲基)氨基)-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯在20℃下，向(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯、n-甲基乙胺(1.17g，19.71mmol，1.69ml，8当量)的dma(10ml)溶液中加入dipea(3.18g，24.64mmol，4.29ml，10当量)。将混合物在100℃下搅拌10小时。lc-ms显示检测到所需化合物。将反应混合物倒入水(50ml)中，然后用etoac(30ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(30ml*1)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝1/1至0/1)纯化，得到目标化合物(3-((3-氨基甲酰基-6-(乙基(甲基)氨基)-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(900mg，2.10mmol，收率：85.24％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):429.3[(m+h)+]；rt＝0.906min。步骤2：3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-(乙基(甲基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺将(3-((3-氨基甲酰基-6-(乙基(甲基)氨基)-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(900mg，1.94mmol，1当量，hcl)溶于hcl/meoh(4m，4.8ml，10当量)溶液，混合物于14℃下搅拌2小时。tlc显示反应完成。将反应混合物减压浓缩，得到残余物。得到目标化合物3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-(乙基(甲基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(750mg，2.06mmol，粗品)，为黄色固体。步骤3：(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-(乙基(甲基)氨基)-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯向3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-(乙基(甲基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(750mg，2.06mmol，1当量，hcl)、n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基-l-丙氨酸(459.53mg，2.26mmol，1.1当量)的dmf(3ml)溶液中加入bop(1.36g，3.08mmol，1.5当量)和dipea(2.66g，20.56mmol，3.58ml，10当量)。混合物在0℃搅拌2小时。lc-ms显示检测到所需化合物。将反应混合物倒入水(30ml)中，然后用ea(3*30ml)萃取。合并的有机层用饱和盐水(1*30ml)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝1/1至0/1)纯化。得到少量化合物(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-(乙基(甲基)氨基)-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(800mg，1.56mmol，收率：75.77％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):514.3[(m+h)+]；rt＝0.881min。步骤4：(s)-5-(乙基(甲基)氨基)-6-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺向(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-6-(乙基(甲基)氨基)-5-甲基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(800mg，1.56mmol，1当量)的溶液中加入hcl/meoh(4m，389.38μl，1当量)。混合物在14℃搅拌1小时。tlc显示反应完成。将反应混合物减压浓缩，得到残余物。得到目标化合物(s)-5-(乙基(甲基)氨基)-6-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(700mg，粗品)，为黄色固体。实施例33(化合物252)(e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺在16℃下，向3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(100mg，292.02μmol，1当量)、(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸(175.42mg，438.04μmol，纯度：50％，1.5当量)、bop(193.74mg，438.04μmol，1.5当量)的dmf(1ml)溶液中加入dipea(377.42mg，2.92mmol，508.65μl，10当量)。将混合物在16℃搅拌1小时。lcms显示反应完成。过滤混合物，得到残余物。粗产物经制备型hplc(柱：phenomenex luna 80*30mm*3um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：15％-45％，8分钟)纯化，得到(e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(11.6mg，22.10μmol，收率：7.57％，纯度：99.94％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.17-11.06(m,1h),9.90-9.63(m,1h),8.23-8.00(m,1h),7.75(br s,1h),7.59-7.42(m,3h),7.26-7.18(m,1h),6.92-6.68(m,2h),6.65-6.49(m,1h),4.04-3.95(m,2h),3.93-3.81(m,2h),3.46(q,j＝7.0hz,2h),3.36-3.26(m,2h),3.04(s,4h),2.82-2.67(m,12h),1.26-1.17(m,6h)；lc-ms(es+,m/z):525.3[(m+h)+].rt＝2.177min；hrms(ei):m/z[m]+实测值:525.3267。实施例34(化合物253)(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(乙基(甲基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(乙基(甲基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺向(s)-5-(乙基(甲基)氨基)-6-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(130mg，314.38μmol，1当量)、(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(57.27mg，345.82μmol，1.1当量，hcl)的dmf(1ml)溶液中加入bop(208.56mg，471.57μmol，1.5当量)和diea(406.30mg，3.14mmol，547.58μl，10当量)。将混合物在0℃搅拌2小时。lc-ms、hplc显示检测到所需化合物，将反应混合物倒入水(30ml)中，然后用etoac(30ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(30ml*1)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经制备型hplc(tfa条件；色谱柱：phenomenex luna c18 150*30mm*5um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：10％-40％，8分钟)纯化，得到目标化合物(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(乙基(甲基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(10.3mg，19.59μmol，收率：6.23％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.13-11.09(m,1h),8.11-7.89(m,1h),7.79(br d,j＝2.0hz,1h),7.52(br s,1h),7.49-7.43(m,1h),7.40(br s,1h),7.23-7.17(m,1h),6.85-6.76(m,2h),6.64-6.47(m,1h),4.59(br s,1h),5.00-4.52(m,1h),3.92-3.80(m,2h),3.50(q,j＝7.0hz,2h),3.36-3.24(m,2h),3.08(s,3h),2.89(s,2h),2.80-2.74(m,6h),2.73-2.66(m,3h),2.47(s,3h),1.29(s,1h),1.28(s,1h),1.31-1.17(m,4h).lc-ms(es+,m/z):525.33[(m+h)+]；rt＝2.131min.hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:525.3257.sfc:97.58％。实施例35(化合物254)(s,e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)-5-氟苯基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s,e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)-5-氟苯基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺在0℃、n2下，向(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(35.16mg，212.32μmol，1.1当量，hcl)的dmf(1ml)混合物中，一次性加入dipea(249.46mg，1.93mmol，336.20μl，10当量)和(s)-5-环丙基-3-((3-氟-5-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(80mg，193.02μmol，1当量)和bop(128.05mg，289.52μmol，1.5当量)。将混合物在0℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。将残余物倒入水(20ml)中，水相用乙酸乙酯(100ml*3)萃取，合并的有机相用盐水(10ml*3)洗，经无水na2so4干燥，过滤，真空浓缩。残余物经制备型hplc(tfa条件；色谱柱：phenomenex luna c18150*30mm*5um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：30％-50％，8分钟)纯化，得到目标化合物(s,e)-5-环丙基-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)-5-氟苯基)氨基)-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(11.17mg，21.09μmol，收率：10.93％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.27-11.19(m,1h),9.73-9.64(m,1h),8.26-8.21(m,1h),8.09-7.89(m,1h),7.84(br s,1h),7.63-7.55(m,1h),7.01-6.97(m,1h),6.84-6.76(m,1h),6.64-6.47(m,2h),5.01-4.52(m,1h),3.95-3.81(m,2h),3.32-3.26(m,2h),2.88(s,2h),2.78-2.74(m,6h),2.72-2.66(m,3h),2.56(s,3h),2.30-2.24(m,1h),1.28-1.19(m,3h),1.15(br s,2h),1.07-1.03(m,2h).1h nmr(400mhz,d2o)δ＝7.00(br d,j＝11.9hz,1h),6.79-6.60(m,2h),6.59-6.44(m,1h),6.35(br d,j＝8.9hz,1h),4.90-4.54(m,1h),3.86-3.73(m,2h),3.46-3.28(m,2h),2.85-2.79(m,8h),2.72-2.53(m,3h),2.29(br s,3h),2.00-1.87(m,1h),1.34-1.20(m,3h),0.97(br s,2h),0.79(br s,2h).lc-ms(es+,m/z):526.3[(m+h)+]；rt＝2.202min.hrms(ei):m/z[m]+实测值:526.2921。实施例36(化合物302)(r,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤3：(r,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(260.85mg，1.58mmol，1.5当量，hcl)、dipea(1.36g，10.50mmol，1.83ml，10当量)的dmf(3ml)溶液中加入(r)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(500.00mg，1.05mmol，1当量，hcl)的dmf(3ml)溶液，然后在0℃下加入bop(696.59mg，1.58mmol，1.5当量)，将混合物在0℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c18 250*50mm*10μm；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：25％-55％，10分钟)纯化，得到(r,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(109.07mg，193.18μmol，收率：18.75％，纯度：99.75％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.10(s,1h),8.12-7.88(m,1h),7.76(br d,j＝2.0hz,1h),7.56-7.42(m,3h),7.21(br t,j＝7.8hz,1h),6.87-6.74(m,2h),6.67-6.45(m,1h),5.02-4.53(m,1h),4.25(四重峰,j＝6.7,13.2hz,1h),3.94-3.81(m,2h),3.36-3.23(m,2h),2.94-2.84(m,5h),2.82-2.65(m,11h),1.31-1.14(m,12h).lc-ms(es+,m/z):553.3[(m+h)+]；rt＝2.293min；hrms:553.3621.sfc:100％。实施例37(化合物303)(s,e)-6-乙基-5-(异丙基氨基)-3-((3-(2-(2-(n-甲基-4-(甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s,e)-(4-((1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基)-4-氧代丁-2-烯-1-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向(e)-4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)丁-2-烯酸(194.83mg，905.17μmol，1.2当量)的dmf(3ml)溶液中加入dipea(974.89mg，7.54mmol，10当量)和(s)-6-乙基-5-(异丙基氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(350mg，754.31μmol，1当量，hcl)，然后加入bop(500.42mg，1.13mmol，1.5当量)。将混合物在0℃下搅拌1.5小时。lcms显示反应完成。将混合物倒入水(20ml)中，用etoac(10ml*2)萃取。有机层用水(10ml*2)、饱和盐水(10ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经硅胶色谱法(dcm/meoh＝10:1)纯化，得到(s,e)-(4-((1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基)-4-氧代丁-2-烯-1-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(437.5mg，700.26μmol，收率：92.83％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.30-11.25(m,1h),8.16-7.88(m,1h),7.73(brs,1h),7.65-7.56(m,1h),7.47-7.40(m,1h),7.35-7.19(m,2h),6.87-6.76(m,2h),6.65-6.36(m,2h),5.09-4.54(m,1h),4.37-4.26(m,1h),4.03-3.88(m,2h),3.32(br d,j＝7.5hz,2h),2.91-2.79(m,5h),2.76(s,3h),2.65(q,j＝7.4hz,2h),1.48-1.42(m,9h),1.35-1.24(m,12h)；lc-ms(es+,m/z):625.5[(m+h)+].rt＝0.855min。步骤2：(s,e)-6-乙基-5-(异丙基氨基)-3-((3-(2-(2-(n-甲基-4-(甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(s,e)-(4-((1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基)-4-氧代丁-2-烯-1-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，800.29μmol，1当量)和hcl/meoh(4m，30ml，149.95当量)的混合物在16℃下搅拌1.5小时。lcms显示反应完成。将反应混合物减压浓缩，得到残余物。将所得产物溶解于dmf，过滤，得到粗产物。粗产物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c18 100*40mm*3μm；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：5％-50％，8分钟)纯化，得到(s,e)-6-乙基-5-(异丙基氨基)-3-((3-(2-(2-(n-甲基-4-(甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(90.4mg，167.67μmol，收率：20.95％，纯度：97.31％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.25-11.19(m,1h),8.79-8.51(m,2h),8.10-7.88(m,1h),7.64-7.54(m,2h),7.46-7.37(m,1h),7.28-7.15(m,2h),6.81-6.69(m,3h),6.63-6.44(m,1h),4.70(s,1h),4.33-4.19(m,1h),3.79-3.67(m,2h),3.31-3.24(m,2h),2.93-2.88(m,2h),2.73(br s,3h),2.58(br t,j＝7.3hz,5h),1.29-1.17(m,12h)；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝8.08-7.86(m,1h),7.66-7.57(m,1h),7.44-7.36(m,1h),7.19(t,j＝7.8hz,1h),6.82-6.66(m,2h),6.60-6.43(m,1h),4.98-4.51(m,1h),4.28-4.20(m,1h),3.72(br d,j＝6.5hz,2h),3.36-3.23(m,2h),2.88(s,2h),2.72-2.64(m,3h),2.58-2.53(m,5h),1.27-1.15(m,12h)；lc-ms(es+,m/z):525.3[(m+h)+].rt＝2.143min；hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:525.3275。实施例38(化合物305)(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-异丙基-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-异丙基-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺向(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(68.54mg，413.83μmol，1.5当量，hcl)的dmf(1ml)溶液中加入dipea(356.56mg，2.76mmol，480.54μl，10当量)、(s)-5-异丙基-6-甲基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(120mg，275.89μmol，1当量，hcl)和bop(183.03mg，413.83μmol，1.5当量)。将混合物在0℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。过滤反应混合物，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna80*30mm*3um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：10％-50％，8分钟)纯化，得到(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-异丙基-6-甲基吡嗪-2-甲酰胺(27mg，52.95μmol，收率：19.19％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.12-11.01(m,1h),9.82-9.58(m,1h),8.32-8.14(m,1h),8.12-7.87(m,1h),7.83(brs,1h),7.67-7.56(m,1h),7.56-7.49(m,1h),7.28-7.19(m,1h),6.87-6.75(m,2h),6.65-6.45(m,1h),5.04-4.51(m,1h),3.94-3.79(m,2h),3.34-3.23(m,3h),2.92-2.87(m,2h),2.80-2.68(m,9h),2.49-2.47(m,3h),1.30-1.21(m,9h).(tfa盐)lc-ms(es+,m/z):510.3[(m+h)+]；rt＝2.162min；hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:510.3194。实施例39(化合物306)(s,e)-5-环丙基-3-((5-(2-(2-(4-(二甲氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)吡啶-3-基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s,e)-5-环丙基-3-((5-(2-(2-(4-(二甲氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)吡啶-3-基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向(s)-5-环丙基-6-乙基-3-((5-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)吡啶-3-基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺盐酸盐(50mg，111.62μmol，1当量，hcl)的dmf(1ml)溶液中加入(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(17.30mg，104.45μmol，9.36e-1当量，hcl)、bop(59.24mg，133.94μmol，1.2当量)和diea(72.13mg，558.08μmol，97.21μl，5当量)。将混合物在0℃下搅拌2小时。lc-ms显示反应完全消耗。在15℃下，通过加入水(50ml)淬灭反应混合物，然后用etoac(20ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(20ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c18 75*30mm*3um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：5％-35％，8分钟)纯化，得到(s,e)-5-环丙基-3-((5-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)吡啶-3-基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺，为淡黄色固体(44.03mg，84.40μmol，收率：75.62％，纯度：100％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.19(s,1h),10.70-10.05(m,1h),8.78(br s,1h),8.19(br s,1h),8.17-7.94(m,3h),7.91(br s,1h),6.86-6.76(m,1h),6.66-6.46(m,1h),4.97-4.52(m,1h),3.92-3.84(m,2h),3.36(br d,j＝6.0hz,2h),2.95-2.89(m,2h),2.87(s,2h),2.77(brs,8h),2.66(s,1h),2.34-2.26(m,1h),1.30-1.18(m,6h),1.14-1.04(m,4h).lc-ms(es+,m/z):523.3[(m+h)+]；rt＝1.753min.hrms(ei):m/z[m]+实测值:523.3149。实施例40(化合物307)(s,e)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(n-甲基-4-(甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s,e)-(4-((1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基)-4-氧代丁-2-烯-1-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯向€-4-((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)丁-2-烯酸(189.12mg，878.61μmol，1.2当量)和diea(946.26mg，7.32mmol，1.28ml，10当量)的dmf(2ml)溶液中加入(s)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(350mg，732.17μmol，1当量，hcl)，然后加入bop(485.74mg，1.10mmol，1.5当量)。将混合物在0℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。将反应物倒入水(15ml)中，用etoac(10ml*2)萃取。合并有机层，用水(10ml*2)、饱和盐水(10ml)洗，干燥(na2so4)，过滤，浓缩，得到粗产物。粗产物经硅胶硫醇凝胶色谱法(石油醚/etoac＝1/1)tlc(板1rf＝0.69)纯化，得到(s,e)-(4-((1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基)-4-氧代丁-2-烯-1-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，626.18μmol，收率：85.52％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):639.5[(m+h)+]；rt＝0.827min。步骤2：(s,e)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(n-甲基-4-(甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(s,e)-(4-((1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基)-4-氧代丁-2-烯-1-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，626.18μmol，1当量)和hcl/meoh(4m，15ml，95.82当量)的混合物在16℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。过滤得到滤液。粗产物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c18 75*30mm*3um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：10％-40％，8分钟)纯化，得到(s,e)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(n-甲基-4-(甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(101.00mg，175.61μmol，收率：28.04％，hcl)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.14-11.07(m,1h),8.74-8.46(m,2h),8.13-7.83(m,1h),7.76(br s,1h),7.56-7.50(m,1h),7.50-7.39(m,2h),7.25-7.14(m,1h),6.79(d,j＝7.3hz,1h),6.77-6.66(m,1h),6.63-6.43(m,1h),5.02-4.51(m,1h),4.25(quin,j＝6.6hz,1h),3.90-3.55(m,2h),3.30-3.24(m,2h),2.93-2.84(m,5h),2.78-2.63(m,6h),2.57(br s,2h),1.29-1.19(m,12h)(tfa,盐).1h nmr(400mhz,d2o)δ＝8.09-7.63(m,1h),7.54-7.49(m,1h),7.46-7.40(m,1h),7.20(br t,j＝7.7hz,1h),6.82-6.65(m,2h),6.63-6.38(m,1h),5.00-4.50(m,1h),4.24(quin,j＝6.6hz,1h),3.82-3.59(m,2h),3.33-3.20(m,2h),2.93-2.84(m,5h),2.76-2.64(m,6h),2.56(s,2h),1.22-1.16(m,12h)(tfa,盐).lc-ms(es+,m/z):539.3[(m+h)+]；rt＝2.276min.hrms(ei):m/z[m]+实测值:539.3473.sfc:95.15％。实施例41(化合物308)6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤3：6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺在0℃、n2下，向6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(160mg，280.67μmol，1当量)的dmf(3ml)混合物中加入diea(362.75mg，2.81mmol，10当量)，然后一次性加入丙烯酰氯(25.40mg，280.67μmol，1当量)。将混合物搅拌3小时。lcms显示反应完成。过滤反应混合物，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c18 75*30mm*3um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：35％-65％，8分钟)纯化，得到6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(10.22mg，21.06μmol，收率：7.50％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.10(d,j＝1.5hz,1h),8.13-7.96(m,1h),7.75(brs,1h),7.56(br d,j＝6.5hz,1h),7.47-7.42(m,2h),7.21(t,j＝7.8hz,1h),6.81-6.78(m,1h),6.78-6.47(m,1h),6.13-6.02(m,1h),5.70-5.56(m,1h),4.28-4.21(m,1h),3.96(d,j＝18.4hz,2h),3.31(br dd,j＝7.5,14.1hz,2h),3.02(s,2h),2.86(s,3h),2.81(s,1h),2.73-2.68(m,4h),1.22-1.19(m,9h).lc-ms(es+,m/z):482.3[(m+h)+]；rt＝2.637min；hrms(ei):m/z[m+h]+:482.2864。实施例42(化合物310)(s,e)-5-环丙基-3-((2-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s)-(1-((2-(4-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基-l-丙氨酸(74.72mg，367.65μmol，1.5当量)、nmi(201.23mg，2.45mmol，195.37μl，10.0当量)的dmf(2ml)混合物中加入3-((2-(2-氨基乙基)吡啶-4-基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(80mg，245.10μmol，1当量，hcl)，然后加入tcfh(82.52mg，294.12μmol，1.2当量)，将反应混合物在0℃搅拌2小时。lc-ms显示反应完成。通过加入h2o(50ml)淬灭反应混合物，然后用dcm(20ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(30ml)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经制备型tlc(sio2，dcm：ch2cl2)纯化，得到(s)-(1-((2-(4-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(85mg，166.14μmol，收率：67.78％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):512.3[(m+h)+].rt＝0.720min。步骤2：(s)-5-环丙基-6-乙基-3-((2-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(s)-(1-((2-(4-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(85mg，166.14μmol，1.0当量)的hcl/meoh(4m，3ml，72.23当量)溶液在25℃搅拌2小时。lc-ms显示反应完成。将反应混合物减压浓缩，得到(s)-5-环丙基-6-乙基-3-((2-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(90mg，粗品，hcl)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):412.3[(m+h)+].rt＝0.568min。步骤3：(s,e)-5-环丙基-3-((2-(2-(2-(4-(二甲氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向(s)-5-环丙基-6-乙基-3-((2-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(70mg，156.26μmol，1.0当量，hcl)和(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(38.82mg，234.40μmol，1.5当量，hcl)、diea(201.96mg，1.56mmol，272.18μl，10当量)的dmf(2ml)溶液中加入bop(103.67mg，234.40μmol，1.5当量)，然后将反应混合物在0℃下搅拌2小时。lc-ms显示反应完成。通过加入h2o(20ml)淬灭反应混合物，用dcm(10ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(10ml)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经制备型hplc(碱性条件色谱柱：phenomenex c18 75*30mm*3um；流动相：[水(nh3h2o+nh4hco3)-acn]；b％：10％-50％，8分钟)纯化，得到(s,e)-5-环丙基-3-((2-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(13.3mg，25.45μmol，收率：16.29％，纯度：100％)，为白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.43-11.34(m,1h),8.32-8.17(m,2h),8.12-7.75(m,2h),7.49-7.32(m,2h),6.69-6.29(m,2h),5.06–4.44(m,1h),3.52-3.25(m,2h),3.01–2.89(m,4h),2.87-2.68(m,4h),2.75-2.64(m,1h),2.38-2.28(m,1h),2.16-2.03(m,6h),1.33-1.23(m,4h),1.21-1.09(m,6h).lc-ms(es+,m/z):523.2[(m+h)+].rt＝1.773min.hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:523.3130。实施例43(化合物315)(s)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-在0℃下，向(s)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(200mg，418.38μmol，1当量，hcl)和diea(270.36mg，2.09mmol，364.37μl，5当量)的dmf(3ml)溶液中加入丙-2-烯酰氯(45.44mg，502.06μmol，40.94μl，1.2当量)，然后将混合物在0℃搅拌1小时。lcms显示反应完成。将反应混合物真空浓缩，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c18 250*50mm*10μm；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：25％-55％，10分钟)纯化，得到(s)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(10.92mg，22.03μmol，收率：5.27％，纯度：100％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.10(br s,1h),8.10-7.84(m,1h),7.77-7.51(m,2h),7.50-7.39(m,2h),7.20(t,j＝7.8hz,1h),6.79(d,j＝7.6hz,1h),6.71(br dd,j＝10.4,16.8hz,1h),6.15-6.01(m,1h),5.70-5.57(m,1h),4.99(br d,j＝7.2hz,1h),4.25(quin,j＝6.6hz,1h),3.35-3.19(m,2h),2.92-2.80(m,5h),2.77-2.65(m,5h),1.28-1.14(m,12h).lc-ms(es+,m/z):496.3[(m+h)+]；rt＝2.752min；hrms(ei):m/z[m]+实测值:496.3052。实施例44(化合物321)(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤4：(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺向(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸(162.37mg，343.00μmol，纯度：50％，1.5当量，hcl)的dmf(0.5ml)溶液中加入dipea(329.92mg，2.55mmol，444.63μl，10当量)、(r)-3-((3-(1-氨基丙-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺(80mg，228.66μmol，1当量，hcl)和bop(151.70mg，343.00μmol，1.5当量)。将混合物在0℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。过滤反应混合物，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：waters xbridge prep obd c18 150*40mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：30％-70％，8分钟)纯化，得到(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺(11.16mg，22.33μmol，收率：9.77％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.11-10.98(m,1h),8.20-8.09(m,1h),8.09-7.81(m,2h),7.64-7.56(m,1h),7.54-7.48(m,1h),7.28-7.20(m,1h),6.89-6.81(m,1h),6.64-6.24(m,2h),3.99-3.88(m,2h),3.28-3.18(m,2h),3.04-3.00(m,1h),2.99-2.96(m,1h),2.94-2.84(m,2h),2.81-2.70(m,4h),2.53-2.51(m,3h),2.17-2.06(m,6h),1.26-1.17(m,6h).lc-ms(es+,m/z):496.3[(m+h)+]；rt＝0.967min；hrms(ei):m/z[m]+实测值:496.2995。实施例45(化合物322)(s,e)-6-(二甲基氨基)-2-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-乙基烟酰胺步骤1：(s,e)-6-(二甲基氨基)-2-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-乙基烟酰胺在0℃下，向(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(110.66mg，668.17μmol，1.5当量，hcl)的dmf(4ml)混合物中加入dipea(4.45mmol，775.87μl，10当量)和(s)-6-(二甲基氨基)-5-乙基-2-((3-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)烟酰胺(200mg，445.45μmol，1当量，hcl)，最后一次性加入bop(295.52mg，668.17μmol，纯度：n/a，1.5当量)。将混合物在n2下于0℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。过滤反应混合物，得到残余物。残余物经制备型hplc(tfa)(色谱柱：phenomenex luna80*30mm*3um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：5％-40％，8分钟)纯化，得到(s,e)-6-(二甲基氨基)-2-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-乙基烟酰胺(13.15mg，25.07μmol，收率：5.63％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.40(br s,1h),9.86(br dd,j＝1.4,3.4hz,1h),8.14-7.80(m,3h),7.59(s,1h),7.52-7.46(m,1h),7.30-7.13(m,2h),6.86-6.77(m,1h),6.73(d,j＝7.5hz,1h),6.63-6.46(m,1h),5.03-4.51(m,1h),3.91-3.79(m,2h),3.33-3.24(m,2h),2.96-2.94(m,6h),2.91-2.88(m,2h),2.79-2.66(m,9h),2.58-2.54(m,2h),1.30-1.17(m,6h)(tfa,盐).lc-ms(es+,m/z):524.3[(m+h)+]；rt＝1.951min；hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:524.3328。实施例46(化合物323)(s,e)-6-环丙基-2-((5-(2-(2-(4-(二甲氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)吡啶-3-基)氨基)-5-甲基烟酰胺步骤1：(s,e)-6-环丙基-2-((5-(2-(2-(4-(二甲氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)吡啶-3-基)氨基)-5-甲基烟酰胺在0℃下，向(s)-6-环丙基-5-甲基-2-((5-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)吡啶-3-基)氨基)烟酰胺(122mg，281.79μmol，1当量)、(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(70.00mg，422.69μmol，1.5当量，hcl)的dmf(2ml)溶液中加入dipea(364.19mg，2.82mmol，10当量)，然后加入bop(186.95mg，422.69μmol，1.5当量)。将混合物在0℃下搅拌1小时。lc-ms显示检测到所需化合物。反应混合物用(h2o)10ml淬灭，然后用etoac(10ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(10ml*3)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经制备型hplc(中性条件；色谱柱：waters xbridge beh c18 100*30mm*10um；流动相：[水(nh4 hco3)-acn]；b％：20％-50％，8分钟)纯化，得到少量化合物(s,e)-6-环丙基-2-((5-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)吡啶-3-基)氨基)-5-甲基烟酰胺(11.08mg，21.83μmol，收率：7.75％)，为黑褐色固体。1h nmr(400mhz,meod-d4)δ＝8.81-8.75(m,1h),8.04-7.94(m,2h),7.87-7.84(m,1h),6.81-6.67(m,1h),6.56-6.43(m,1h),5.09-5.01(m,1h),3.58-3.45(m,2h),3.32(s,2h),3.14-3.06(m,2h),2.90-2.80(m,3h),2.39(s,3h),2.27-2.21(m,7h),1.40-1.29(m,3h),1.17-1.13(m,2h),1.10-1.05(m,2h).1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.14(s,1h),8.62(d,j＝1.9hz,1h),8.15-7.88(m,5h),7.90-7.86(m,1h),6.65-6.37(m,2h),5.01-4.93(m,1h),3.40-3.32(m,2h),3.32(s,2h),3.04-2.92(m,2h),2.76-2.63(m,3h),2.32(s,3h),2.19(br s,7h),1.24(br d,j＝6.4hz,3h),1.08-0.98(m,4h).lc-ms(es+,m/z):508.3[(m+h)+]；rt＝1.750min.hrms(ei):m/z[m]+实测值:508.3040。实施例47(化合物324)(s,e)-3-((3-(1-(2-(4-(二甲氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s,e)-3-((3-(1-(2-(4-(二甲氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺在16℃下，向(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸(51.51mg，257.25μmol，1.5当量)的dmf(1ml)混合物中加入dipea(221.64mg，1.71mmol，298.71μl，10当量)和(s)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺(60mg，171.50μmol，1当量，hcl)，最后一次性加入bop(113.78mg，257.25μmol，1.5当量)。将混合物在16℃于n2下搅拌2小时。lcms显示反应完成。将残余物浓缩。残余物经制备型hplc(色谱柱：waters xbridge beh c18 100*30mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：25％-55％，8分钟)纯化，得到(s,e)-3-((3-(1-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺(10.42mg，20.91μmol，收率：12.19％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.05(d,j＝5.0hz,1h),8.15(brd,j＝1.9hz,1h),8.09-7.82(m,2h),7.60(br t,j＝8.3hz,1h),7.55-7.51(m,1h),7.24(t,j＝7.8hz,1h),6.85(d,j＝7.6hz,1h),6.62-6.24(m,2h),3.94(d,j＝17.9hz,2h),3.28-3.18(m,2h),3.02(s,1h),2.99-2.95(m,1.5h),2.94-2.84(m,2h),2.81-2.70(m,3.5h),2.51(br s,3h),2.15-2.12(m,3h),2.11-2.04(m,3h),1.27-1.17(m,6h).1h nmr(400mhz,meod-d4)δ＝7.64-7.56(m,2h),7.28-7.19(m,1h),6.88(br d,j＝7.5hz,1h),6.80-6.64(m,1h),6.61-6.26(m,1h),4.09-3.95(m,2h),3.48-3.33(m,2h),3.14-2.94(m,5h),2.88(s,1h),2.79(q,j＝7.5hz,2h),2.53(s,3h),2.28-2.18(m,6h),1.32-1.26(m,6h).lc-ms(es+,m/z):496.1[(m+h)+]；rt＝2.710min；hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:496.3041。实施例48(化合物326)3-((3-((r)-1-((s)-2-((e)-4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)丙-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：3-((3-((r)-1-((s)-2-((e)-4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(57.11mg，344.86μmol，1.5当量，hcl)的dmf(1ml)溶液中加入dipea(297.14mg，2.30mmol，400.45μl，10当量)、6-乙基-5-甲基-3-((3-((r)-1-((s)-2-(甲基氨基)丙酰胺基)丙-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(100mg，229.91μmol，1当量，hcl)，然后加入bop(152.52mg，344.86μmol，1.5当量)。混合物在0℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。将反应混合物过滤，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c18 100*40mm*3μm；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：5％-50％，8分钟)纯化，得到3-((3-((r)-1-((s)-2-((e)-4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-甲基吡嗪-2-甲酰胺(11.02mg，21.62μmol，收率：9.41％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.11-10.95(m,1h),9.83-9.59(m,1h),8.24-8.07(m,1h),8.02-7.81(m,2h),7.65-7.56(m,1h),7.51(s,1h),7.27-7.18(m,1h),6.85-6.74(m,2h),6.62-6.43(m,1h),5.00-4.50(m,1h),3.91-3.77(m,2h),3.28-3.15(m,2h),2.98-2.86(m,3h),2.78-2.72(m,8h),2.66-2.61(m,1h),2.53-2.51(m,3h),1.26-1.17(m,9h).(tfa盐)lc-ms(es+,m/z):510.3[(m+h)+]；rt＝2.168min；hrms(ei):m/z[m]+实测值:510.3176。实施例49(化合物327)(e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙炔基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(2-((3-((5-溴-3-氨基甲酰基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯向3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-溴-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(1.1g，2.70mmol，1当量)、n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基甘氨酸(1.02g，5.40mmol，2当量)、bop(1.79g，4.05mmol，1.5当量)的dmf(10ml)溶液中加入dipea(5.24g，40.51mmol，7.06ml，15当量)。将混合物在16℃下搅拌1小时。lcms显示反应完成。将混合物倒入水(30ml)中，用etoac(30ml*2)萃取。有机层用水(60ml*2)、饱和盐水(60ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经硅胶色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝1:1)纯化，得到(2-((3-((5-溴-3-氨基甲酰基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(370mg，639.58μmol，收率：65.13％)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):578.4[(m+h)+]；rt＝0.813min。步骤2：(2-((3-((3-氨基甲酰基-6-(异丙基(甲基)氨基)-5-((三异丙基甲硅烷基)乙炔基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在20℃下，向(2-((3-((5-溴-3-氨基甲酰基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，518.58μmol，1当量)和乙炔基三异丙基硅烷(283.73mg，1.56mmol，349.04μl，3当量)的thf(3ml)溶液中加入tea(262.38mg，2.59mmol，360.90μl，5当量)、pd(pph3)2cl2(36.40mg，51.86μmol，0.1当量)和cui(9.88mg，51.86μmol，0.1当量)。将混合物在n2下于20℃搅拌3小时。lcms显示反应完成。将残余物溶于dcm(10ml)，加入清除剂(pd)，然后在20℃搅拌1小时，然后过滤。将混合物倒入水(10ml)中，用dcm(10ml*2)萃取。有机层用水(20ml*2)、饱和盐水(20ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经硅胶色谱法(石油醚：乙酸乙酯＝1：3)纯化，得到(2-((3-((3-氨基甲酰基-6-(异丙基(甲基)氨基)-5-((三异丙基甲硅烷基)乙炔基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(206mg，302.96μmol，收率：58.42％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.45-11.40(m,1h),7.91(br s,1h),7.62-7.53(m,3h),7.45-7.38(m,1h),7.30-7.22(m,1h),6.92-6.86(m,1h),5.28-5.15(m,1h),3.76-3.66(m,2h),3.31-3.26(m,2h),3.13-3.08(m,3h),2.79-2.69(m,5h),1.41-1.31(m,9h),1.22(d,j＝6.6hz,6h),1.15-1.09(m,21h)；lc-ms(es+,m/z):680.4[(m+h)+]；rt＝1.250min。步骤3：5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-((三异丙基甲硅烷基)乙炔基)吡嗪-2-甲酰胺向(2-((3-((3-氨基甲酰基-6-(异丙基(甲基)氨基)-5-((三异丙基甲硅烷基)乙炔基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(200mg，294.13μmol，1当量)的dcm(2ml)溶液中加入tfa(1.54g，13.51mmol，1ml，45.92当量)，将混合物在20℃下搅拌1小时。lcms显示反应完成。将反应混合物减压浓缩，得到5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-((三异丙基甲硅烷基)乙炔基)吡嗪-2-甲酰胺(200mg，粗品)，为黑褐色油状物。lc-ms(es+,m/z):580.6[(m+h)+]；rt＝0.913min。步骤4：(e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-((三异丙基甲硅烷基)乙炔基)吡嗪-2-甲酰胺向(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(85.93mg，518.83μmol，1.5当量，hcl)的dmf(3ml)溶液中加入dipea(670.55mg，5.19mmol，903.70μl，15当量)和5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-((三异丙基甲硅烷基)乙炔基)吡嗪-2-甲酰胺(240mg，345.88μmol，1当量，tfa)，然后加入bop(229.47mg，518.83μmol，1.5当量)。将混合物在20℃下搅拌1小时。lcms显示反应完成。将混合物倒入水(10ml)中，用etoac(10ml*2)萃取。有机层用水(20ml*2)、饱和盐水(20ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经硅胶色谱法(dcm：meoh＝10：1)纯化，得到(e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-((三异丙基甲硅烷基)乙炔基)吡嗪-2-甲酰胺(76mg，109.99μmol，收率：31.80％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.46-11.40(m,1h),8.17-7.89(m,1h),7.73-7.53(m,3h),7.49-7.40(m,1h),7.30-7.21(m,1h),6.94-6.84(m,1h),6.67-6.47(m,2h),5.29-5.14(m,1h),4.02-3.90(m,2h),3.12-3.00(m,6h),2.86-2.69(m,6h),2.24-2.10(m,6h),1.25-1.08(m,27h)；lc-ms(es+,m/z):691.4[(m+h)+]；rt＝0.947min。步骤5：(e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙炔基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺在16℃下，向(e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-((三异丙基甲硅烷基)乙炔基)吡嗪-2-甲酰胺(76mg，109.99μmol，1当量)的dmf(1.5ml)溶液中加入csf(66.83mg，439.95μmol，16.22μl，4当量)，将混合物在16℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。过滤混合物，得到残余物。粗产物经制备型hplc(色谱柱：waters xbridge prep obd c18 150*40mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：30％-70％，8分钟)纯化，得到(e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙炔基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(10.36mg，19.18μmol，收率：17.44％，纯度：98.97％)，为黄色固体。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.50-11.42(m,1h),8.16-7.89(m,1h),7.79-7.68(m,1h),7.64-7.38(m,3h),7.25(t,j＝7.8hz,1h),6.93-6.83(m,1h),6.67-6.48(m,2h),5.08-4.94(m,1h),4.46(s,1h),4.01-3.91(m,2h),3.31-3.26(m,2h),3.09-2.93(m,7h),2.81(s,1h),2.75-2.68(m,2h),2.18-2.07(m,6h),1.23(d,j＝6.6hz,6h)；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.42-11.31(m,1h),8.18-7.90(m,1h),7.62-7.53(m,1h),7.46-7.37(m,1h),7.29-7.20(m,1h),6.93-6.83(m,1h),6.68-6.44(m,2h),5.08-4.90(m,1h),4.40(s,1h),4.00-3.90(m,2h),3.36-3.24(m,2h),3.08-2.90(m,7h),2.76(br s,1h),2.74-2.67(m,2h),2.17-2.03(m,6h),1.21(d,j＝6.6hz,6h)；lcms(es+,m/z):535.3[(m+h)+]；rt＝2.167min；hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:535.3162。实施例50(化合物328)(e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-乙烯基吡嗪-2-甲酰胺步骤2：(2-((3-((3-氨基甲酰基-6-(异丙基(甲基)氨基)-5-乙烯基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯向(2-((3-((5-溴-3-氨基甲酰基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，518.58μmol，1当量)和tea(157.43mg，1.56mmol，216.54μl，3当量)的dmf(5ml)溶液中加入4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(239.61mg，1.56mmol，263.88μl，3当量)，然后加入pd(dppf)cl2(37.95mg，51.86μmol，0.1当量)。将混合物脱气并用n2吹扫3次，然后在n2气氛下于80℃搅拌10小时。lcms显示反应完成。将残余物溶于etoac(10ml)，加入清除剂(pd)，然后在20℃搅拌1小时，然后过滤。将混合物倒入水(30ml)中，用etoac(20ml*2)萃取。合并有机层，用水(10ml*2)、饱和盐水(10ml)洗，干燥(na2so4)，过滤，浓缩，得到粗产物。粗产物经制备型tlc(pe/ea＝1/2)纯化，得到(2-((3-((3-氨基甲酰基-6-(异丙基(甲基)氨基)-5-乙烯基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，285.37μmol，收率：55.03％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):526.5[(m+h)+]；rt＝0.821min。步骤3：5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙烯基吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向(2-((3-((3-氨基甲酰基-6-(异丙基(甲基)氨基)-5-乙烯基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(70mg，133.17μmol，1当量)和2,6-二甲基吡啶(230.00mg，2.15mmol，250.00μl，16.12当量)的dcm(1ml)溶液中逐滴加入tmsi(257.25mg，1.29mmol，175.00μl，9.65当量)。添加后，所得混合物在16℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。将混合物减压浓缩，得到5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙烯基吡嗪-2-甲酰胺(80mg，粗品)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):426.5[(m+h)+]；rt＝0.605min。步骤4：(e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-乙烯基吡嗪-2-甲酰胺向(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(46.70mg，282.00μmol，1.5当量，hcl)的dmf(1ml)溶液中加入diea(242.98mg，1.88mmol，327.47μl，10当量)和5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙烯基吡嗪-2-甲酰胺(80mg，188.00μmol，1当量)，然后加入bop(124.72mg，282.00μmol，1.5当量)。将混合物在16℃下搅拌1小时。lcms显示反应完成。过滤后，滤液经通过制备型hplc(色谱柱：waters xbridgebeh c18 100*30mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：30％-60％，8分钟)纯化，并进一步经sfc分离纯化(色谱柱：chiralpak ih，250*30mm，10um；流动相：[meoh(0.1％ipam)]；b％：18％-18％，12分钟)，得到(e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-(异丙基(甲基)氨基)-6-乙烯基吡嗪-2-甲酰胺(6.37mg，11.77μmol，收率：6.26％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.34(d,j＝5.1hz,1h),8.18-7.89(m,2h),7.57(br d,j＝15.8hz,2h),7.51-7.43(m,1h),7.23(t,j＝7.8hz,1h),6.84(d,j＝7.4hz,1h),6.68(dd,j＝10.8,17.1hz,1h),6.61-6.55(m,1h),6.55-6.29(m,1h),6.23(dd,j＝2.1,17.1hz,1h),5.32-5.25(m,1h),4.31-4.19(m,1h),3.95(d,j＝19.4hz,2h),3.37-3.31(m,2h),3.07(br d,j＝3.8hz,1h),3.03-2.96(m,2h),2.87(s,3h),2.81(s,2h),2.76-2.68(m,2h),2.21-2.11(m,6h),1.20(d,j＝6.6hz,6h)；1hnmr(400mhz,dmso-d6+d2o)δ＝11.14(d,j＝8.1hz,1h),7.58(s,1h),7.44-7.39(m,1h),7.22(t,j＝7.8hz,1h),6.83(d,j＝7.2hz,1h),6.65(dd,j＝10.8,17.1hz,1h),6.59-6.22(m,2h),6.13(dd,j＝1.6,17.1hz,1h),5.32-5.26(m,1h),4.28-4.20(m,1h),3.96-3.90(m,2h),3.32-3.25(m,2h),3.07(br d,j＝4.6hz,1h),2.98-2.94(m,3h),2.84(s,3h),2.78(s,1h),2.72-2.67(m,2h),2.17-2.06(m,6h),1.16(d,j＝6.6hz,6h).lcms(es+,m/z):537.3[(m+h)+]；rt＝2.259min；hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:537.3313。实施例51化合物501(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向(叔丁氧基羰基)-l-丙氨酸(397.82mg，2.10mmol，1.2当量)、3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基氨基)吡嗪-2-甲酰胺(600mg，1.75mmol，1当量)和nmi(1.44g，17.52mmol，1.40ml，10当量)的dmf(6ml)溶液中加入tcfh(737.42mg，2.63mmol，1.5当量)。混合物在0℃搅拌1小时。将混合物倒入水(5ml)中，用etoac(5ml*2)萃取。合并有机层，用水(10ml*2)、饱和盐水(10ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经硅胶色谱法(石油醚：乙酸乙酯＝1:1)纯化，得到(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(710mg，1.38mmol，收率：78.89％)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.27-11.15(m,1h),7.88-7.76(m,1h),7.69(s,1h),7.55(br d,j＝2.6hz,1h),7.35(brd,j＝8.4hz,1h),7.28-7.14(m,2h),6.89-6.65(m,3h),4.35-4.20(m,1h),4.06-3.89(m,1h),3.31(br s,2h),2.69-2.64(m,2h),2.63-2.55(m,2h),1.44-1.07(m,21h).lcms(es+,m/z):514.3[(m+h)+]；rt＝0.762min。步骤2：(s)-3-((3-(2-(2-氨基丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(710mg，1.38mmol，1当量)和hcl/meoh(4m，40ml，115.75当量)的混合物在25℃搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩，得到(s)-3-((3-(2-(2-氨基丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基氨基)吡嗪-2-甲酰胺(650mg，粗品)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.31-11.12(m,1h),8.55(t,j＝5.6hz,1h),8.18(br d,j＝3.9hz,3h),7.62-7.58(m,1h),7.47-7.43(m,1h),7.29-7.12(m,2h),6.88-6.73(m,2h),4.33-4.21(m,1h),3.45(dt,j＝7.0,13.4hz,2h),3.33-3.25(m,1h),2.80-2.70(m,2h),2.59(q,j＝7.4hz,2h),1.35-1.14(m,12h).lcms(es+,m/z):414.3[(m+h)+]；rt＝0.565min。步骤3：(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基氨基)吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(520.66mg，3.14mmol，2当量，hcl)、(s)-3-((3-(2-(2-氨基丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基氨基)吡嗪-2-甲酰胺(650mg，1.57mmol，1当量)和dipea(2.03g，15.72mmol，2.74ml，10当量)的dmf(4ml)溶液中加入bop(1.04g，2.36mmol，1.5当量)。将混合物在0℃搅拌2小时。过滤混合物，得到残余物。粗产物经制备型hplc(色谱柱：waters xbridge prep obd c18 150*40mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：25％-65％，8分钟)纯化，得到(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基氨基)吡嗪-2-甲酰胺(165.87mg，308.53μmol，收率：19.63％，纯度：97.59％)，为白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.21(s,1h),8.17-8.09(m,1h),8.01-7.93(m,1h),7.70-7.62(m,1h),7.55(br d,j＝2.6hz,1h),7.41-7.34(m,1h),7.29-7.21(m,1h),7.21-7.15(m,1h),6.77(t,j＝8.1hz,2h),6.60-6.50(m,1h),6.17-6.07(m,1h),4.37-4.20(m,2h),3.31-3.18(m,2h),3.02-2.91(m,2h),2.71-2.65(m,2h),2.62-2.56(m,2h),2.17-2.10(m,6h),1.28-1.16(m,12h).1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.15-11.00(m,1h),8.00-7.91(m,1h),7.71-7.51(m,2h),7.40-7.29(m,1h),7.24-7.07(m,2h),6.83-6.70(m,2h),6.61(br d,j＝1.8hz,1h),6.04(s,1h),4.32-4.17(m,2h),3.34-3.18(m,2h),2.98-2.93(m,2h),2.69-2.63(m,2h),2.59-2.53(m,2h),2.16-2.06(m,6h),1.26-1.15(m,12h).lc-ms(es+,m/z):525.3[(m+h)+]；rt＝2.068min.hrms(ei):m/z(m+h)+实测值:525.3270。实施例52化合物502(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向(叔丁氧基羰基)-l-丙氨酸(361.15mg，1.91mmol，1.5当量)的dmf(5ml)溶液中加入nmi(1.04g，12.73mmol，1.01ml，10当量)、3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(500mg，1.27mmol，1当量，hcl)，然后在0℃加入tcfh(535.56mg，1.91mmol，1.5当量)。混合物在0℃搅拌2小时。将反应物倒入h2o(10ml)中。水相用乙酸乙酯(15ml*3)萃取。将合并的有机相用饱和盐水(10ml*3)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩。残余物经制备型hplc(柱：phenomenex luna c18 100*40mm*3um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：40％-75％，8分钟)纯化，得到(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(350mg，663.31μmol，收率：52.13％)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.16-11.04(m,1h),7.92-7.68(m,2h),7.63-7.52(m,1h),7.50-7.34(m,2h),7.26-7.13(m,1h),6.88-6.72(m,2h),4.32-4.17(m,1h),3.97-3.74(m,1h),3.40-3.33(m,1h),3.28-3.17(m,1h),2.92-2.82(m,3h),2.75-2.63(m,4h),1.37(s,9h),1.25-1.19(m,9h),1.12(d,j＝7.1hz,3h).lc-ms(es+,m/z):528.4[(m+h)+]；rt＝0.989min。步骤2：(s)-3-((3-(2-(2-氨基丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(s)-(1-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(350mg，663.31μmol，1当量)的hcl/meoh(20ml)混合物在16℃搅拌2小时。减压浓缩反应混合物，得到(s)-3-((3-(2-(2-氨基丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(307mg，粗品)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.19-10.99(m,1h),8.60-8.38(m,1h),8.15(brd,j＝3.4hz,3h),7.88-7.60(m,1h),7.58-7.38(m,3h),7.25-7.19(m,1h),6.82(d,j＝7.5hz,1h),4.28-4.19(m,1h),3.75-3.71(m,1h),3.48-3.41(m,1h),3.32-3.24(m,1h),2.89-2.83(m,3h),2.76-2.67(m,4h),1.29(d,j＝6.9hz,3h),1.24-1.19(m,9h)(hcl盐).lc-ms(es+,m/z):428.3[(m+h)+]；rt＝0.815min。步骤3：(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(123.14mg，743.53μmol，1.5当量，hcl)的dmf(3ml)溶液中加入dipea(640.64mg，4.96mmol，863.40μl，10当量)、(s)-3-((3-(2-(2-氨基丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(230mg，495.69μm，1当量，hcl)，然后加入bop(328.85mg，743.53μmol，1.5当量)。混合物在0℃下搅拌2小时。将反应物倒入h2o(5ml)中。水相用乙酸乙酯(10ml*3)萃取。将合并的有机相用饱和盐水(10ml*3)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩。残余物经制备型hplc(色谱柱：waters xbridge prep obd c18 150*40mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：35％-75％，8分钟)，得到(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(55.27mg，102.05μmol，收率：20.59％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.17-11.03(m,1h),8.16-8.08(m,1h),8.01-7.90(m,1h),7.78-7.69(m,1h),7.59-7.51(m,1h),7.49-7.38(m,2h),7.24-7.14(m,1h),6.82-6.76(m,1h),6.59-6.48(m,1h),6.14-6.07(m,1h),4.32(s,2h),3.31-3.20(m,2h),2.98-2.92(m,2h),2.88-2.82(m,3h),2.73-2.65(m,4h),2.14-2.11(m,6h),1.23-1.14(m,12h).lc-ms(es+,m/z):539.3[(m+h)+]；rt＝2.309min.hrms(ei):m/z[m]+实测值:539.3442。中间体1(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯步骤1：2-(3-溴苯基)丙腈向1-(3-溴苯基)乙烷-1-酮(10g，50.24mmol，6.62ml，1当量)和1-((异氰酸甲基)磺酰基)-4-甲基苯(11.77g，60.29mmol，1.2当量)的1,2-dme(100ml)溶液中加入kotbu(1m的thf溶液，100.70ml，2.00当量)和t-buoh(50ml)。混合物在0℃下搅拌，然后升温至25℃持续2小时。将反应物倒入到水(150ml)中，用乙酸乙酯(200ml*3)萃取。合并有机层，用水(100ml*2)、饱和盐水(100ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝30/1至3/1)纯化。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenexluna c18 250mm*100mm*10um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：35％-65％，20分钟)纯化，得到2-(3-溴苯基)丙腈(4.7g，22.37mmol，收率：44.53％)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝7.65-7.61(m,1h),7.59-7.52(m,1h),7.46-7.42(m,1h),7.41-7.35(m,1h),4.38-4.30(m,1h),1.55(d,j＝7.3hz,3h)。步骤2：2-(3-溴苯基)丙-1-胺在16℃下，向2-(3-溴苯基)丙腈(11.3g，53.79mmol，1当量)的thf(30ml)溶液中加入bh3.thf(1m，268.96ml，5当量)，持续0.5小时。将混合物加热至80℃保持10小时。将混合物缓慢滴加至meoh中，然后加热至80℃保持1小时。将反应混合物减压浓缩，得到2-(3-溴苯基)丙-1-胺(13.11g，粗品)，为白色油状物。lc-ms(es+,m/z):214.1[(m+h)+]；rt＝0.508min。步骤3：(2-(3-溴苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯向2-(3-溴苯基)丙烷-1-胺(25.6g，119.57mmol，1当量)的dcm(256ml)溶液中加入boc2o(52.19g，239.14mmol，54.94ml，2当量)和dipea(46.36g，358.71mmol，62.48ml，3当量)。将混合物在20℃下搅拌10小时。将反应液倒入水(300ml)中，用dcm(300ml*3)萃取。合并有机层，用水(200ml*2)、饱和盐水(200ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝20/1至3/1)纯化，得到(2-(3-溴苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(28g，89.11mmol，收率：74.53％)，为无色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝7.44-7.34(m,2h),7.30-7.18(m,2h),6.90-6.81(m,1h),3.15-2.98(m,2h),2.94-2.81(m,1h),1.34(s,9h),1.15(d,j＝7.0hz,3h).lc-ms(es+,m/z):258.0[(m-56)+]；rt＝1.005min。步骤4：(2-(3-((二苯基亚甲基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯向(2-(3-溴苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(6.00g，19.10mmol，1当量)和二苯基甲烷亚胺(6.92g，38.19mmol，6.41ml，2当量)的叔戊醇(t-amyloh，60ml)溶液中加入cs2co3(18.66g，57.29mmol，3当量)、2-(二环己基膦)-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯(brettphos，1.02g，1.91mmol，0.1当量)和brettphos pd g3(1.73g，1.91mmol，0.1当量)。将混合物脱气，用n2吹扫3次，然后在n2气氛下于100℃搅拌10小时。将反应液倒入到水(40ml)中，用乙酸乙酯(60ml*3)萃取。合并有机层，用水(50ml*2)、饱和盐水(50ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。将残余物溶于dcm(50ml)，加入清除剂(pd)，然后在25℃下搅拌1小时，然后过滤。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至1/1)纯化，得到(2-(3-((二苯基亚甲基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(7.40g，粗品)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):415.3[(m+h)+]；rt＝1.086min。步骤5：(2-(3-氨基苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯向(2-(3-((二苯基亚甲基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(11.00g，26.54mmol，1当量)的meoh(110ml)溶液中加入nh2oh.hcl(3.32g，47.76mmol，1.8当量)和naoac(5.22g，63.69mmol，2.4当量)。混合物在25℃搅拌4小时。将反应混合物减压浓缩除去meoh。残余物用h2o(100ml)稀释，然后用乙酸乙酯300ml(100ml*3)萃取。合并的有机层用水(100ml*2)、饱和盐水(100ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c18(250*70mm，15um)；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：10％-40％，20分钟)纯化，得到(2-(3-氨基苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(5.40g，21.57mmol，收率：81.29％)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝6.95-6.87(m,1h),6.81-6.70(m,1h),6.44-6.29(m,3h),3.07-2.88(m,2h),2.72-2.59(m,1h),1.37(s,9h),1.08(d,j＝6.9hz,3h)(未检测到活性n-h).lc-ms(es+,m/z):251.3[(m+h)+]；rt＝0.695min。步骤6：(r)-(2-(3-氨基苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(2-(3-氨基苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(10.80g，43.14mmol，1当量)通过sfc(色谱柱：daicel chiralcel oj(250mm*50mm，10um)；流动相：[0.1％ nh3h2o ipa]；b％：20％-20％，4.4分钟)进行分离，得到(r)-(2-(3-氨基苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(5g，19.97mmol，收率：46.30％)和(s)-(2-(3-氨基苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(4.90g，19.57mmol，收率：45.37％)，为无色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝6.91(t,j＝7.7hz,1h),6.82-6.68(m,1h),6.49-6.27(m,3h),3.10-2.82(m,2h),2.73-2.58(m,1h),1.36(s,9h),1.14-1.02(m,3h)(未检测到活性n-h).lc-ms(es+,m/z):251.2[(m+h)+]；rt＝0.695min。步骤7：(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯在16℃下，向(r)-(2-(3-氨基苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(2.50g，9.99mmol，1当量)和3,5-二氯-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(2.20g，9.99mmol，1当量)的nmp(25ml)溶液中加入dipea(12.91g，99.87mmol，17.39ml，10当量)。混合物在n2气氛下加热至140℃持续10小时。将反应物倒入水(100ml)中，用乙酸乙酯(200ml*3)萃取。合并有机层，用水(150ml*2)、饱和盐水(150ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。残余物经制备型tlc(色谱柱：welch xtimate c18 250*70mm#10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：60％-95％，60分钟)纯化，得到(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(2.05g，4.60mmol，收率：46.04％)，为黄色固体。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.23-11.11(m,1h),8.35-8.18(m,1h),8.11-7.96(m,1h),7.60-7.46(m,1h),7.34(s,1h),7.31-7.23(m,1h),6.91(d,j＝7.5hz,1h),6.87-6.78(m,1h),3.15-2.98(m,2h),2.89-2.76(m,3h),1.36-1.32(m,9h),1.26(t,j＝7.5hz,3h),1.17(d,j＝6.9hz,3h).lc-ms(es+,m/z):378.1[(m+h-56)+]；rt＝3.120min.hrms(ei):m/z实测值:434.1916。中间体2步骤1：(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸叔丁酯向(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(1.52g，9.17mmol，2当量，hcl)的dmf(5ml)溶液中加入dipea(5.93g，45.85mmol，7.99ml，10当量)、2-(亚氨基(甲基)-λ5-氯烷基)乙酸叔丁酯(1.00g，4.58mmol，1当量，hcl)、hobt(619.49mg，4.58mmol，1当量)和edci(1.32g，6.88mmol，1.5当量)。混合物在25℃下搅拌10小时。将反应混合物过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：c18(250*50mm*10um)；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：15％-40％，10分钟)纯化，得到(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸叔丁酯(540mg，2.11mmol，收率：45.95％)，为棕色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝6.68-6.34(m,2h),4.23-3.95(m,2h),3.11-2.84(m,5h),2.18-2.07(m,6h),1.45-1.37(m,9h)lc-ms(es+,m/z):257.1[(m+h)+]；rt＝1.329min。步骤2：(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸向(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸叔丁酯(270mg，1.05mmol，1当量)的dcm(2ml)溶液中加入tfa(3.08g，27.01mmol，2ml，25.65当量)。混合物在16℃下搅拌2小时。将反应混合物过滤，减压浓缩，得到(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸(466mg，粗品)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝9.97(brd,j＝17.4hz,1h),6.97-6.48(m,2h),4.28-4.02(m,2h),3.95-3.82(m,2h),3.10(s,3h),2.76(br d,j＝13.4hz,6h).lc-ms(es+,m/z):201.1[(m+h)+]；rt＝0.089min。实施例53化合物503(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙-2-基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5,6-二乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯向(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，921.81μmol，1当量)、三乙基硼烷(903.31mg，9.22mmol，1.33ml，10当量)、cs2co3(901.03mg，2.77mmol，3当量)的dmf(5ml)和h2o(2ml)溶液中加入p(tbu)3pd g2(47.23mg，92.18μmol，0.1当量)。混合物在80℃于n2下搅拌5小时。将残余物溶于dcm(10ml)，加入清除剂(pd)，然后在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将混合物倒入水(10ml)中，用dcm(10ml*2)萃取。合并有机层，用水(20ml*2)、饱和盐水(20ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩。粗产物经硅胶色谱法(石油醚：乙酸乙酯＝3：1)纯化，得到(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5,6-二乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(350mg，818.64μmol，收率：88.81％)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.08(s,1h),8.20-8.10(m,1h),7.86(br d,j＝1.8hz,1h),7.66-7.48(m,2h),7.28-7.19(m,1h),6.89-6.78(m,2h),3.15-2.99(m,2h),2.92-2.80(m,3h),2.80-2.71(m,2h),1.36-1.16(m,18h).lcms(es+,m/z):428.2[(m+h)+]；rt＝0.947min。步骤2：(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺将(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5,6-二乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(440mg，1.03mmol，1当量)和hcl/meoh(4m，40ml，155.47当量)的混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩，得到(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺(350mg，粗品，hcl)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.12(s,1h),8.22-8.12(m,1h),7.90(br d,j＝13.0hz,4h),7.74-7.66(m,1h),7.63-7.57(m,1h),7.34-7.26(m,1h),6.96-6.89(m,1h),3.07-2.97(m,3h),2.85(q,j＝7.4hz,2h),2.76(q,j＝7.5hz,2h),1.33-1.22(m,9h)(hcl盐).lcms(es+,m/z):328.2[(m+h)+]；rt＝0.568min。步骤3：(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸(82.54mg，262.65μmol，1.91当量，tfa)、dipea(266.38mg，2.06mmol，359.01μl，15当量)、(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺(50mg，137.41μmol，1当量，hcl)的dmf(0.5ml)溶液中加入bop(91.16mg，206.11μmol，1.5当量)。混合物在0℃搅拌2小时。将混合物过滤，得到残余物。粗产物经制备型hplc(色谱柱：waters xbridge beh c18100*30mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：15％-55％，8分钟)纯化，得到(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺(20.15mg，38.51μmol，收率：28.02％，纯度：97.39％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.13-11.07(m,1h),8.19-8.12(m,1h),8.10-7.83(m,2h),7.66-7.61(m,1h),7.59-7.51(m,1h),7.28-7.21(m,1h),6.87-6.82(m,1h),6.28(d,j＝15.0hz,2h),3.94(d,j＝17.3hz,2h),3.29-3.21(m,2h),3.03-2.73(m,10h),2.19-2.05(m,6h),1.34-1.18(m,9h).lc-ms(es+,m/z):510.3[(m+h)+]；rt＝2.149min.hrms(ei):m/z[m]+实测值:510.3174。实施例54化合物504(r,e)-5-环丙基-3-((3-(1-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯向(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，921.81μmol，1当量)、环丙基硼酸(791.81mg，9.22mmol，10当量)和k2co3(382.20mg，2.77mmol，3当量)的dma(10ml)和h2o(5ml)溶液中加入pd(dppf)cl2(67.45mg，92.18μmol，0.1当量)。混合物在100℃于n2下搅拌10小时。将残余物溶于etoac(40ml)，加入清除剂(pd)，然后在20℃下搅拌1小时，然后过滤。将混合物倒入水(30ml)中，用etoac(20ml*2)萃取。合并有机层，用水(10ml*2)、饱和盐水(10ml)洗，干燥(na2so4)，过滤，浓缩。粗产物经硅胶硫醇凝胶色谱法(石油醚/etoac＝1/1)纯化，得到(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(320mg，728.02μmol，收率：78.98％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):440.3[(m+h)+]；rt＝1.047min。步骤2：(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺将(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，910.02μmol，1当量)和hcl/meoh(10ml)的混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物减压浓缩，得到(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(270mg，粗品，hcl)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):340.3[(m+h)+]；rt＝0.543min。步骤3：(r,e)-5-环丙基-3-((3-(1-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺向(e)-n-(4-(二甲基氨基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸(125.40mg，399.05μmol，3当量，tfa)的dmf(1ml)溶液中加入diea(171.91mg，1.33mmol，231.69μl，10当量)和(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(50mg，133.02μmol，1当量，hcl)，然后加入bop(88.25mg，199.52μmol，1.5当量)。将混合物在0℃搅拌2小时。过滤以得到滤液。粗产物经制备型hplc(色谱柱：waters xbridge prep obd c18 150*40mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：30％-70％，8分钟)纯化，得到(r,e)-5-环丙基-3-((3-(1-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(20.08mg，37.71μmol，收率：28.35％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.08(d,j＝5.0hz,1h),8.12(br d,j＝1.9hz,1h),8.08-7.84(m,1h),7.82(br d,j＝1.9hz,1h),7.54(br s,1h),7.34(br d,j＝8.0hz,1h),7.22(t,j＝7.8hz,1h),6.83(d,j＝7.5hz,1h),6.63-6.23(m,2h),3.93(d,j＝16.4hz,2h),3.28-3.21(m,2h),3.01(d,j＝5.1hz,1h),2.98-2.86(m,6h),2.77(s,1h),2.29(br t,j＝6.2hz,1h),2.16-2.06(m,6h),1.29-1.08(m,10h).lc-ms(es+,m/z):522.4[(m+h)+]；rt＝2.170min.hrms(ei):m/z[m]+实测值:522.3186。实施例55化合物505(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(双(甲基-d3)氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s,e)-3-((3-(2-(2-(4-(双(甲基-d3)氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基氨基)吡嗪-2-甲酰胺向(e)-4-[双(三氘代甲基)氨基]丁-2-烯酸(155.8mg，0.5994mmol，1.5当量)和n,n-二异丙基乙胺(0.6961ml，3.996mmol，10当量)的dmf(1ml)混合物中加入6-乙基-5-(异丙基氨基)-3-[3-[2-[[(2s)-2-(甲基氨基)丙酰基]氨基]乙基]苯胺基]吡嗪-2-甲酰胺二盐酸盐(200.0mg，0.3996mmol，1当量)。将混合物在氮气下冷却至0℃。注射滴加苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)-磷鎓六氟磷酸盐(265.1mg，0.5994mmol，1.5当量)的dmf(1ml)溶液。反应在0℃下搅拌2小时。将反应混合物用etoac(30ml)和nahco3(水溶液)(10ml)稀释，用nahco3(水溶液)(1x)、水(2x)和盐水(1x)洗。经na2so4干燥，过滤，浓缩。粗物质经硅胶柱(0-30％ meoh/etoac)纯化，得到149mg呈胶状的所需产物。将化合物溶解于acn(2ml)，过滤，用acn(2x 1ml)冲洗，加入水(6ml)，冻干以提供3-[3-[2-[[(2s)-2-[[(e)-4-[双(三氘代甲基)氨基]丁-2-烯酰基]-甲基-氨基]丙酰基]氨基]乙基]苯胺基]-6-乙基-5-(异丙基氨基)吡嗪-2-甲酰胺(134.0mg，0.2460mmol，收率：61.56％)，为白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.14(s,1h),7.74(s,1h),7.57(d,j＝12.0hz,1h),7.47(d,j＝3.3hz,1h),7.31(d,j＝8.2hz,1h),7.22–7.06(m,2h),6.76–6.62(m,2h),6.59–6.34(m,2h),4.92(q,j＝7.2hz,1h),4.20(dq,j＝13.4,6.6hz,1h),3.15-3.35(m,2h),2.97–2.85(m,2h),2.77(s,2h),2.70–2.57(m,3h),2.52(q,j＝7.3hz,2h),1.30–1.00(m,12h).lc-ms(es+,m/z):545.4[(m+h)+]。中间体3(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸步骤1：(e)-4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酸乙酯向(e)-4-溴丁-2-烯酸乙酯(5.00g，25.90mmol，3.57ml，1当量)和diea(10.04g，77.70mmol，13.53ml，3当量)的dmf(100ml)溶液中加入氮杂环丁烷盐酸盐(2.42g，25.90mmol，1当量)。混合物在60℃下搅拌1小时。将5个平行反应物减压浓缩。粗产物经制备型hplc(色谱柱：waters xbridge beh c18 250*70mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：0％-35％，20分钟)。将混合物用tfa调节至ph＝2，浓缩，得到(e)-4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酸乙酯(16.00g，56.49mmol，收率：43.62％，tfa)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝6.71(td,j＝5.2,15.7hz,1h),5.89(td,j＝1.9,15.8hz,1h),4.13-4.07(m,2h),3.14-3.07(m,6h),2.02-1.93(m,2h),1.20(t,j＝7.1hz,3h).lc-ms(es+,m/z):170.1[(m+h)+]；rt＝1.879min。步骤2：(e)-4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酸向(e)-4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酸乙酯(12.00g，46.08mmol，1当量，0.8tfa)的thf(40ml)和h2o(20ml)溶液中加入lioh.h2o(3.87g，92.15mmol，2当量)。混合物在25℃下搅拌10小时。将混合物减压浓缩，得到(e)-4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酸(5.50g，粗品)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝6.20(br d,j＝15.5hz,1h),5.73(d,j＝15.5hz,1h),3.04(d,j＝7.0hz,4h),2.96(dd,j＝1.1,5.9hz,2h),1.93(br d,j＝6.9hz,2h)(未检测到活性coo-h).lc-ms(es+,m/z):142.1[(m+h)+]；rt＝0.210min。步骤3：(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸叔丁酯向(e)-4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酸(5.50g，38.96mmol，2当量)和diea(25.18g，194.80mmol，33.93ml，10当量)的dmf(85ml)溶液中加入甲基甘氨酸叔丁酯盐酸盐(3.54g，19.48mmol，1当量)，然后加入bop(12.92g，29.22mmol，1.5当量)。混合物在25℃下搅拌10小时。将混合物减压浓缩。粗产物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c18250mm*100mm*10um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：10％-40％，20分钟)，然后用饱和nahco3(20ml)调节至ph＝7，用etoac(200ml*2)萃取。合并有机层，用水(200ml*2)、饱和盐水(150ml*1)洗，经na2so4干燥，过滤，浓缩，得到(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸叔丁酯(1.00g，3.73mmol，收率：19.13％)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):269.2[(m+h)+]；rt＝3.385min。步骤4：(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸将(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸叔丁酯(800mg，2.98mmol，1当量)、tfa(12.32g，108.05mmol，8.00ml，36.24当量)和dcm(16ml)的混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物减压浓缩，得到(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸(800mg，粗品，tfa)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):213.2[(m+h)+]；rt＝0.122min。实施例56化合物506(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯向(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，921.81μmol，1当量)、环丙基硼酸(791.81mg，9.22mmol，10当量)和k2co3(382.20mg，2.77mmol，3当量)的dma(10ml)和h2o(5ml)溶液中加入pd(dppf)cl2(67.45mg，92.18μmol，0.1当量)。混合物在100℃于n2下搅拌10小时。将残余物溶于etoac(40ml)，加入清除剂(pd)，然后在25℃搅拌1小时，然后过滤。将混合物倒入水(30ml)中，用etoac(20ml*2)萃取。合并有机层，用水(10ml*2)、饱和盐水(10ml*1)洗，经na2so4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。粗产物经硅胶硫醇凝胶色谱法(石油醚/etoac＝1/1)纯化，得到(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(320mg，728.02μmol，收率：78.98％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):440.3[(m+h)+]；rt＝1.047min。步骤2：(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺将(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，910.02mmol，1当量)和hcl/meoh(10ml，4m)的混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物减压浓缩，得到(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(270mg，粗品，hcl)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):340.3[(m+h)+]；rt＝0.543min。步骤3：(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺向(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸(347.19mg，1.06mmol，2当量，tfa)的dmf(1ml)溶液中加入diea(687.66mg，5.32mmol，926.76μl，10当量)和(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(200mg，532.06μmol，1当量，hcl)，然后加入bop(352.98mg，798.10μmol，1.5当量)。将混合物在0℃搅拌2小时。过滤得到滤液。粗产物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex c18 75*30mm*3um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％，25％-75％，8分钟)纯化，得到(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(89.9mg，160.04μmol，收率：30.08％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.08(d,j＝6.8hz,1h),8.12(br s,1h),8.08-7.79(m,2h),7.54(brd,j＝7.9hz,1h),7.35(br d,j＝8.0hz,1h),7.23(dt,j＝4.3,7.8hz,1h),6.83(br dd,j＝3.7,7.3hz,1h),6.50-6.14(m,2h),3.92(d,j＝16.4hz,2h),3.28-3.20(m,2h),3.14-3.08(m,3h),3.07-3.00(m,3h),2.96-2.77(m,6h),2.33-2.26(m,1h),1.95(td,j＝7.0,19.8hz,2h),1.27(t,j＝7.5hz,3h),1.21(t,j＝7.1hz,3h),1.13-1.08(m,4h).lc-ms(es+,m/z):534.3[(m+h)+]；rt＝2.265min.hrms(ei):m/z[m]+实测值:534.3185。实施例57化合物507(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-丙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(r)-(2-(3-((6-烯丙基-3-氨基甲酰基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯将(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，921.81μmol，1当量)、2-烯丙基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(1.55g，9.22mmol，10当量)、pd(dppf)cl2(67.45mg，92.18μmol，0.1当量)、cs2co3(901.03mg，2.77mmol，3当量)的二氧六环(20ml)和h2o(5ml)混合物在90℃于n2下搅拌16小时。将残余物倒入饱和edta(20ml)中并搅拌60分钟。水相用乙酸乙酯(20ml*3)萃取。合并的有机相用饱和盐水(20ml)洗，经无水na2so4干燥，过滤，真空浓缩。粗产物经硅胶硫醇凝胶色谱法(石油醚/etoac＝20/1至2/1)纯化，得到(r)-(2-(3-((6-烯丙基-3-氨基甲酰基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，682.52μmol，收率：74.04％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):440.2[(m+h)+]；rt＝0.865min。步骤2：(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-丙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯在25℃，向pd/c(10.0mg，682.52μmol，纯度：50％，1当量)的etoac 80ml)悬浮液中加入(r)-(2-(3-((6-烯丙基-3-氨基甲酰基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，682.52μmol，1当量)并在25℃于15psi的h2气氛下搅拌1小时。将混合物过滤并浓缩至干，得到(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-丙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，粗品)，为黄色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ＝10.69(s,1h),7.87(br d,j＝2.6hz,1h),7.66-7.52(m,2h),7.28-7.21(m,1h),6.84(br d,j＝7.7hz,1h),5.48-5.37(m,1h),4.50-4.36(m,1h),3.53-3.40(m,1h),3.22-3.10(m,1h),2.95-2.84(m,1h),2.79-2.71(m,4h),1.90-1.81(m,2h),1.47-1.33(m,9h),1.31-1.19(m,6h),1.03(t,j＝7.3hz,3h).lc-ms(es+,m/z):442.2[(m+h)+]；rt＝2.406min。步骤3：(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-丙基吡嗪-2-甲酰胺将(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-丙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(150mg，339.70μmol，1当量)和hcl/meoh(4m，20ml，235.50当量)的混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物浓缩至干，得到(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-丙基吡嗪-2-甲酰胺(140mg，粗品，hcl)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):342.2[(m+h)+]；rt＝0.585min。步骤4：(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-丙基吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸(193.39mg，592.73μmol，1.6当量，tfa)的dmf(1.5ml)溶液中加入dipea(478.79mg，3.70mmol，645.27μl，10当量)和(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-丙基吡嗪-2-甲酰胺(140mg，370.46μmol，1当量，hcl)。然后在0℃下加入bop(245.77mg，555.69μmol，1.5当量)。混合物在0℃下搅拌1小时。将混合物过滤。残余物经制备型hplc(色谱柱：waters xbridge beh c18100*30mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：30％-60％，8分钟)纯化，得到(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-丙基吡嗪-2-甲酰胺(70.0mg，127.03μmol，收率：34.29％，纯度：97.21％)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.16-11.02(m,1h),8.22-8.13(m,1h),8.11-7.82(m,2h),7.64(br d,j＝7.4hz,1h),7.52(br d,j＝7.9hz,1h),7.30-7.19(m,1h),6.88-6.80(m,1h),6.51-6.21(m,2h),3.93(d,j＝17.3hz,2h),3.26-3.19(m,2h),3.16-3.08(m,3h),3.07-2.96(m,4h),2.94-2.87(m,1h),2.83-2.69(m,6h),2.04-1.88(m,2h),1.82(sxt,j＝7.4hz,2h),1.27-1.17(m,6h),1.00(t,j＝7.4hz,3h).lc-ms(es+,m/z):536.3[(m+h)+]；rt＝2.328min.hrms(ei):m/z[m]+实测值:536.3325。实施例58化合物508(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5,6-二乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯在25℃下，向(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，921.81μmol，1当量)、三乙基硼烷(903.31mg，9.22mmol，1.33ml，10当量)、cs2co3(901.03mg，2.77mmol，3当量)的dmf(5ml)和h2o(2ml)溶液中加入p(tbu)3pd g2(47.23mg，92.18μmol，0.1当量)。将混合物在80℃于n2下搅拌5小时。将残余物溶于dcm(10ml)，加入清除剂(pd)，然后在25℃搅拌1小时，然后过滤。将混合物倒入水(10ml)中并用dcm(10ml*2)萃取。合并有机层，用水(20ml*2)、饱和盐水(20ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩。粗产物经硅胶色谱法(石油醚:乙酸乙酯＝3:1)纯化，得到(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5,6-二乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(350mg，818.64μmol，收率：88.81％)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.08(s,1h),8.20-8.10(m,1h),7.86(br d,j＝1.8hz,1h),7.66-7.48(m,2h),7.28-7.19(m,1h),6.89-6.78(m,2h),3.15-2.99(m,2h),2.92-2.80(m,3h),2.80-2.71(m,2h),1.36-1.16(m,18h).lcms(es+,m/z):428.2[(m+h)+]；rt＝0.947min。步骤2：(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺将(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5,6-二乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(440mg，1.03mmol，1当量)和hcl/meoh(4m，40ml，155.47当量)的混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩，得到(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺(350mg，粗品，hcl)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.12(s,1h),8.22-8.12(m,1h),7.90(br d,j＝13.0hz,4h),7.74-7.66(m,1h),7.63-7.57(m,1h),7.34-7.26(m,1h),6.96-6.89(m,1h),3.07-2.97(m,3h),2.85(q,j＝7.4hz,2h),2.76(q,j＝7.5hz,2h),1.33-1.22(m,9h)(hcl盐).lcms(es+,m/z):328.2[(m+h)+]；rt＝0.568min。步骤3：(r)-(2-((2-(3-((3-氨基甲酰基-5,6-二乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺(230mg，632.07μmol，1当量，hcl)、n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基甘氨酸(179.39mg，948.10μmol，1.5当量)、dipea(816.91mg，6.32mmol，1.10ml，10当量)的dmf(3ml)溶液中加入bop(419.33mg，948.10μmol，1.5当量)。混合物在0℃搅拌2小时。将混合物倒入水(5ml)中并用etoac(5ml*2)萃取。合并有机层，用水(10ml*2)、饱和盐水(10ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经硅胶色谱法(石油醚：乙酸乙酯＝1:3)纯化，得到(r)-(2-((2-(3-((3-氨基甲酰基-5,6-二乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(240mg，481.33μmol，收率：76.15％)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.13-11.06(m,1h),8.22-8.11(m,1h),7.93-7.77(m,2h),7.69-7.60(m,1h),7.59-7.48(m,1h),7.29-7.20(m,1h),6.89-6.80(m,1h),3.78-3.62(m,2h),3.29-3.19(m,2h),2.95-2.66(m,8h),1.41-1.18(m,18h).lcms(es+,m/z):499.4[(m+h)+]；rt＝0.836min。步骤4：(r)-5,6-二乙基-3-((3-(1-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(r)-(2-((2-(3-((3-氨基甲酰基-5,6-二乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(240mg，481.33μmol，1当量)和hcl/meoh(4m，27.69ml，230.13当量)的混合物在25℃搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩，得到(r)-5,6-二乙基-3-((3-(1-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(230mg，粗品)，为黄色固体。lcms(es+,m/z):399.4[(m+h)+]；rt＝0.579min。步骤5：(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向(r)-5,6-二乙基-3-((3-(1-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(200mg，459.81μmol，1当量，hcl)、(e)-4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酸(293.35mg，1.15mmol，2.5当量，tfa)、dipea(594.27mg，4.60mmol，800.91μl，10当量)的dmf(2ml)溶液中加入bop(305.05mg，689.72μmol，1.5当量)。将混合物在0℃下搅拌1小时。过滤混合物，得到残余物。粗产物经制备型hplc(色谱柱：waters xbridge beh c18100*30mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：30％-65％，8分钟)纯化，得到(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺(30.10mg，24.75μmol，收率：12.28％，纯度：97.89％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.11(d,j＝6.5hz,1h),8.20-8.04(m,1h),7.93-7.81(m,2h),7.68-7.52(m,2h),7.32-7.18(m,1h),6.92-6.80(m,1h),6.61-6.37(m,2h),6.29-6.14(m,1h),3.99-3.90(m,2h),3.29-3.22(m,2h),3.17-3.02(m,6h),2.98(s,2h),2.92-2.82(m,3h),2.81-2.73(m,3h),2.06-1.87(m,2h),1.35-1.19(m,9h)(tfa盐).1h nmr(400mhz,dmso-d6+d2o)δ＝11.01-10.92(m,1h),7.68-7.60(m,1h),7.51(br d,j＝7.8hz,1h),7.30-7.20(m,1h),6.90-6.80(m,1h),6.58-6.36(m,2h),3.92(br d,j＝19.6hz,2h),3.29-3.19(m,2h),3.16-3.09(m,3h),3.08-2.98(m,3h),2.95(s,2h),2.90-2.80(m,3h),2.78-2.71(m,3h),2.02-1.87(m,2h),1.32-1.16(m,9h).1h nmr(400mhz,dmso-d6,t＝273+80k)δ＝11.02-10.90(m,1h),8.06-7.90(m,1h),7.74-7.41(m,4h),7.30-7.20(m,1h),6.91-6.81(m,1h),6.66-6.10(m,2h),3.97-3.89(m,2h),3.29(br t,j＝6.4hz,2h),3.20-3.10(m,5h),3.00-2.71(m,9h),2.06-1.91(m,2h),1.35-1.22(m,9h).lc-ms(es+,m/z):522.2[(m+h)+]；rt＝2.267min.hrms(ei):m/z(m+h)+实测值:522.3195。实施例59化合物509(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(丙-1-烯-2-基)吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯向(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(400.00mg，921.81μmol，1当量)和4,4,5,5-四甲基-2-(丙-1-烯-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(774.50mg，4.61mmol，5当量)的dmf(4ml)溶液中加入pd(dppf)cl2(67.45mg，92.18μmol，0.1当量)和cs2co3(901.03mg，2.77mmol，3当量)。将混合物在100℃于n2气氛下搅拌10小时。将反应物倒入水(10ml)中并用etoac(20ml*3)萃取。合并有机层，用水(15ml*2)、饱和盐水(15ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。将残余物溶解于dcm(20ml)。加入清除剂(pd)，然后在25℃下搅拌1小时，然后过滤。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝20/1至1/1)纯化，得到(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(丙-1-烯-2-基)吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，682.52μmol，收率：74.04％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):440.3[(m+h)+]；rt＝1.053min。步骤2：(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯在h2气氛下，向(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(丙-1-烯-2-基)吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(190mg，432.26μmol，1当量)的meoh(30ml)溶液中加入pd/c(200mg，432.26μmol，纯度：50％，1当量)。将悬浮液脱气并用h2吹扫3次。混合物在15psi的h2下于20℃下搅拌1小时。将反应混合物过滤，减压浓缩，得到(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(160mg，362.35μmol，收率：83.83％)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):442.3[(m+h)+]；rt＝1.067min。步骤3：(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丙基吡嗪-2-甲酰胺将(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，226.47μmol，1当量)的hcl/meoh(30ml)混合物于25℃下搅拌1小时。将反应混合物过滤，减压浓缩，得到(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丙基吡嗪-2-甲酰胺(100mg，粗品)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):342.3[(m+h)+]；rt＝0.134min。步骤4：(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丙基吡嗪-2-甲酰胺向(e)-n-(4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酰基)-n-甲基甘氨酸(64.75mg，198.46μmol，1.5当量，tfa)的dmf(0.5ml)溶液中加入dipea(171.00mg，1.32mmol，230.45μl，10当量)、(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丙基吡嗪-2-甲酰胺(50mg，132.31μmol，1当量，hcl)和bop(87.77mg，198.46μmol，1.5当量)。混合物在0℃下搅拌1小时。将反应混合物过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：watersxbridge beh c18 100*30mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：30％-60％，8分钟)，得到(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丙基吡嗪-2-甲酰胺(14.02mg，25.67μmol，收率：19.40％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.14-11.02(m,1h),8.22-8.11(m,1h),8.10-7.83(m,2h),7.71-7.63(m,1h),7.54-7.44(m,1h),7.30-7.18(m,1h),6.89-6.77(m,1h),6.53-6.13(m,2h),3.96-3.89(m,2h),3.28-3.20(m,3h),3.14-3.08(m,3h),3.07-3.00(m,3h),2.97-2.84(m,3h),2.81-2.77(m,3h),2.01(s,2h),1.27-1.18(m,12h).lc-ms(es+,m/z):536.3[(m+h)+]；rt＝2.323min.hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:536.3359。实施例60化合物5106-乙基-5-异丁基-3-((3-(2-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：6-乙基-5-异丁基-3-((3-(2-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺向6-乙基-5-异丁基-3-[3-[2-[[2-(甲基氨基)乙酰基]氨基]乙基]苯胺基]吡嗪-2-甲酰胺盐酸盐(97.60mg，0.2174mmol，1当量)的dmf(1ml)悬浮液中加入n,n-二异丙基乙胺(0.3786ml，2.174mmol，10当量)。将混合物冷却至0℃。注射滴加丙烯酰氯(0.02650ml，0.3261mmol，1.5当量)的dmf(0.1ml)溶液。将反应物从0℃继续搅拌至室温，持续2小时。混合物用etoac(20ml)稀释，用nahco3(水溶液)(1x)、水(2x)、盐水(1x)洗。经mgso4干燥，过滤，浓缩。将粗产物溶于meoh/dcm(1:1)，装载至硅胶上，通过12g硅胶柱(0-5％ meoh/etoac)纯化，得到6-乙基-5-异丁基-3-[3-[2-[[2-[甲基(丙-2-烯酰基)氨基]乙酰基]氨基]乙基]苯胺基]吡嗪-2-甲酰胺(76.00mg，0.1621mmol，收率：74.56％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso)δ10.99(d,j＝2.5hz,1h),8.10(s,1h),7.98(dt,j＝56.4,5.6hz,1h),7.82(d,j＝2.6hz,1h),7.49(d,j＝4.4hz,2h),7.16(t,j＝7.9hz,1h),6.80–6.73(m,1h),6.73–6.39(m,1h),6.01(ddd,j＝26.5,16.7,2.5hz,1h),5.56(ddd,j＝47.1,10.4,2.5hz,1h),3.90(d,j＝19.0hz,2h),3.31–3.19(m,2h),2.85(d,j＝83.1hz,3h),2.73–2.54(m,6h),2.18(hept,j＝6.8hz,1h),1.17(t,j＝7.4hz,3h),0.91(d,j＝6.6hz,6h).lcms(es+,m/z):467.400[(m+h)+]。实施例61化合物5116-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯向n-[2-[3-[(3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基-吡嗪-2-基)氨基]苯基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(3.465g，8.25mmol，1当量)的1,4-二氧六环(10ml)溶液中加入n-乙基甲胺(7.173ml，82.52mmol，10当量)，随后加入n,n-二异丙基乙胺(1.437ml，8.252mmol，1当量)。反应混合物加热回流70小时。将反应混合物在旋转蒸发仪上浓缩。将残余物在etoac(100ml)和nahco3(50ml)/水(50ml)之间分配，然后分离各层。水相用etoac(50ml)萃取。合并的有机物用水(2x)洗并用盐水洗(1x)。经mgso4干燥，过滤，浓缩。将粗产物于80g硅胶柱(0-40％ etoac/己烷)上纯化，得到n-[2-[3-[[3-氨基甲酰基-5-乙基-6-[乙基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]氨基]苯基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.650g，5.988mmol，收率：72.57％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso)δ11.10(s,1h),7.74(d,j＝3.0hz,1h),7.58(s,1h),7.46(d,j＝3.0hz,1h),7.44–7.38(m,1h),7.21(t,j＝7.8hz,1h),6.89(t,j＝5.7hz,1h),6.83–6.73(m,1h),3.47(q,j＝7.1hz,2h),3.14(dt,j＝8.2,6.1hz,2h),3.05(s,3h),2.74(q,j＝7.4hz,2h),2.67(dd,j＝8.5,6.4hz,2h),1.37(s,9h),1.22(dt,j＝12.2,7.2hz,6h).lcms(es+,m/z):443.304[(m+h)+]。步骤2：3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺在环境温度下，向n-[2-[3-[[3-氨基甲酰基-5-乙基-6-[乙基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]氨基]苯基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(2.650g，5.988mmol，1当量)的1,4-二氧六环(15ml)溶液中加入4n hcl的二氧六环(15ml，10当量)溶液。反应混合物搅拌5小时。将反应混合物用etoac(30ml)稀释，过滤，用etoac(3x)冲洗，真空干燥，得到3-[3-(2-氨基乙基)苯胺基]-6-乙基-5-[乙基(甲基)氨基]吡嗪-2-甲酰胺二盐酸盐(2.440g，5.874mmol，收率：98.10％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso)δ11.13(s,1h),8.07(s,3h),7.74(s,1h),7.63–7.38(m,3h),7.30–7.21(m,1h),6.90–6.83(m,1h),3.45(q,j＝7.1hz,2h),3.11–2.95(m,5h),2.87(dd,j＝9.7,6.2hz,2h),2.73(q,j＝7.3hz,2h),1.21(dt,j＝11.9,7.2hz,6h).lcms(es+,m/z):343.230[(m+h)+]。步骤3：(2-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向2-[叔丁氧基羰基(甲基)氨基]乙酸(273.3mg，1.445mmol，1.2当量)和3-[3-(2-氨基乙基)苯胺基]-6-乙基-5-[乙基(甲基)氨基]吡嗪-2-甲酰胺二盐酸盐(500.0mg，1.204mmol，10当量)的dmf(1ml)溶液中注射滴加n,n-二异丙基乙胺(2.097ml，12.04mmol，10当量)，随后滴加苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)-磷鎓六氟磷酸盐(638.9mg，1.445mmol，1.2当量)的dmf(2ml)溶液。将反应物从0℃至室温搅拌1小时。反应混合物用etoac(60ml)稀释，用nahco3(水溶液)(1x)、水(2x)、盐水(1x)洗。经mgso4干燥，过滤，浓缩。粗产物于40g硅胶柱(0-100％ etoac/己烷)上纯化，得到n-[2-[2-[3-[[3-氨基甲酰基-5-乙基-6-[乙基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]氨基]苯基]乙基氨基]-2-氧代-乙基]-n-甲基氨基甲酸叔丁酯(537.0mg，1.046mmol，收率：86.85％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso)δ11.11(s,1h),7.91(s,1h),7.73(d,j＝3.0hz,1h),7.60(s,1h),7.44(dd,j＝11.2,5.6hz,2h),7.22(t,j＝7.8hz,1h),6.81(d,j＝7.5hz,1h),3.72(d,j＝14.5hz,2h),3.46(q,j＝7.0hz,2h),3.32(s,2h),3.05(s,3h),2.77(s,3h),2.73(dd,j＝12.6,5.2hz,4h),1.37(d,j＝27.3hz,9h),1.22(dt,j＝12.7,7.2hz,6h).lcms(es+,m/z):514.400[(m+h)+]。步骤4：6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺在室温下，向n-[2-[2-[3-[[3-氨基甲酰基-5-乙基-6-[乙基(甲基)氨基]吡嗪-2-基]氨基]苯基]乙基氨基]-2-氧代-乙基]-n-甲基-氨基甲酸叔丁酯(520.0mg，1.012mmol，1当量)的二氧六环(3ml)溶液中滴加4n hcl的二氧六环(3.0ml，12当量)溶液。将反应物搅拌反应2小时。去除溶剂。将残余物用mtbe/etoac/meoh(1:2:2)研磨，过滤，用etoac(5x)冲洗，真空干燥，得到6-乙基-5-[乙基(甲基)氨基]-3-[3-[2-[[2-(甲基氨基)乙酰基]氨基]乙基]苯胺基]吡嗪-2-甲酰胺二盐酸盐(442.0mg，0.9086mmol，收率：89.75％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso)δ11.04(s,1h),8.85(s,2h),8.55(t,j＝5.6hz,1h),7.67(s,1h),7.51(t,j＝2.0hz,1h),7.40(dd,j＝8.0,2.2hz,2h),7.16(t,j＝7.8hz,1h),6.77(d,j＝7.5hz,1h),3.57(t,j＝5.8hz,2h),3.39(q,j＝7.0hz,2h),3.31(q,j＝6.8hz,2h),3.10(s,1h),2.98(s,3h),2.66(dd,j＝8.6,6.6hz,4h),1.14(dt,j＝11.4,7.2hz,6h).lcms(es+,m/z):414.300[(m+h)+]。步骤5：6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((3-(2-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向6-乙基-5-[乙基(甲基)氨基]-3-[3-[2-[[2-(甲基氨基)乙酰基]氨基]乙基]苯胺基]吡嗪-2-甲酰胺二盐酸盐(100.0mg，0.2056mmol，1当量)的dmf悬浮液中加入n,n-二异丙基乙胺(0.3581ml，2.056mmol，10当量)，然后加入丙烯酰氯(0.01840ml，0.2261mmol，1.1当量)。将反应混合物在0℃下搅拌45分钟。加入丙烯酰氯(10.0μl)，再继续搅拌30分钟。反应混合物用etoac(20ml)稀释，用nahco3(水溶液)(1x)、水(2x)、盐水(1x)洗。经mgso4干燥，过滤，浓缩。将粗产物溶于meoh/dcm(1:1)，装载在硅胶上，经12g硅胶柱(0-5％ meoh/etoac)纯化，得到6-乙基-5-[乙基(甲基)氨基]-3-[3-[2-[[2-[甲基(丙-2-烯酰基)氨基]乙酰基]氨基]乙基]苯胺基]吡嗪-2-甲酰胺(69.00mg，0.1468mmol，收率：71.43％)，为灰白色固体。1h nmr(400mhz,dmso)δ11.04(d,j＝2.0hz,1h),7.98(dt,j＝55.5,5.6hz,1h),7.67(d,j＝3.0hz,1h),7.50(dt,j＝8.8,2.0hz,1h),7.43–7.31(m,2h),7.14(t,j＝7.8hz,1h),6.76–6.71(m,1h),6.71–6.39(m,1h),6.01(ddd,j＝26.2,16.7,2.5hz,1h),5.57(ddd,j＝46.5,10.4,2.5hz,1h),3.90(d,j＝18.7hz,2h),3.39(q,j＝7.0hz,2h),3.22(d,j＝7.8hz,2h),2.97(s,3h),2.85(d,j＝83.8hz,3h),2.70–2.57(m,4h),1.14(dt,j＝12.9,7.2hz,6h).lcms(es+,m/z):468.300[(m+h)+]。实施例62化合物512(r)-6-乙基-5-异丁基-3-((3-(1-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯向(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(250mg，576.13μmol，1当量)、异丁基硼酸(587.30mg，5.76mmol，10当量)和cs2co3(563.14mg，1.73mmol，3当量)的二氧六环(2.5ml)和h2o(0.5ml)溶液中加入pd(dppf)cl2(42.16mg，57.61μmol，0.1当量)。混合物在100℃于n2下搅拌10小时。将混合物倒入水(5ml)中并用etoac(5ml*2)萃取。合并有机层，用水(10ml*2)、饱和盐水(10ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经硅胶色谱法(石油醚：乙酸乙酯＝2:1)纯化，得到(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(160mg，351.19μmol，收率：60.96％)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.08-11.02(m,1h),8.16(br s,1h),7.92-7.82(m,1h),7.70-7.62(m,1h),7.49-7.41(m,1h),7.27-7.18(m,1h),6.83(br d,j＝7.0hz,2h),3.16-2.99(m,2h),2.91-2.81(m,1h),2.76(q,j＝7.5hz,2h),2.68(d,j＝7.1hz,2h),2.32-2.21(m,1h),1.39-1.31(m,9h),1.24(t,j＝7.4hz,3h),1.18(br d,j＝6.9hz,3h),1.03-0.94(m,6h).lcms(es+,m/z):456.2[(m+h)+]；rt＝1.002min。步骤2：(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丁基吡嗪-2-甲酰胺将(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(180mg，395.09mmol，1当量)和hcl/meoh(4m，25ml，253.11当量)的混合物在25℃搅拌4小时。将反应混合物减压浓缩，得到(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丁基吡嗪-2-甲酰胺(160mg，粗品)，为黄色固体。lcms(es+,m/z):356.3[(m+h)+]；rt＝0.635min。步骤3：(r)-(2-((2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丁基吡嗪-2-甲酰胺(270mg，688.89mmol，1当量，hcl)、n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基甘氨酸(260.69mg，1.38mmol，2当量)的dmf(2.5ml)溶液中加入nmi(565.60mg，6.89mmol，549.13μl，10当量)，然后加入tcfh(289.93mg，1.03mmol，1.5当量)。混合物在0℃搅拌1小时。将混合物倒入水(5ml)中，用etoac(5ml*2)萃取。合并有机层，用水(10ml*2)、饱和盐水(10ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩。粗产物经硅胶色谱法(石油醚：乙酸乙酯＝1:1)纯化，得到(r)-(2-((2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，569.62μmol，收率：82.69％)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.15-11.09(m,1h),8.28-8.16(m,1h),7.98-7.82(m,2h),7.73(brs,1h),7.57-7.47(m,1h),7.34-7.25(m,1h),6.94-6.87(m,1h),3.83-3.69(m,2h),3.30(brs,2h),3.01-2.89(m,1h),2.86-2.78(m,5h),2.75-2.71(m,2h),2.38-2.26(m,1h),1.46-1.24(m,15h),1.08-0.99(m,6h).lc-ms(es+,m/z):527.3[(m+h)+]；rt＝0.916min。步骤4：(r)-6-乙基-5-异丁基-3-((3-(1-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(r)-(2-((2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(180mg，341.77μmol，1当量)和hcl/meoh(4m，25ml，292.59当量)的混合物在25℃下搅拌4小时。将反应混合物减压浓缩，得到(r)-6-乙基-5-异丁基-3-((3-(1-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(185mg，粗品)，为黄色固体。lcms(es+,m/z):427.3[(m+h)+]；rt＝0.709min。步骤5：(r)-6-乙基-5-异丁基-3-((3-(1-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向(r)-6-乙基-5-异丁基-3-((3-(1-(2-(甲氨基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(370mg，799.11μmol，1当量，hcl)和dipea(619.68mg，4.79mmol，835.14μl，6当量)的dmf(4ml)溶液中加入丙烯酰氯(86.79mg，958.93μmol，78.19μl，1.2当量)。将混合物在0℃搅拌1小时。过滤混合物，得到残余物。粗产物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c18 75*30mm*3um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：35％-65％，8分钟)纯化，得到(r)-6-乙基-5-异丁基-3-((3-(1-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(72.26mg，149.53μmol，收率：18.71％，纯度：99.45％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.11-11.03(m,1h),8.23-8.12(m,1h),8.10-7.81(m,2h),7.71-7.59(m,1h),7.55-7.43(m,1h),7.29-7.19(m,1h),6.89-6.40(m,2h),6.16-5.97(m,1h),5.74-5.51(m,1h),4.01-3.90(m,2h),3.29-3.20(m,2h),3.04-2.96(m,1h),2.94-2.85(m,1h),2.82(br s,4h),2.70-2.64(m,2h),2.32-2.20(m,1h),1.29-1.16(m,6h),1.02-0.93(m,6h).lc-ms(es+,m/z):481.3[(m+h)+]；rt＝2.757min.hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:481.2929。实施例63化合物513(r)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((3-(1-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯将(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，1.15mmol，1当量)、dipea(743.15mg，5.75mmol，1.00ml，5当量)、n-甲基乙胺(1.36g，23.00mmol，1.98ml，20当量)和dma(5ml)的混合物在密封试管中于100℃搅拌16小时。将反应液倒入水(50ml)中，用etoac(30ml*2)萃取。合并有机层，用水(10ml*2)、饱和盐水(10ml)洗，经na2so4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。粗产物经硅胶色谱法(石油醚/etoac＝3/1)纯化，得到(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(450mg，969.82μmol，收率：84.33％，纯度：98.4％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.11(s,1h),7.74(br d,j＝2.5hz,1h),7.57(s,1h),7.46(br d,j＝2.4hz,1h),7.39(br d,j＝7.8hz,1h),7.21(t,j＝7.8hz,1h),6.87-6.76(m,2h),3.46(q,j＝7.0hz,2h),3.14-2.94(m,5h),2.87-2.79(m,1h),2.73(q,j＝7.3hz,2h),1.39-1.29(m,9h),1.27-1.14(m,10h).lcms(es+,m/z):457.2[(m+h)+]；rt＝0.944min。步骤2：(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(r)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(450mg，985.59mmol，1当量)和hcl/meoh(4m，30ml，121.75当量)的混合物在25℃搅拌2小时。将混合物浓缩，得到3(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(400mg，粗品，hcl)，为黄色固体。lcms(es+,m/z):357.1[(m+h)+]；rt＝0.598min。步骤3：(r)-(2-((2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基甘氨酸(288.92mg，1.53mmol，1.5当量)、nmi(835.82mg，10.18mmol，811.48μl，10当量)的dmf(10ml)溶液中加入(r)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(400mg，1.02mmol，1当量，hcl)，然后加入tcfh(428.45mg，1.53mmol，1.5当量)。混合物在0℃搅拌2小时。将反应液倒入水(30ml)中，用etoac(25ml*2)萃取。合并有机层，用水(10ml*2)、饱和盐水(10ml)洗，经na2so4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。粗产物经硅胶色谱法(石油醚/etoac＝2/1)纯化，得到(r)-(2-((2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(450mg，782.21μmol，收率：76.84％，纯度：91.72％)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):528.4[(m+h)+]；rt＝0.852min。步骤4：(r)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((3-(1-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(r)-(2-((2-(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(450mg，852.83μmol，1当量)、hcl/meoh(4m，27.00ml，126.64当量)的混合物在25℃下搅拌2小时。浓缩混合物，得到(r)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((3-(1-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(400mg，粗品，hcl)，为黄色油状物。lcms(es+,m/z):428.4[(m+h)+]；rt＝0.582min。步骤5：(r)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((3-(1-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向(r)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((3-(1-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(350mg，754.31μmol，1当量，hcl)、dipea(487.44mg，3.77mmol，656.93μl，5当量)的dmf(3ml)溶液中加入丙烯酰氯(75.10mg，829.74μmol，67.66μl，1.1当量)。将混合物在0℃搅拌1小时。过滤混合物，得到残余物。粗产物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c1875*30mm*3um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：30％-60％，8分钟)纯化，得到(r)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((3-(1-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(76.04mg，157.89μmol，收率：20.93％，纯度：100％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.13(s,1h),8.09-7.85(m,1h),7.74(br s,1h),7.58(br d,j＝6.9hz,1h),7.51-7.37(m,2h),7.22(t,j＝7.8hz,1h),6.88-6.80(m,1h),6.79-6.39(m,1h),6.16-5.97(m,1h),5.73-5.48(m,1h),3.95(d,j＝14.6hz,2h),3.31(br s,2h),3.27-3.20(m,2h),3.09-2.97(m,5h),2.89(td,j＝7.6,15.5hz,1h),2.81-2.70(m,3h),1.25-1.16(m,9h)；hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:482.2856.lc-ms(es+,m/z):482.3[(m+h)+]；rt＝2.605min。实施例64化合物5156-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((2-(2-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(2-(4-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯将(2-(4-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，1.19mmol，1当量)、n-甲基乙胺(1.40g，23.76mmol，2.04ml，20当量)、dipea(767.65mg，5.94mmol，1.03ml，5当量)的dma(3ml)混合物加热至100℃，保持10小时。将混合物倒入水(60ml)中，用etoac(60ml*2)萃取。有机层用水(40ml*2)、饱和盐水(40ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，所得粗产物经硅胶色谱法(石油醚：乙酸乙酯＝1:1)纯化，得到(2-(4-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，901.83μmol，收率：75.91％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ＝11.06(br s,1h),8.25(d,j＝5.8hz,1h),7.62-7.49(m,2h),7.39(brd,j＝3.3hz,1h),5.29-5.24(m,1h),5.20-5.12(m,1h),3.46(q,j＝7.0hz,4h),3.05(s,3h),2.86(br t,j＝5.9hz,2h),2.70(q,j＝7.3hz,2h),1.35(s,9h),1.22(dt,j＝4.3,7.2hz,6h).lc-ms(es+,m/z):444.4[(m+h)+]；rt＝0.390min。步骤2：3-((2-(2-氨基乙基)吡啶-4-基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(2-(4-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，901.83μmol，1当量)、hcl/meoh(4m，26.67ml，118.28当量)的混合物在25℃搅拌1小时。将混合物浓缩至干，得到3-((2-(2-氨基乙基)吡啶-4-基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2甲酰胺(400mg，粗品，hcl)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):344.3[(m+h)+]；rt＝0.320min。步骤3：(2-((2-(4-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基甘氨酸(398.45mg，2.11mmol，2当量)、nmi(864.51mg，10.53mmol，839.33μl，10当量)的dmf(5ml)溶液中加入3-((2-(2-氨基乙基)吡啶-4-基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(400mg，1.05mmol，1当量，hcl)，然后在0℃下加入tcfh(443.15mg，1.58mmol，1.5当量)。混合物在0℃下搅拌1小时。将混合物倒入水(60ml)中，用etoac(60ml*2)萃取。合并有机层，用水(40ml*2)、饱和盐水(40ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩。粗产物经硅胶色谱法(石油醚：乙酸乙酯＝1:1)纯化，得到(2-((2-(4-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，777.27μmol，收率：73.82％)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):515.3[(m+h)+]；rt＝0.399min。步骤4：6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((2-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(2-((2-(4-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，777.27μmol，1当量)、hcl/meoh(4m，30.00ml，154.39当量)的混合物在25℃搅拌1小时。将混合物浓缩至干，得到6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((2-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(400mg，粗品，hcl)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):415.3[(m+h)+]；rt＝0.319min。步骤5：6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((2-(2-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((2-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(200mg，410.32μmol，1当量，2hcl)、dipea(549.20mg，4.25mmol，740.16μl，10.36当量)的dcm(10ml)溶液中加入丙烯酰氯(37.14mg，410.32μmol，33.34μl，1当量)。将混合物在0℃搅拌1小时。将混合物过滤，然后经制备型hplc(柱：watersxbridge prep obd c18 150*40mm*10um；流动相：[a:h2o(10mm nh4hco3)；b:acn]；b％：5.00％-35.00％，8.00分钟)纯化，得到6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((2-(2-(2-(n-甲基丙烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(37.25mg，79.50μmol，收率：19.38％，纯度：100％)，为白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.42(s,1h),8.24(d,j＝5.5hz,1h),8.17-7.88(m,1h),7.80(br d,j＝0.7hz,1h),7.63-7.48(m,2h),7.47-7.34(m,1h),6.81-6.42(m,1h),6.14-5.95(m,1h),5.71-5.48(m,1h),3.92(d,j＝19.1hz,2h),3.51-3.35(m,4h),3.05(s,3h),2.99(s,1.5h),2.80-2.69(m,5.5h),1.23-1.16(m,6h).lc-ms(es+,m/z):469.2[(m+h)+]；rt＝2.006min.hrms(ei):m/z(m+h)+实测值:469.2668。实施例65化合物516(e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)-5-氟苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯向(3-氨基-5-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(2.00g，7.86mmol，1当量)和3,5-二氯-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(1.73g，7.86mmol，1当量)的nmp(20ml)溶液中加入dipea(40.66g，314.59mmol，54.80ml，40当量)。在n2气氛下，将混合物在140℃搅拌72小时。将反应混合物倒入h2o(100ml)中，用etoac(150ml*3)萃取。分离有机相，用水(200ml*2)、饱和盐水(100ml*3)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝20/1至1/5)纯化，得到(3-((3-氨甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.40g，3.20mmol，收率：40.65％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.42-11.30(m,1h),8.37-8.26(m,1h),8.18-8.04(m,1h),7.71-7.60(m,1h),7.04-6.95(m,1h),6.93-6.85(m,1h),6.75-6.69(m,1h),3.18-3.14(m,2h),2.86-2.80(m,2h),2.72-2.67(m,2h),1.36-1.33(m,9h),1.26(t,j＝7.6hz,3h).lc-ms(es+,m/z):382.2[(m+h-56)+]；rt＝0.897min。步骤2：(3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯向(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(500.00mg，1.14mmol，1当量)和环丙基硼酸(490.40mg，5.71mmol，5当量)的二氧六环(10ml)溶液中加入csf(607.07mg，4.00mmol，147.53μl，3.5当量)和pd(dppf)cl2.ch2cl2(93.25mg，114.18μmol，0.1当量)。在n2气氛下，将混合物在95℃搅拌10小时。将反应液倒入水(50ml)中，用etoac(80ml*3)萃取。合并有机层，用水(80ml*2)、饱和盐水(60ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。将残余物溶于dcm(30ml)。加入清除剂(pd)，然后在25℃搅拌1小时，然后过滤。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝20/1至1/5)纯化，得到(3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(310mg，698.96μmol，收率：61.21％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.28-11.18(m,1h),8.27-8.09(m,1h),7.97-7.83(m,1h),7.65-7.52(m,1h),7.07-6.95(m,1h),6.94-6.82(m,1h),6.69-6.58(m,1h),3.20-3.10(m,2h),2.97-2.86(m,2h),2.70-2.65(m,2h),2.34-2.28(m,1h),1.37-1.31(m,9h),1.27(t,j＝7.5hz,3h),1.16-1.10(m,2h),1.09-1.02(m,2h).lc-ms(es+,m/z):444.3[(m+h)+]；rt＝0.623min。步骤3：3-((3-(2-氨基乙基)-5-氟苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺将(3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(300.00mg，676.42μmol，1当量)的hcl/meoh(40ml)混合物脱气，并用n2吹扫3次，然后将混合物在25℃下于n2气氛下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩，得到3-((3-(2-氨基乙基)-5-氟苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(249mg，粗品，hcl)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):344.2[(m+h-56)+]；rt＝0.407min。步骤4：(2-((3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯向n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基甘氨酸(248.05mg，1.31mmol，2当量)的dmf(3ml)溶液中加入dipea(847.20mg，6.56mmol，1.14ml，10当量)、3-((3-(2-氨基乙基)-5-氟苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(249mg，655.51μmol，1当量，hcl)和bop(434.88mg，983.26μmol，1.5当量)。将混合物在25℃搅拌1小时。lcms显示反应完成。将反应物倾入h2o(20ml)中，用etoac(30ml*3)萃取。合并有机层，用水(35ml*2)、饱和盐水(30ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝20/1至1/1)纯化，得到(2-((3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(320mg，621.85μmol，收率：94.87％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.26-11.20(m,1h),8.21-8.12(m,1h),7.95-7.85(m,2h),7.64-7.53(m,1h),7.07-6.98(m,1h),6.71-6.59(m,1h),3.74-3.65(m,2h),2.96-2.85(m,3h),2.78-2.66(m,6h),2.34-2.29(m,1h),1.38(s,3h),1.33-1.23(m,9h),1.15-1.10(m,2h),1.09-1.03(m,2h).lc-ms(es+,m/z):515.3[(m+h)+]；rt＝0.571min。步骤5：5-环丙基-6-乙基-3-((3-氟-5-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(2-((3-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-5-氟苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(320mg，621.85μmol，1当量)的hcl/meoh(40ml，4m)混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩，得到5-环丙基-6-乙基-3-((3-氟-5-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(300mg，粗品，hcl)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):415.3[(m+h)+]；rt＝0.408min。步骤6：(e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)-5-氟苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺向(e)-4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酸(254.66mg，997.92μmol，3当量，tfa)的dmf(1.5ml)溶液中加入dipea(429.92mg，3.33mmol，579.40μl，10当量)、5-环丙基-6-乙基-3-((3-氟-5-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(150mg，332.64μmol，1当量，hcl)和bop(220.68mg，498.96μmol，1.5当量)。将混合物在25℃搅拌1小时。过滤反应混合物，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：2_phenomenex gemini c18 75*40mm*3um；流动相：[水(0.05％ nh3h2o+10mm nh4hco3)-acn]；梯度：经8.0分钟从30％到55％ b)纯化，得到(e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)-5-氟苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(37.32mg，69.42μmol，收率：20.87％)，为白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.25-11.18(m,1h),8.17-8.12(m,1h),8.11-7.88(m,1h),7.87-7.84(m,1h),7.65-7.51(m,1h),7.03-6.95(m,1h),6.68-6.57(m,1h),6.48-6.13(m,2h),3.95-3.83(m,2h),3.36-3.30(m,2h),3.11-3.05(m,3h),3.03-2.94(m,5h),2.92-2.84(m,2h),2.80-2.74(m,1h),2.72-2.63(m,2h),2.32-2.24(m,1h),1.98-1.83(m,2h),1.24(t,j＝7.5hz,3h),1.13-1.00(m,4h).lc-ms(es+,m/z):538.3[(m+h)+]；rt＝2.892min.hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:548.2975。实施例66化合物516a(e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，将苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)-磷鎓六氟磷酸盐(181.84mg，0.4112mmol，2当量)加至(e)-4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酸；2,2,2-三氟乙酸(104.92mg，0.4112mmol，2当量)、6-乙基-5-[乙基(甲基)氨基]-3-[3-[2-[[2-(甲基氨基)乙酰基]氨基]乙基]苯胺基]吡嗪-2-甲酰胺二盐酸盐(100.0mg，0.2056mmol，1当量)和n,n-二异丙基乙胺(318.82mg，2.4669mmol，0.4297ml，12当量)的dmf(0.60ml)溶液中。将反应搅拌1小时。反应物用etoac(20ml)稀释，用饱和nahco3(水溶液)(1x)、水(2x)、盐水洗。经mgso4干燥，过滤，浓缩。残余物经制备型hplc(gilson)于gemini 10um nx-c18110a 150*30mm上纯化，用(b/a)＝5-95％ acn(含0.1％ tfa)/水(含0.1％ tfa)洗脱。合并纯级分(purefraction)，用nahco3(水溶液)调节ph＝10，用etoac(3x)萃取，经mgso4干燥，过滤，浓缩。溶于1:1acn/水(1ml)中，冻干，得到(e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(30.0mg，0.05230mmol，收率：25.43％)，为白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.12(d,j＝6.9hz,1h),8.13(t,j＝5.5hz,0.5h),7.94(t,j＝5.7hz,0.5h),7.73(d,j＝3.1hz,1h),7.57(s,1h),7.51–7.39(m,2h),7.21(td,j＝7.9,4.0hz,1h),6.80(d,j＝7.6hz,1h),6.50–6.19(m,2h),3.94(d,j＝19.1hz,2h),3.45(q,j＝7.0hz,2h),3.27(t,j＝7.1hz,2h),3.17–3.09(m,3h),3.09–2.97(m,7h),2.84–2.64(m,6h),1.95(dp,j＝21.0,7.0hz,2h),1.21(dt,j＝12.5,7.2hz,6h).lc-ms(es+,m/z):537.400[(m+h)+]。实施例67化合物517(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丁基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丁基吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向(r)-6-乙基-5-异丁基-3-((3-(1-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(230mg，496.74μmol，1当量，hcl)、(e)-4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酸(316.91mg，1.24mmol，2.5当量，tfa)、dipea(642.01mg，4.97mmol，865.24μl，10当量)的dmf(2.5ml)溶液中加入bop(329.55mg，745.12μmol，1.5当量)。将混合物在0℃搅拌1小时。过滤混合物，得到残余物。粗产物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c1875*30mm*3um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：20％-50％，8分钟)纯化，得到(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丁基吡嗪-2-甲酰胺(66.07mg，114.96μmol，收率：23.14％，纯度：95.65％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.08(d,j＝2.4hz,1h),9.99-9.78(m,1h),8.19(brs,1h),8.17-7.95(m,1h),7.93-7.84(m,1h),7.69-7.60(m,1h),7.57-7.44(m,1h),7.30-7.19(m,1h),6.91-6.74(m,1h),6.69-6.57(m,1h),6.52-6.35(m,1h),4.22-3.86(m,8h),3.28-3.21(m,2h),3.04-3.00(m,1h),2.94-2.84(m,1h),2.81-2.72(m,4h),2.69-2.66(m,2h),2.38-2.21(m,3h),1.27-1.19(m,6h),0.98(d,j＝6.5hz,6h).1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝7.67(br d,j＝8.9hz,1h),7.46-7.37(m,1h),7.28-7.19(m,1h),6.89-6.71(m,2h),6.47-6.31(m,1h),4.16-4.02(m,2h),3.94-3.82(m,6h),3.28-3.17(m,2h),3.00-2.95(m,2h),2.91-2.81(m,1h),2.76-2.69(m,3h),2.64(d,j＝7.0hz,2h),2.31(br s,2h),2.22(td,j＝6.7,13.5hz,1h),1.23-1.14(m,6h),0.97-0.90(m,6h)(tfa盐).lc-ms(es+,m/z):550.3[(m+h)+]；rt＝1.979min.hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:550.3502。实施例68化合物518(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向(e)-4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酸(481.23mg，1.89mmol，2.5当量，tfa)的dmf(3ml)溶液中加入dipea(974.89mg，7.54mmol，1.3ml，10当量)、(r)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((3-(1-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(350mg，754.31μmol，1当量，hcl)，然后在在0℃下加入bop(500.42mg，1.13mmol，1.5当量)。混合物在0℃搅拌1小时。将反应混合物过滤，减压浓缩。残余物经制备型hplc(色谱柱：waters xbridge prep obd c18 15*40m*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：30％-60％，8分钟)纯化，得到(r,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(140mg，244.56μmol，收率：32.42％，纯度：96.2％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.21-11.05(m,1h),8.12-7.80(m,1h),7.79-7.66(m,1h),7.63-7.52(m,1h),7.51-7.32(m,2h),7.27-7.16(m,1h),6.86-6.77(m,1h),6.58-6.14(m,2h),3.99-3.86(m,2h),3.49-3.40(m,2h),3.27-3.19(m,2h),3.15-3.08(m,3h),3.07-2.97(m,6h),2.96(s,1.5h),2.88(dt,j＝4.0,7.1hz,1h),2.79-2.69(m,3.5h),2.02-1.89(m,2h),1.24-1.16(m,9h).lc-ms(es+,m/z):551.3[(m+h)+]；rt＝2.274min.hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:551.3468。实施例69化合物519(s,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(s)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯向(s)-(2-(3-氨基苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(2.00g，7.99mmol，1当量)和3,5-二氯-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(1.76g，7.99mmol，1当量)的nmp(20ml)溶液中加入dipea(10.33g，79.89mmol，13.92ml，10当量)。混合物加热至140℃并在n2气氛下搅拌36小时。将反应液倒入到水(40ml)中，用乙酸乙酯(60ml*3)萃取。合并有机层，用水(80ml*2)、饱和盐水(80ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝20/1至1/1)纯化，得到(s)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(2.3g，5.30mmol，收率：66.34％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.21-11.11(m,1h),8.32-8.19(m,1h),8.09-7.98(m,1h),7.59-7.47(m,1h),7.41-7.22(m,2h),6.95-6.78(m,2h),3.15-2.99(m,2h),2.89-2.78(m,3h),1.34(s,9h),1.26(t,j＝7.5hz,3h),1.17(d,j＝6.9hz,3h).lc-ms(es+,m/z):378.2[(m+h-56)+]；rt＝0.909min。步骤2：(s)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5,6-二乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯向3,5-二氯-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(500mg，1.06mmol，1当量，hcl)和三乙基硼烷(1m，10.63ml，10当量)的dmf(5ml)和h2o(2ml)溶液中加入p(tbu)3pd g2(54.47mg，106.29μmol，0.1当量)和cs2co3(1.04g，3.19mmol，3当量)。在n2气氛下，将混合物加热至80℃保持10小时。将反应液倒入水(10ml)中，用etoac(20ml*3)萃取。合并有机层，用水(15ml*2)、饱和盐水(15ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。将残余物溶于dcm(20ml)，加入清除剂(pd)，然后在25℃搅拌1小时，然后过滤。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/醋酸乙酯＝20/1至1/1)纯化，得到(s)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5,6-二乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(350mg，818.64μmol，收率：77.02％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.15-11.00(m,1h),8.21-8.05(m,1h),7.90-7.51(m,4h),7.32-7.19(m,1h),6.82(br d,j＝7.3hz,1h),3.08-2.99(m,2h),2.88-2.71(m,5h),1.39-1.07(m,18h).lc-ms(es+,m/z):428.4[(m+h)+]；rt＝0.919min。步骤3:(s)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺在25℃、n2气氛下，将(s)-(2-(3-((3-氨基甲酰基-5,6-二乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(330mg，771.86μmol，1当量)的hcl/meoh(20ml，4m)混合物搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩，得到(s)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺(320mg，粗品)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.22-11.00(m,1h),8.21-8.11(m,1h),7.97(br s,2h),7.87(br s,1h),7.73-7.65(m,1h),7.60(s,1h),7.29(br t,j＝7.8hz,1h),6.92(br d,j＝7.5hz,1h),3.08-2.95(m,3h),2.84(q,j＝7.3hz,2h),2.75(q,j＝7.5hz,2h),1.34-1.20(m,9h).lc-ms(es+,m/z):328.3[(m+h)+]；rt＝0.598min。步骤4:(s)-(2-((2-(3-((3-氨基甲酰基-5,6-二乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基甘氨酸(243.35mg，1.29mmol，1.5当量)的dmf(3ml)溶液中加入dipea(1.11g，8.57mmol，1.49ml，10当量)、(s)-3-((3-(1-氨基丙烷-2-基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺(312mg，857.42μmol，1当量，hcl)，然后在0℃加入bop(568.83mg，1.29mmol，1.5当量)。混合物在0℃搅拌1小时。将反应液倒入水(5ml)中，用etoac(10ml*3)萃取。合并有机层，用水(10ml*2)、饱和盐水(10ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，浓缩，得到粗产物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝20/1至1/1)纯化，得到(s)-(2-((2-(3-((3-氨甲酰基-5,6-二乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(320mg，641.78μmol，收率：74.85％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):499.4[(m+h)+]；rt＝0.827min。步骤5：(s)-5,6-二乙基-3-((3-(1-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(s)-(2-((2-(3-((3-氨基甲酰基-5,6-二乙基吡嗪-2-基)氨基)苯基)丙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(310mg，621.72μmol，1当量)的hcl/meoh(20ml，4m)混合物在25℃下搅拌1小时。lcms显示反应完成。将反应混合物减压浓缩，得到(s)-5,6-二乙基-3-((3-(1-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(320mg，粗品)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.13-11.04(m,1h),8.89-8.72(m,2h),8.54-8.45(m,1h),8.21-8.11(m,1h),7.92-7.82(m,1h),7.68-7.61(m,1h),7.60-7.53(m,1h),7.25(s,1h),7.19-7.13(m,1h),6.90-6.83(m,1h),3.67-3.55(m,1h),3.43-3.22(m,3h),2.91-2.80(m,3h),2.78-2.71(m,2h),1.31(t,j＝7.4hz,3h),1.27-1.21(m,6h).lc-ms(es+,m/z):399.3[(m+h)+]；rt＝0.572min。步骤6：(s,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向(e)-4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酸(396.02mg，1.55mmol，2.5当量，tfa)的dmf(3ml)溶液中加入dipea(802.27mg，6.21mmol，1.08ml，10当量)、(s)-5,6-二乙基-3-((3-(1-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(270mg，620.74μmol，1当量，hcl)，然后在0℃加入bop(411.82mg，931.12μmol，1.5当量)。将混合物在0℃搅拌1小时。过滤反应混合物，减压浓缩，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：waters xbridge prep obd c18 150*40mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：30％-70％，8分钟)纯化，得到(s,e)-3-((3-(1-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)丙烷-2-基)苯基)氨基)-5,6-二乙基吡嗪-2-甲酰胺(159.54mg，302.10μmol，收率：48.67％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.14-11.05(m,1h),8.21-8.10(m,1h),8.09-7.81(m,2h),7.67-7.59(m,1h),7.58-7.50(m,1h),7.28-7.19(m,1h),6.88-6.80(m,1h),6.52-6.15(m,2h),4.00-3.85(m,2h),3.27-3.20(m,2h),3.15-3.08(m,3h),3.07-2.98(m,3h),2.96(s,1.5h),2.92-2.81(m,3h),2.79-2.71(m,3.5h),2.01-1.88(m,2h),1.31(t,j＝7.4hz,3h),1.26-1.17(m,6h).lc-ms(es+,m/z):522.3[(m+h)+]；rt＝2.248min.hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:522.3185。实施例70化合物520(e)-3-((2-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(2-((2-(4-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在25℃下，向n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基甘氨酸(521.72mg，2.76mmol，1.5当量)的dmf(12ml)溶液中加入dipea(2.38g，18.38mmol，3.20ml，10当量)、(2-((2-(4-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(600mg，1.84mmol，1当量)和bop(1.22g，2.76mmol，1.5当量)。将混合物在25℃下搅拌2小时。通过加入h2o(20ml)淬灭反应混合物，然后用dcm(20ml*3)萃取。合并的有机层，用饱和盐水(20ml)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩。残余物经柱色谱法(sio2，dcm：meoh＝20:1)纯化，得到(2-((2-(4-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(722mg，1.45mmol，收率：78.93％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):498.3[(m+h)+].rt＝0.627min。步骤2：5-环丙基-6-乙基-3-((2-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺在25℃下，将(2-((2-(4-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(722mg，1.45mmol，1.0当量)的hcl/meoh(4m，20ml，722.3当量)溶液搅拌1小时。反应混合物减压浓缩，得到5-环丙基-6-乙基-3-((2-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(600mg，粗品，hcl)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):398.2[(m+h)+].rt＝0.953min。步骤3：(e)-3-((2-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向(e)-4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酸(882.13mg，3.46mmol，2.5当量，tfa)的dmf(8ml)溶液中加入dipea(1.79g，13.83mmol，2.41ml，10当量)和5-环丙基-6-乙基-3-((2-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(600mg，1.38mmol，1当量，hcl)，然后在0℃下加入bop(917.31mg，2.07mmol，1.5当量)。将混合物在0℃搅拌2小时。混合物经制备型hplc(色谱柱：waters xbridge beh c18 250*70mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：25％-55％，20分钟)纯化，得到(e)-3-((2-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(44.11mg，84.72μmol，收率：6.13％，纯度：98.94％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.39(br d,j＝6.88hz,1h),8.33-8.19(m,2h),8.17–7.92(m,2h),7.45(br dd,j＝10.57,6.07hz,2h),6.59-6.17(m,2h),4.01–3.83(m,2h),3.51–3.41(m,2h),3.15–2.99(m,7h),2.98-2.78(m,6h),2.38-2.30(m,1h),2.02–1.86(m,2h),1.29(t,j＝7.50hz,3h),1.20-1.08(m,4h).lc-ms(es+,m/z):521.3[(m+h)+].rt＝2.471min.hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:521.3025。实施例71化合物601(e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丁基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯向(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，1.19mmol，1当量)、异丁基硼酸(1.21g，11.91mmol，10当量)、cs2co3(1.16g，3.57mmol，3当量)的二氧六环(5ml)和h2o(1ml)溶液中加入pd(dppf)cl2(87.13mg，119.07μmol，0.1当量)。在n2、100℃下，将混合物搅拌10小时。将残余物溶于dcm(20ml)，加入清除剂(pd)，然后在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将混合物倒入水(60ml)中并用dcm(60ml*2)萃取。合并有机层，用水(40ml*2)、饱和盐水(40ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩。粗产物经硅胶色谱法(石油醚：乙酸乙酯＝1:1)纯化，得到(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，679.40μmol，收率：57.06％)，为黄色固体。lcms(es+,m/z):442.3[(m+h)+]；rt＝0.949min。步骤2：3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丁基吡嗪-2-甲酰胺将(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，679.40μmol，1当量)和hcl/meoh(4m，16.9ml，100当量)的混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩，得到3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丁基吡嗪-2-甲酰胺(170mg，粗品)，为黄色油状物。lcms(es+,m/z):342.3[(m+h)+]；rt＝0.618min。步骤3：(2-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在25℃下，向3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丁基吡嗪-2-甲酰胺(170mg，449.84μmol，1当量，hcl)、n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基甘氨酸(170.23mg，899.68μmol，2当量)、dipea(581.39mg，4.50mmol，783.54μl，10当量)的dmf(2ml)溶液中加入bop(298.43mg，674.76μmol，1.5当量)。将混合物在25℃搅拌1小时。将混合物倒入水(20ml)中，用etoac(30ml*2)萃取。合并有机层，用水(10ml*2)、饱和盐水(10ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经硅胶色谱法纯化(乙酸乙酯：石油醚＝3:1)，得到(2-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(200mg，390.14μmol，收率：86.73％)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.14-10.99(m,1h),8.23-8.12(m,1h),8.00-7.84(m,2h),7.66-7.45(m,2h),7.28-7.19(m,1h),6.89-6.78(m,1h),3.80-3.64(m,2h),3.22-3.12(m,1h),2.83-2.64(m,10h),2.30-2.20(m,1h),1.24(br t,j＝7.5hz,12h),1.06-0.92(m,6h).lc-ms(es+,m/z):513.5[(m+h)+]；rt＝0.870min。步骤4：6-乙基-5-异丁基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(2-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(200mg，390.14μmol，1当量)和hcl/meoh(4m，20ml，205.06当量)的混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩，得到6-乙基-5-异丁基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(180mg，粗品)，为黄色固体。lcms(es+,m/z):413.3[(m+h)+]；rt＝0.654min。步骤5：(e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丁基吡嗪-2-甲酰胺在25℃下，向6-乙基-5-异丁基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(110mg，245.00μmol，1当量，hcl)、(e)-4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酸(218.82mg，857.48μmol，3.5当量，tfa)、dipea(316.64mg，2.45mmol，426.74μl，10当量)的dmf(1ml)溶液中加入bop(162.54mg，367.49μmol，1.5当量)。将混合物在25℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。过滤混合物，得到残余物。粗产物经制备型hplc(色谱柱：watersxbridge prep obd c18 150*40mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：35％-65％，8分钟)纯化，得到(e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丁基吡嗪-2-甲酰胺(60.70mg，111.12μmol，收率：45.35％，纯度：98.06％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.07(d,j＝6.9hz,1h),8.23-7.82(m,3h),7.57(br d,j＝6.9hz,2h),7.24(dt,j＝4.2,7.9hz,1h),6.84(brd,j＝7.4hz,1h),6.61-6.12(m,2h),3.95(d,j＝18.8hz,2h),3.32-3.26(m,2h),3.17-3.02(m,6h),3.02-2.98(m,2h),2.85-2.80(m,1h),2.78-2.66(m,6h),2.25(td,j＝6.9,13.7hz,1h),2.03-1.90(m,2h),1.24(t,j＝7.5hz,3h),0.98(d,j＝6.6hz,6h)；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝10.86-10.78(m,1h),7.60-7.53(m,1h),7.48(br d,j＝8.3hz,1h),7.22(dt,j＝3.3,7.8hz,1h),6.83(br d,j＝7.3hz,1h),6.13(br d,j＝15.3hz,2h),3.96-3.88(m,2h),3.31(td,j＝7.4,17.8hz,2h),3.16-2.98(m,6h),2.98-2.94(m,2h),2.80(br s,1h),2.74-2.62(m,6h),2.23-2.14(m,1h),2.02-1.85(m,2h),1.19(t,j＝7.4hz,3h),0.95-0.91(m,6h).lc-ms(es+,m/z):536.4[(m+h)+]；rt＝2.336min.hrms(ei):m/z(m+h)+实测值:536.3323。实施例72化合物602(e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-乙氧基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(3-((3-氨基甲酰基-6-乙氧基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯向(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(600mg，1.43mmol，1当量)的etoh(6ml)溶液中加入etona(486.18mg，7.14mmol，5当量)。混合物在70℃搅拌2小时。将混合物倒入水(60ml)中，用etoac(60ml*2)萃取。合并有机层，用水(40ml*2)、饱和盐水(40ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经硅胶色谱法(石油醚：乙酸乙酯＝1：1)纯化，得到(3-((3-氨基甲酰基-6-乙氧基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(440mg，1.02mmol，收率：71.69％)，为白色固体。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.27(s,1h),7.88(br s,1h),7.68-7.56(m,2h),7.43-7.33(m,1h),7.24(t,j＝7.8hz,1h),6.93-6.80(m,2h),4.46(q,j＝7.0hz,2h),3.20-3.10(m,2h),2.74-2.62(m,4h),1.45-1.36(m,12h),1.22(t,j＝7.5hz,3h).lcms(es+,m/z):430.3[(m+h)+]；rt＝0.911min。步骤2：3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-乙氧基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺将(3-((3-氨基甲酰基-6-乙氧基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(340mg，791.60μmol，1当量)和hcl/meoh(4m，20ml，101.06当量)的混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩，得到3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-乙氧基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(310mg，粗品)，为黄色固体。lcms(es+,m/z):330.2[(m+h)+]；rt＝0.598min。步骤3：(2-((3-((3-氨基甲酰基-6-乙氧基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在25℃下，向3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-5-乙氧基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(350mg，956.66μmol，1当量，hcl)、n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基甘氨酸(362.02mg，1.91mmol，2当量)、dipea(1.24g，9.57mmol，1.67ml，10当量)的dmf(4ml)溶液中加入bop(634.67mg，1.43mmol，1.5当量)。混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物倒入水(50ml)中并用etoac(50ml*2)萃取。合并有机层，用水(50ml*2)、饱和盐水(50ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经硅胶色谱法(乙酸乙酯：石油醚＝2:1)纯化，得到(2-((3-((3-氨基甲酰基-6-乙氧基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(350mg，699.18μmol，收率：73.09％)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):501.4[(m+h)+]；rt＝0.819min；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.38-11.28(m,1h),8.04-7.89(m,2h),7.73-7.61(m,2h),7.46(br d,j＝8.1hz,1h),7.30(t,j＝7.8hz,1h),6.95-6.86(m,1h),4.56-4.46(m,2h),3.82-3.72(m,2h),3.38-3.33(m,2h),2.85-2.68(m,7h),1.50-1.34(m,12h),1.27(t,j＝7.5hz,3h)。步骤4：5-乙氧基-6-乙基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(2-((3-((3-氨基甲酰基-6-乙氧基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(350mg，699.18μmol，1当量)和hcl/meoh(4m，20ml，114.42当量)的混合物在25℃搅拌4小时。将反应混合物减压浓缩，得到5-乙氧基-6-乙基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(280mg，粗品)，为黄色固体。lcms(es+,m/z):401.3[(m+h)+]；rt＝0.609min。步骤5：(e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-乙氧基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺在25℃下，向5-乙氧基-6-乙基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(280mg，640.83μmol，1当量，hcl)、(e)-4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酸(490.60mg，1.92mmol，3当量，tfa)、dipea(1.24g，9.61mmol，1.67ml，15当量)的dmf(2.5ml)溶液中加入bop(566.85mg，1.28mmol，2当量)。将混合物在25℃下搅拌1小时。过滤混合物，得到残余物。粗产物经制备型hplc(色谱柱：waters xbridge prep obd c18 150*40mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：30％-60％，8分钟)纯化，得到(e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-5-乙氧基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(69.94mg，131.75μmol，收率：20.56％，纯度：98.64％)，为白色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.32-11.25(m,1h),8.21-7.83(m,2h),7.69-7.54(m,2h),7.50-7.37(m,1h),7.31-7.19(m,1h),6.91-6.81(m,1h),6.23(br d,j＝15.1hz,2h),4.51-4.41(m,2h),3.95(d,j＝19.6hz,2h),3.32-3.25(m,2h),3.17-3.03(m,6h),3.02-2.99(m,2h),2.84-2.78(m,1h),2.74-2.64(m,4h),2.04-1.87(m,2h),1.45-1.37(m,3h),1.26-1.18(m,3h)；1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.15-10.98(m,1h),7.55(s,1h),7.44-7.35(m,1h),7.29-7.19(m,1h),6.90-6.80(m,1h),6.55-6.08(m,2h),4.42(q,j＝7.0hz,2h),3.98-3.91(m,2h),3.36-3.23(m,2h),3.18-2.99(m,6h),2.99-2.94(m,2h),2.82-2.75(m,1h),2.73-2.61(m,4h),2.03-1.86(m,2h),1.40-1.32(m,3h),1.17(t,j＝7.5hz,3h).lc-ms(es+,m/z):524.3[(m+h)+]；rt＝2.226min.hrms(ei):m/z(m+h)+实测值:524.2995。实施例73化合物603(e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丙氧基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丙氧基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯向2-甲基丙-1-醇(8.02g，108.20mmol，10ml，45.46当量)的溶液中加入nah(2g，50.00mmol，纯度：60％，21当量)。将混合物在0℃搅拌0.5小时。在0℃下，加入(3-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(1g，2.38mmol，1当量)的2-甲基丙-1-醇(50ml)溶液。将混合物在65℃下搅拌12小时。残余物用h2o(20ml)稀释。将反应混合物减压浓缩以除去2-甲基丙-1-醇(50ml)。残余物用20ml的etoac稀释，然后用30ml的etoac(10ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(15ml)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝4/1)纯化，得到(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丙氧基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(0.53g，1.19mmol，收率：50.18％)，为浅黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.31-11.26(m,1h),7.91-7.86(m,1h),7.66-7.61(m,2h),7.33-7.20(m,2h),6.96-6.90(m,1h),6.86-6.81(m,1h),5.33-5.24(m,1h),3.17-3.09(m,2h),2.70-2.60(m,4h),1.40(d,j＝6.14hz,6h),1.36(s,9h),1.20(t,j＝7.45hz,3h).lc-ms(es+,m/z):466.2[(m+na)+]；rt＝2.273min。步骤2：3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丙氧基吡嗪-2-甲酰胺向(3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丙氧基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(430mg，969.48μmol，1当量)的溶液中加入hcl/meoh(4m，40ml，165.04当量)。混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩以除去溶剂，得到3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丙氧基吡嗪-2-甲酰胺(410mg，粗品)，为浅黄色固体。lc-ms(es+,m/z):344.2[(m+h)+]；rt＝1.560min。步骤3：(2-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丙氧基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯向n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基甘氨酸(272.72mg，1.44mmol，1.5当量)的dmf(6ml)溶液中加入dipea(1.24g，9.61mmol，1.67ml，10当量)和3-((3-(2-氨基乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丙氧基吡嗪-2-甲酰胺(330mg，960.92μmol，1当量)和bop(637.49mg，1.44mmol，1.5当量)。混合物在0℃搅拌2小时。将反应混合物用etoac(50ml)和水(50ml)稀释，用etoac(50ml*3)萃取。合并的有机层用30ml饱和盐水洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经柱色谱法(sio2，dcm：meoh＝15:1)纯化，得到(2-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丙氧基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，粗品)，为淡黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.31-11.25(m,1h),7.96-7.93(m,1h),7.90-7.85(m,1h),7.66-7.59(m,2h),7.38-7.20(m,2h),6.88-6.82(m,1h),5.34-5.23(m,1h),2.89(s,3h),2.78-2.72(m,6h),2.68-2.61(m,2h),1.39(d,j＝6.14hz,9h),1.32(s,4h),1.22-1.15(m,5h).lc-ms(es+,m/z):515.3[(m+h)+]；rt＝2.225min。步骤4：6-乙基-5-异丙氧基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺向(2-((3-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丙氧基吡嗪-2-基)氨基)苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，621.84μmol，1当量)的溶液中加入hcl/meoh(4m，40ml，115.32当量)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩以除去溶剂，得到6-乙基-5-异丙氧基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(500mg，粗品)，为浅黄色固体。lc-ms(es+,m/z):415.3[(m+h)+]；rt＝0.688min。步骤5：(e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丙氧基吡嗪-2-甲酰胺向(e)-4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酸(636.62mg，2.49mmol，2.5当量，tfa)的dmf(4ml)溶液中加入dipea(1.29g，9.98mmol，1.74ml，10当量)、6-乙基-5-异丙氧基-3-((3-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(450mg，997.87μmol，1当量，hcl)和bop(662.01mg，1.50mmol，1.5当量)。将混合物在0℃搅拌2小时。残余物经制备型hplc(色谱柱：waters xbridge beh c18100*30mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：30％-70％，8分钟)纯化，得到(e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)-6-乙基-5-异丙氧基吡嗪-2-甲酰胺(61.55mg，114.48μmol，收率：11.47％，纯度：100％)，为白色固体。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ＝10.97-10.87(m,1h),7.70-7.60(m,1h),7.58-7.47(m,2h),7.26-7.21(m,1h),6.89-6.75(m,2h),6.42-6.34(m,1h),5.39-5.26(m,2h),4.04–3.94(m,2h),3.62-3.49(m,2h),3.28-3.15(m,5h),3.11(s,2h),3.03–2.92(m,1h),2.85-2.77(m,2h),2.72(q,j＝7.42hz,2h),2.17-2.06(m,2h),1.60(br s,2h),1.45(d,j＝6.25hz,6h),1.25(t,j＝7.44hz,3h).lc-ms(es+,m/z):538.3[(m+h)+]；rt＝2.956min.hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:538.3119。实施例74化合物604(e)-3-((2-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)-6-乙基-5-异丁基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(2-(4-((3-氰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯将(2-(4-((6-氯-3-氰基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.00g，1.74mmol，1当量)、异丁基硼酸(885.60mg，8.69mmol，5当量)、csf(923.74mg，6.08mmol，224.48μl，3.5当量)、pd(dppf)cl2(141.89mg，173.75μmol，0.1当量)的二氧六环(18ml)混合物脱气，用n2吹扫3次，然后将混合物在n2气氛下于95℃搅拌6小时。将残余物溶于dcm(20ml)，加入清除剂(pd)，然后在25℃搅拌1小时，然后过滤。将残余物在etoac(80ml)和水(40ml)之间分配，然后分离。水相用etoac(40ml*3)萃取。合并的有机物用饱和盐水(40ml)洗，经mgso4干燥、过滤，浓缩。残余物经柱色谱法(sio2，乙酸乙酯)纯化，得到(2-(4-((3-氰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，1.18mmol，收率：67.78％)，为黄色固体。lcms(es+,m/z):425.2[(m+h)+]；rt＝1.443min。步骤2：(2-(4-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向(2-(4-((3-氰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，1.18mmol，1当量)的meoh(4ml)和dmso(0.4ml)溶液中加入cs2co3(767.47mg，2.36mmol，2当量)和h2o2(620mg，5.47mmol，525.42μl，纯度：30％，4.64当量)。混合物在25℃搅拌2小时。通过加入h2o(15ml)淬灭反应混合物，然后用乙酸乙酯(15ml*3)萃取。合并的有机层，用饱和na2s2o3(15ml)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到(2-(4-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，粗品)，为黄色固体。lcms(es+,m/z):443.3[(m+h)+]；rt＝0.709min。步骤3：3-((2-(2-氨基乙基)吡啶-4-基)氨基)-6-乙基-5-异丁基吡嗪-2-甲酰胺向(2-(4-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，1.13mmol，1当量)的溶液中加入hcl/meoh(4m，40ml，141.62当量)。混合物在25℃搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩除去溶剂，得到3-((2-(2-氨基乙基)吡啶-4-基)氨基)-6-乙基-5-异丁基吡嗪-2-甲酰胺(400mg，粗品，hcl)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):343.2[(m+h)+]；rt＝0.554min。步骤4：(2-((2-(4-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基甘氨酸(331.52mg，1.75mmol，1.5当量)的dmf(3ml)溶液中加入dipea(1.51g，11.68mmol，2.03ml，10当量)、3-((2-(2-氨基乙基)吡啶-4-基)氨基)-6-乙基-5-异丁基吡嗪-2-甲酰胺(400mg，1.17mmol，1当量，hcl)和bop(774.94mg，1.75mmol，1.5当量)。混合物在0℃搅拌2小时。lcms显示反应完成。将反应混合物用etoac(50ml)和水(50ml)稀释，用etoac(50ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(50ml)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。残余物经制备型tlc(sio2，dcm:meoh＝10:1，0.5％ et3n)纯化，得到(2-((2-(4-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(450mg，876.12μmol，收率：75.00％)，为浅黄色固体。lcms(es+,m/z):514.3[(m+h)+]；rt＝0.686min。步骤5：6-乙基-5-异丁基-3-((2-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺向(2-((2-(4-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-异丁基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(450mg，876.12μmol，1当量)的溶液中加入hcl/meoh(4m，40ml，182.62当量)。混合物在25℃下搅拌1小时。lcms显示反应完成。将反应混合物减压浓缩除去溶剂，得到6-乙基-5-异丁基-3-((2-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(400mg，粗品，hcl)，为黄色固体。lc-ms(es+,m/z):414.3[(m+h)+]；rt＝0.549min。步骤6：(e)-3-((2-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)-6-乙基-5-异丁基吡嗪-2-甲酰胺向(e)-4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酸(567.12mg，2.22mmol，2.5当量，tfa)的dmf(5ml)溶液中加入diea(1.15g，8.89mmol，1.55ml，10当量)和6-乙基-5-异丁基-3-((2-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(400mg，888.94μmol，1当量，hcl)和bop(589.74mg，1.33mmol，1.5当量)。混合物在0℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。残余物经制备型hplc(色谱柱：phenomenex luna c18 75*30mm*3um；流动相：[水(tfa)-acn]；b％：5％-35％，8分钟)纯化。将残余物用15ml的dcm和15ml的饱和na2co3水溶液稀释，然后用30ml的dcm(10ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(15ml)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到(e)-3-((2-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)-6-乙基-5-异丁基吡嗪-2-甲酰胺(103.16mg，190.19μmol，收率：21.39％，纯度：98.94％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ＝11.05(br s,1h),8.33-8.26(m,1h),7.96-7.89(m,1h),7.67-7.49(m,2h),7.41-7.34(m,1h),6.87-6.72(m,1h),6.47-6.16(m,1h),5.71(s,1h),4.11-4.00(m,2h),3.74-3.62(m,2h),3.29-3.23(m,2h),3.23-3.16(m,2h),3.16-3.11(m,3h),3.11-2.97(m,2h),2.94-2.88(m,2h),2.80(q,j＝7.42hz,2h),2.73(d,j＝7.00hz,2h),2.36-2.26(m,1h),2.14-2.01(m,2h),1.29(d,j＝7.44hz,3h),1.05(d,j＝6.63hz,6h)；hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:537.3302.lcms(es+,m/z):537.3[(m+h)+]；rt＝1.894min。实施例75化合物605(s,e)-3-((2-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(2-(4-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向(2-(4-((6-氯-3-氰基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.8g，4.47mmol，1当量)的dmso(5ml)和i-proh(20ml)溶液中加入cs2co3(5.82g，17.87mmol，4当量)和h2o2(8.11g，71.49mmol，6.87ml，纯度：30％，16当量)。使混合物升温至25℃并搅拌17小时。将反应混合物通过加入h2o(100ml)淬灭，然后用乙酸乙酯(100ml*2)萃取。合并的有机层用饱和na2s2o3(100ml)洗，经无水na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经硅胶色谱法(乙酸乙酯：石油醚＝5：1)纯化，得到(2-(4-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(750mg，1.78mmol，收率：19.94％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.56-11.46(m,1h),8.42-8.31(m,2h),8.20-8.13(m,1h),7.66-7.58(m,1h),7.37-7.30(m,1h),6.93-6.80(m,1h),3.31-3.25(m,2h),2.90-2.79(m,4h),1.38-1.35(m,9h),1.31-1.25(m,3h).lcms(es+,m/z):421.3[(m+h)+]；rt＝0.543min。步骤2：(2-(4-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯向(2-(4-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，712.77μmol，1当量)、n-甲基丙-2-胺(521.30mg，7.13mmol，742.59μl，10当量)的dma(3ml)溶液中加入dipea(1.84g，14.26mmol，2.48ml，20当量)。混合物在100℃下搅拌10小时。lcms显示反应完成。将混合物倒入水(50ml)中，然后用etoac(530ml*2)萃取。合并有机层，用水(50ml*2)、饱和盐水(50ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经硅胶色谱法(乙酸乙酯：石油醚＝5:1)纯化，得到(2-(4-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(210mg，458.95μmol，收率：64.39％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.52-11.47(m,1h),8.37-8.28(m,1h),7.94-7.85(m,1h),7.70-7.56(m,2h),7.51-7.41(m,1h),6.96-6.85(m,1h),4.41-4.29(m,1h),3.34-3.28(m,2h),2.97(s,3h),2.86-2.77(m,4h),1.41(s,9h),1.34-1.25(m,9h).lcms(es+,m/z):458.3[(m+h)+]；rt＝0.635min。步骤3：(2-(4-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯将(2-(4-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(210mg，458.95μmol，1当量)和hcl/meoh(4m，25ml，217.89当量)的混合物在16℃下搅拌5小时。将反应混合物减压浓缩，得到3-((2-(2-氨基乙基)吡啶-4-基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(200mg，粗品)，为黄色固体。lcms(es+,m/z):358.3[(m+h)+]；rt＝0.331min。步骤4：(s)-(1-((2-(4-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向3-((2-(2-氨基乙基)吡啶-4-基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(200mg，559.52μmol，1当量)、n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基-l-丙氨酸(170.57mg，839.27μmol，1.5当量)、nmi(459.38mg，5.60mmol，446.00μl，10当量)的dmf(2ml)溶液中加入tcfh(235.48mg，839.27μmol，1.5当量)。将混合物在0℃搅拌1小时。lcms显示反应完成。将混合物倒入水(40ml)中，用etoac(50ml*2)萃取。合并有机层，用水(40ml*2)、饱和盐水(40ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩，得到残余物。粗产物经硅胶色谱法(二氯甲烷：甲醇＝10:1)纯化，得到(s)-(1-((2-(4-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(200mg，368.55μmol，收率：65.87％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.60-11.44(m,1h),8.37-8.30(m,1h),7.92(br d,j＝2.1hz,2h),7.69(br d,j＝2.3hz,1h),7.63(s,1h),7.54-7.44(m,1h),4.37-4.31(m,1h),3.44(br s,2h),2.96-2.94(m,2h),2.90-2.74(m,9h),1.41(br s,9h),1.34-1.20(m,12h).lc-ms(es+,m/z):543.3[(m+h)+]；rt＝0.422min。步骤5：(s)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((2-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(s)-(1-((2-(4-((3-氨基甲酰基-5-乙基-6-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-基)氨基)吡啶-2-基)乙基)氨基)-1-氧代丙烷-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(200mg，368.55μmol，1当量)和hcl/meoh(4m，20ml，217.07当量)的混合物在16℃下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩，得到(s)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((2-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(210mg，粗品)，为黄色固体。lcms(es+,m/z):443.4[(m+h)+]；rt＝0.331min。步骤6：(s,e)-3-((2-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向(s)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)-3-((2-(2-(2-(甲基氨基)丙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(210mg，438.40μmol，1当量，hcl)、(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(108.91mg，657.60μmol，1.5当量，hcl)、dipea(566.60mg，4.38mmol，763.61μl，10当量)的dmf(2ml)溶液中加入bop(290.84mg，657.60μmol，1.5当量)。将混合物在0℃搅拌1小时。过滤混合物，得到残余物。粗产物经制备型hplc(色谱柱：waters xbridgebeh c18 100*30mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：25％-55％，8分钟)纯化，得到(s,e)-3-((2-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)丙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)-6-乙基-5-(异丙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(51.85mg，87.50μmol，收率：19.96％，纯度：93.44％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.50-11.42(m,1h),8.20(s,1h),7.85(br d,j＝2.1hz,2h),7.66-7.58(m,1h),7.57-7.50(m,1h),7.48-7.42(m,1h),6.67-6.35(m,2h),5.06-4.49(m,1h),4.37-4.20(m,1h),3.53-3.36(m,2h),3.06-2.69(m,12h),2.23-1.99(m,6h),1.30-1.15(m,12h)；hrms(ei):m/z(m+h)+实测值:554.3552.lc-ms(es+,m/z):554.3[(m+h)+]；rt＝1.919min。实施例76化合物606(e)-3-((2-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺步骤1：(e)-3-((2-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向(e)-4-(二甲基氨基)丁-2-烯酸(101.93mg，615.48μmol，1.5当量，hcl)的dmf(2ml)溶液中加入dipea(530.31mg，4.10mmol，10当量)、6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)-3-((2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(200mg，410.32μmol，1当量，2hcl)，然后加入bop(272.21mg，615.48μmol，1.5当量)。将混合物在0℃搅拌1小时。过滤反应混合物，得到残余物。残余物经制备型hplc(色谱柱：waters xbridgeprep obd c18 150*40mm*10um；流动相：[水(nh4hco3)-acn]；b％：25％-55％，8分钟)纯化，得到(e)-3-((2-(2-(2-(4-(二甲基氨基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)吡啶-4-基)氨基)-6-乙基-5-(乙基(甲基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(40.68mg，76.74μmol，收率：18.7％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.47-11.41(m,1h),8.30-8.23(m,1h),7.95(t,j＝5.4hz,1h),7.85-7.79(m,1h),7.60-7.51(m,2h),7.48-7.40(m,1h),6.62-6.25(m,2h),3.98-3.90(m,2h),3.51-3.38(m,4h),3.09-3.05(m,3h),3.03-3.00(m,3h),2.92-2.88(m,1h),2.82-2.73(m,5h),2.14-2.05(m,6h),1.22(dt,j＝4.6,7.1hz,6h).lc-ms(es+,m/z):526.3[(m+h)+]；rt＝1.795min.hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:526.3239。实施例77化合物607(e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)-4-氟苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺步骤1：2-(2-氟-5-硝基苯基)乙腈在25℃下，向nacn(2.450g，49.99mmol，1.95当量)的h2o(20ml)溶液中滴加2-(溴甲基)-1-氟-4-硝基苯(6g，25.64mmol，1当量)的etoh(90ml)混合物。将混合物在25℃搅拌4小时。lcms显示反应完成。用2n的naoh(40ml)淬灭混合物。混合物用h2o(300ml)稀释，然后用etoac(150ml*3)萃取。合并的有机层用饱和盐水(130ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，浓缩。粗产物经硅胶色谱法(石油醚：乙酸乙酯＝5:1)纯化，得到2-(2-氟-5-硝基苯基)乙腈(3g，16.65mmol，收率：64.96％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝8.44(dd,j＝2.9,6.4hz,1h),8.34(td,j＝3.7,8.9hz,1h),7.62(t,j＝9.1hz,1h),4.26(s,2h).lcms(es+,m/z):214.2[(m+h)+]；rt＝2.095min。步骤2：2-(2-氟-5-硝基苯基)乙烷-1-胺向2-(2-氟-5-硝基-苯基)乙腈(3g，16.65mmol，1当量)的thf(50ml)溶液中滴加bh3.thf(1m，69.00ml，4.14当量)。将混合物在70℃下回流2小时。tlc显示反应完成。将所得混合物滴加至meoh(100ml)中，然后在70℃回流1小时，然后浓缩至干，得到2-(2-氟-5-硝基苯基)乙烷-1-胺(3g，粗品)，为黄色油状物。步骤3：(2-氟-5-硝基苯乙基)氨基甲酸叔丁酯将2-(2-氟-5-硝基苯基)乙-1-胺(3g，16.29mmol，1当量)、boc2o(7.11g，32.58mmol，7.48ml，2当量)、dipea(10.53g，81.45mmol，14.19ml，5当量)和dcm(60ml)的混合物在25℃下搅拌10小时。lcms显示反应完成。将混合物浓缩至干，然后残余物经硅胶色谱法(石油醚：乙酸乙酯＝5:1)纯化，得到(2-氟-5-硝基苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(2g，7.04mmol，收率：43.19％)，为黄色油状物。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ＝8.15-8.00(m,2h),7.11(t,j＝9.1hz,1h),4.54(br s,1h),3.34(q,j＝6.2hz,2h),2.87(br t,j＝6.7hz,2h),1.34(s,9h).lc-ms(es+,m/z):485.2[(m+h-100)+]；rt＝0.527min。步骤4：(5-氨基-2-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯在25℃下，在50psi的h2下，将(2-氟-5-硝基苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(2g，7.04mmol，1当量)、pd/c(200mg，7.04mmol，纯度：50％，1当量)的meoh(100ml)溶液搅拌10小时。lcms显示反应完成。将混合物过滤，滤液浓缩至干，得到(5-氨基-2-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(1.5g，粗品)，为黄色油状物。lcms(es+,m/z):155.3[(m+h-100)+]；rt＝0.319min。步骤5：(5-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-2-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯将(5-氨基-2-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，1.97mmol，1当量)、3,5-二氯-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(519.20mg，2.36mmol，1.2当量)、dipea(7.42g，57.41mmol，10.00ml，29.20当量)和nmp(40ml)的混合物在140℃下搅拌10小时。lcms显示反应完成。将混合物倒入水(150ml)中，用etoac(150ml*2)萃取。合并有机层，用水(80ml*2)、饱和盐水(80ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩。粗产物经硅胶色谱法(石油醚：乙酸乙酯＝5:1)纯化，得到(5-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-2-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，1.14mmol，收率：58.07％)，为黄色固体。lcms(es+,m/z):460.2[(m+na)+]；rt＝0.619min。步骤6：(5-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-2-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯将(5-((3-氨基甲酰基-6-氯-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-2-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，1.14mmol，1当量)、环丙基硼酸(980.80mg，11.42mmol，10当量)、pd(dppf)cl2(83.55mg，114.18μmol，0.1当量)、csf(867.24mg，5.71mmol，210.75μl，5当量)、dma(2ml)的混合物在100℃于n2下搅拌10小时。lcms显示反应完成。将混合物倒入水(40ml)中，用etoac(40ml*2)萃取。有机层用水(80ml*2)、饱和盐水(80ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩。将残余物溶于dcm(30ml)，加入清除剂(pd)，然后在25℃搅拌1小时，然后过滤，浓缩。将粗产物经制备型hplc(色谱柱：phenomenexluna c18 75*30mm*3um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；梯度：经8分钟从60％至97％ b)纯化，得到(5-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-2-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(58mg，130.77μmol，收率：11.45％)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ＝10.48(br s,1h),7.79(br s,1h),7.44-7.31(m,2h),6.90(br t,j＝9.3hz,1h),5.42(br dd,j＝1.8,2.9hz,1h),4.61-4.43(m,1h),3.34(br d,j＝4.1hz,2h),2.96-2.65(m,4h),2.12-2.02(m,1h),1.34(br s,9h),1.24(br t,j＝7.5hz,3h),0.84-0.75(m,4h).lc-ms(es+,m/z):444.3[(m+h)+]；rt＝2.216min。步骤7：3-((3-(2-氨基乙基)-4-氟苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺将(5-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-2-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯(95mg，214.20μmol，1当量)、hcl/meoh(4m，47.50ml，887.03当量)的混合物在25℃搅拌1小时。lcms显示反应完成。将所得混合物浓缩，得到3-((3-(2-氨基乙基)-4-氟苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(85mg，粗品，hcl)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):344.3[(m+h)+]；rt＝0.400min。步骤8：(5-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-2-氟苯乙基)氨基甲酸叔丁酯在0℃下，向3-((3-(2-氨基乙基)-4-氟苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(85mg，223.77μmol，1当量，hcl)、n-(叔丁氧基羰基)-n-甲基甘氨酸(63.51mg，335.65μmol，1.5当量)、dipea(289.20mg，2.24mmol，389.76μl，10当量)的dmf(2ml)混合物中加入bop(148.45mg，335.65μmol，1.5当量)。将混合物在0℃搅拌1小时。lcms显示反应完成。将混合物倒入水(40ml)中，用etoac(40ml*2)萃取。合并有机层，用水(40ml*2)、饱和盐水(40ml*2)洗，经na2so4干燥，过滤，减压浓缩。粗产物经制备型tlc(石油醚：乙酸乙酯＝1:2)纯化，得到(2-((5-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-2-氟苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(85mg，165.18μmol，收率：73.82％)，为黄色油状物。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ＝10.54(s,1h),7.76(br d,j＝1.0hz,1h),7.53-7.43(m,1h),7.39-7.30(m,1h),6.90(br t,j＝9.1hz,1h),6.21-5.85(m,1h),5.32(br s,1h),3.76(s,2h),3.50(q,j＝6.0hz,2h),2.91-2.73(m,7h),2.13-2.02(m,1h),1.34(s,9h),1.24(t,j＝7.5hz,3h),1.09(br dd,j＝2.6,4.5hz,2h),1.05-0.99(m,2h)；lc-ms(es+,m/z):515.2[(m+h)+]；rt＝0.584min。步骤9：5-环丙基-6-乙基-3-((4-氟-3-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺将(2-((5-((3-氨基甲酰基-6-环丙基-5-乙基吡嗪-2-基)氨基)-2-氟苯乙基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(85mg，165.18μmol，1当量)、hcl/meoh(4m，28.33ml，686.12当量)的混合物在25℃搅拌1小时。lcms显示反应完成。浓缩混合物，得到5-环丙基-6-乙基-3-((4-氟-3-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(80mg，粗品，hcl)，为黄色油状物。lc-ms(es+,m/z):415.2[(m+h)+]；rt＝0.422min。步骤10：(e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)-4-氟苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺在0℃下，向5-环丙基-6-乙基-3-((4-氟-3-(2-(2-(甲基氨基)乙酰胺基)乙基)苯基)氨基)吡嗪-2-甲酰胺(80mg，177.41μmol，1当量，hcl)、(e)-4-(氮杂环丁烷-1-基)丁-2-烯酸(362.18mg，1.42mmol，8当量，tfa)、dipea(356.16mg，2.76mmol，480.00μl，15.53当量)的dmf(0.8ml)溶液中加入bop(117.70mg，266.11μmol，1.5当量)。混合物在0℃搅拌1小时。lcms显示反应完成。过滤混合物。粗产物经制备型hplc(色谱柱：waters xbridge prep obdc18 150*40mm*10um；流动相：[水(10mmol nh4hco3)-acn]；梯度：经8.0分钟从20％至50％b)纯化，得到(e)-3-((3-(2-(2-(4-(氮杂环丁烷-1-基)-n-甲基丁-2-烯酰胺基)乙酰胺基)乙基)-4-氟苯基)氨基)-5-环丙基-6-乙基吡嗪-2-甲酰胺(26.84mg，49.92μmol，28.14％收率)，为黄色固体。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝11.03-10.92(m,1h),8.22-7.92(m,2h),7.87-7.77(m,1h),7.54-7.36(m,2h),7.17-7.04(m,1h),6.52(s,2h),4.00-3.83(m,2h),3.28(br s,2h),3.17-2.94(m,7h),2.90(q,j＝7.5hz,2h),2.81-2.68(m,4h),2.31-2.23(m,1h),2.01-1.87(m,2h),1.27(t,j＝7.5hz,3h),1.12-1.01(m,4h).lc-ms(es+,m/z):538.2[(m+h)+]；rt＝2.284min,hrms(ei):m/z[m+h]+实测值:538.2981。其他示例性化合物比较例化合物c-1、c-2和c-3均是或均可使用与公开文献(例如ar 110273、wo2012/053606、wo2010/128659、us8,969,336和us9,487,491)中描述的一般方法和程序一致的方法和程序制备得到，各文献内容均通过引用并入本发明。表2a和表2b描述了使用本发明所述的一般方法和程序由容易获得的起始物料制备或可制备得到的代表性化合物。实施例b1flt3体外抑制活性在人类aml细胞系molm-13(addexbio:c0003003)和mv-4-11(atcc:crl-9591)以及cml细胞系k-652(atcc:crl-3343)中研究了其增殖抑制作用。molm-13对于flt3-itd突变是杂合的，而mv4-11对于flt3-itd是纯合的(quentmeier h,et al.,leukemia.17(1):120-4)。k562不具有任何flt3突变。将细胞维持在补充有10％热灭活fbs(thermofisher目录号a31605)和1％青霉素-链霉素(thermofisher目录号10378016)的rpmi-1640培养基(thermofisher目录号61870036)中，并在37℃下在具有5％ co2的加湿培养箱中培养。细胞系通过黏附于培养瓶而生长，细胞汇合度维持在70％-80％范围内。atp存在于所有代谢活性细胞中并被认为是细胞活力和增殖的标志物。根据厂商的实验建议，使用celltiter-glo试剂盒(promega目录号g7572)测定代谢细胞活性，所述试剂盒是一种atp监测系统，其基于atp与添加的重组荧光素酶反应产生发光(kawano et al.,2016,plos one,8；11(7):e0158888)。本测定试验基于96孔板形式。将受试化合物以10mm溶于dmso(sigma目录号d8418；纯度≥99.9％)并在-20℃下储存。在单次测试中，在所选细胞系中同时评估受试化合物的8个浓度，每个浓度各测试两次。使用giltratinib和ff-10101作为参比化合物并在8个浓度下进行两次测试。100％的增殖由未经处理的细胞(0.2％dmso)表示。在实验当天，用细胞活力分析仪nucleocounter(chemometec nc-200)对细胞进行定量，并用新鲜培养基稀释，以获得每200μl培养基约10,000个细胞的细胞密度。将200μl细胞悬浮液加入96孔板的孔中。接种细胞2小时后，使用d300e化合物分配器(life sciences tecan d300)加入所需浓度的化合物，在各分配的化合物之间摇动。测定板在37℃下于含5％ co2的加湿培养箱中培养。在第4天(加入化合物后约96小时)，将测定板在室温下平衡约15分钟，然后加入40μl/孔的promega celltiterglo试剂。将内容物在轨道震荡器上混合5分钟以促进细胞裂解，然后在室温下、黑暗中再培养10分钟以稳定发光信号。通过使用glomax gm300板读取器(promega)，并使用96孔板标准方案的发光来读取发光值。数据表示为与0.2％ dmso(溶媒(vehicle))阴性对照相比的抑制百分比，计算方式如下：抑制％＝100-[(rlu样品)×100/(rlu平均对照*)]，其中，*表示0.2％ dmso的平均值。结果使用graphpad(prism)进行分析，ic50值使用四参数逻辑斯谛方程(fourparameter-logistic equation)通过非线性回归计算得到。下表2a报告了t4天(4天)测定的ic50值：*****<1nm，****1-10nm，***10-100nm，**100-500nm，*>500nm。图1、图2a、图2b、图3a、图3b、图4a、图4b、图5a和图5b描述了代表性化合物在各种细胞系中的基于细胞的活性。本发明化合物提供以下ic50(4天)值。表2a：代表性化合物及其ic50值实施例b2wt flt3和flt3-itd生化试验针对wt flt3和flt3-itd酶，建立基于高通量384孔lance ultra tr-fret的激酶测定法，并使用ulight标记的肽(供体)和用eu-偶联抗体标记的flt3蛋白(受体)(wuxiaptec)。tr-fret的原理是基于供体与受体荧光团之间的能量转移，所述能量转移是当荧光团彼此紧密接近(约)时产生。重组wt flt3(#pr4666c，分子量48.6kda)购自invitrogen，和flt3-itd(flt3-itd-w51,#f-12-12cg-10，分子量76kda)购自signalchem。wt flt3酶测定法的最佳测定条件如下：0.5nm flt3蛋白、50nm ulight-jak-1(tyr1023)底物肽(perkinelmer#trf0121)、100μm atp、60分钟反应时间。flt3-itd酶测定法的最佳测定条件如下：0.0625nm flt3-itd蛋白、50nm ulight-jak-1(tyr1023)底物肽、50μm atp、90分钟反应时间。简言之，制备受试化合物的11个剂量的3x序列稀释液，将参比化合物和100nl转移至384孔测定板的适当孔中。将5μl 2x酶/肽加入测定孔中，将测定板在1000rpm下离心约30秒，用密封膜密封并在23℃下培养30分钟。测定缓冲液包含50mm hepes(ph 7.5)、1mmedta、0.01％ brij-35、10mm mgcl2和2mm dtt。接下来，将5μl的2xatp混合物加至测定孔中，并将板以1000rpm离心约30秒，用密封膜密封，并在23℃培养适当的持续时间。在测定培养(对于wt flt3为30分钟，对于flt3-itd为60分钟)后，将10μl 2x检测混合物(eu-w1024抗磷酸酪氨酸(pt66)2nm和edta 10mm)加至测定孔中，将测定板以1000rpm离心约1分钟，用密封膜密封并在23℃培养60分钟。在perkin elmer envision读板器上在两个波长(665/615)下读取测定板，并计算615nm与665nm的比率。数据表示为相对于溶媒对照的抑制率％，并计算如下：(100％抑制-孔数据)/(100％抑制-0％抑制)*100。结果通过xlfit5分析为抑制％相对于对数(log)[化合物浓度]，ic50值由非线性回归使用四参数-逻辑斯谛方程计算得到。fit＝(a+((b-a)/(1+((c/x)^d))))。res＝(y-fit)。测定的相对ic50值报告在下表2b中：*****≤0.1nm，****0.101-0.200nm，***0.201-0.500nm，**0.501-1.000nm，*>1nm。图2c、图2d、图3c、图3d、图4c、图4d、图5c和图5d描绘代表性化合物在flt3-wt和flt3-itd酶中的生物化学活性。本发明化合物提供以下ic50值。表2b：代表性化合物及其ic50值实施例b3flt3突变体测定试验目前临床上已批准或开发了多种flt3激酶抑制剂，包括：米哚妥林(midostaurin)、索拉非尼(sorafenib)、奎扎替尼(quizartinib，ac220)和吉瑞替尼(gilteritinib)。尽管它们均具有良好的效力与存活效益，但这些靶向flt3抑制剂的单一疗法因治疗引起的耐药性而受到限制，进而使得复发、以及整体存活率不佳(smith cc etal.nature.2012；485(7397):260-u153,smith et al.blood.2017；130(1):48–58)。tkd中的获得性突变和f691l“看守”(gatekeeper)突变赋予对大多数目前可用的flt3抑制剂的耐药性(eguchi et al.biomedicines.2020；8(8):245；smith cc et al.cancerdiscov.2015；5(6):668–79)。因此，能够克服这些耐药性突变的药物具有选择性优势，因此备受期待。使用稳定表达人flt3-itd、flt3-itd-d835y或flt3-itd-f691l的ba/f3细胞系(小鼠pro-b细胞系)评估化合物对flt3活化突变的活性。简言之，将人flt3-itd/flt3-itd-d835y/flt3-itd-d691l表达质粒转染到293ft细胞中，使用慢病毒包装质粒产生慢病毒。收集的上清液用peg8000浓缩，并用其在含有聚凝胺的无血清培养基中以1-5moi感染ba/f3细胞。经感染的ba/f3细胞在存在嘌呤霉素的情况下进行筛选，并通过测序和/或蛋白质检测分析验证存活细胞。活化激酶的组成型表达将ba/f3细胞转化为il-3-非依赖性生长，使其在无il-3存在下培养。将由此产生的转化细胞系维持在培养基(90％ rpmi1640+10％热灭活fbs+1x青霉素-链霉素/抗生素-抗真菌剂)中，在不存在il-3的情况下，于37℃下，在空气中5％ co2的气氛中，并定期进行继代培养。为了用于化合物测试，收获指数生长期的细胞，计数，并以所需细胞密度重新悬浮细胞。细胞活力测定法在96孔测定板中进行，每孔接种90μl细胞悬浮液。受试化合物和测定对照的序列稀释液为新鲜制备，用于测定。在100％ dmso(400x原液)中制备9点3x序列稀释液，随后在细胞培养基中稀释以获得10x原液。将10μl10x原液序列稀释液加入测定板中的相应孔中(每种条件有三个孔)。测定试验中的最终dmso浓度为0.25％。将测定板在37℃下、在具有5％ co2的加湿培养箱中培养3天。在3天结束时，使用promega celltiter-glo发光细胞活力测定试剂盒(promega-g7573)按照厂商的方案评价细胞活力，并使用2104envision读板器(perkinelmer)测定活细胞中由atp分子产生的发光信号。受试化合物的抑制率(ir)通过以下公式确定：ir(％)＝(1-(rlu化合物-rlu空白)/(rlu对照-rlu空白))×100％。在excel文件中计算不同剂量化合物的抑制作用，并使用graphpad prism分析剂量反应以评估相关参数，例如底部(bottom)、顶部(top)和ic50。对于通过graphpad prism进行的ic50分析，使用以下方程式拟合曲线：y＝bottom+(top-bottom)/(1+10^((logic50-x)*斜率(hillslope)))。本发明提供的代表性化合物在对稳定表达人flt3-itd突变的工程化ba/f3细胞系进行测试时表现出强效抗白血病活性(ic50<10nm)，其中顶级化合物表现出比吉瑞替尼更高的效力(表2c)。还针对稳定表达tkd突变flt3-itd-d835y或看守突变flt3-itd-f691l的ba/f3细胞系，对化合物进行了测试。与已发表的数据一致，与flt3-itd相比，flt3-itd-d835y和flt3-itd-f691l突变体均对奎扎替尼(quizartinib)的敏感性降低(ic50增加50至100倍)。吉瑞替尼(gilteritinib)对flt3-itd和flt3-itd-d835y突变体均具有高活性，但对flt3看守突变flt3-itd-f691l的活性较低(相对于flt3-itd，ic50增加约15倍)。相比之下，本发明提供的数个代表性化合物特性很突出，因为它们对此两种突变体均具有良好活性(ic50变化<10倍)。特别值得注意的是，flt3-itd-f691l对本发明大多数化合物具有高度敏感性。总之，鉴于本发明代表性化合物能够同时抑制tkd突变d835y以及看守突变f691l，表现出卓越的特性。在第3天(3天)测定的ic50值报告在下表2c中：*****≤1nm，****1-10nm，***10-100nm，**100-500nm，*>500nm。本发明化合物提供以下ic50(3天)值。表2c：代表性化合物及其相对ic50值吉瑞替尼-一种已知的flt3抑制剂，其被批准用于治疗具有flt3突变的复发性或难治性急性髓细胞性白血病(aml)。奎扎替尼-一种目前正在开发中的已知flt3抑制剂，用于治疗急性髓细胞性白血病。实施例b4：药物组合物为了说明性目的，下文所述组合物与式(i)所示化合物一同呈现。实施例b2a：肠胃外组合物为了制备适于注射给药的肠胃外药物组合物，将100mg式(i)化合物的水溶性盐溶解于dmso，然后与10ml 0.9％无菌盐水混合。将所得混合物掺入适于注射给药的剂量单位形式中。实例b2b：口服组合物为了制备用于口服递送的药物组合物，将100mg式(i)化合物与750mg淀粉混合。将所得混合物掺入适于口服给药的口服剂量单位，如硬明胶胶囊中。实施例b2c：舌下(硬锭剂)组合物为了制备用于经颊给药的药物组合物，例如硬锭剂，将100mg式(i)化合物与420mg混合的糖粉、1.6ml轻玉米糖浆、2.4ml蒸馏水和0.42ml薄荷提取物混合。将所得混合物轻轻地混合并倒入模具中以形成适于经颊给药的锭剂。实施例b2d：吸入组合物为了制备用于吸入递送的药物组合物，将20mg式(i)化合物与50mg无水柠檬酸和100ml0.9％氯化钠溶液混合。将所得混合物掺入适于吸入给药的吸入递送单元，如喷雾器中。实施例b2e：直肠凝胶组合物为了制备直肠递送的药物组合物，将100mg式(i)化合物与2.5g甲基纤维素(1500mpa)、100mg对羟基苯甲酸甲酯、5g甘油和100ml纯化水混合。然后将所得凝胶混合物掺入直肠递送单元，例如注射器，其适于直肠施用。实施例b2f：局部用凝胶组合物为了制备药物局部凝胶组合物，将100mg式(i)化合物与1.75g羟丙基纤维素、10ml丙二醇、10ml肉荳蔻酸异丙酯和100ml纯化醇usp混合。然后将所得凝胶混合物掺入适于局部给药的容器，如管中。实施例b2g：眼用溶液组合物为了制备眼用药物溶液组合物，将100mg式(i)化合物与0.9g nacl的100ml纯化水溶液混合，并使用0.2μm过滤器过滤。然后将所得等渗溶液掺入适于眼用给药的眼用递送单元，例如滴眼剂容器中。应当理解，本发明所述的实施例和实施方案均仅用于说明性目的，并且所属通常知识者将根据其提出各种修改或变化，而且这些修改或变化将包含在本技术的精神和范围以及所附权利要求书的范围内。本发明引用的所有出版物、专利及专利申请均通过引用其整体并入本发明，用于所有目的。本技术中给出和阐述的本发明提供的化合物的至少一些化学名称可以是通过使用可商购的化学命名软件程序在自动化基础上产生，并且尚未经过独立验证。在所示化学名称和所示结构不同的情况下，以所示结构为准。在结构中存在手性中心但对于手性中心未显示特定立体化学的化学结构中，与手性结构相关的两种对映异构体均被所述结构涵盖。
背景技术：
0、发明背景
1、fms样酪氨酸激酶3(flt3)是在正常造血干细胞/祖细胞上表达的受体酪氨酸激酶。在其被flt3配体(fl)活化后，flt3二聚化并诱导与造血细胞存活和增殖相关的许多信号通路。
2、flt3亦经常在许多急性白血病细胞中过度表达，并且flt3基因的突变是急性髓细胞性白血病中最常见的一般性改变。flt3基因的活化性突变占新诊断的aml成人患者的约三分之一(papaemmanuil et al.,2016,n engl j med.374:2209)，其中这些突变引起组成型flt3信号级联(signaling cascade)。在其他髓细胞性恶性肿瘤中亦发现了flt3的基因改变，例如骨髓增生异常综合征(mds)和急性淋巴细胞白血病(all)。活化性flt3突变是内部串联重复(itd)，或酪氨酸激酶结构域中的点突变，或有时两者的组合。flt3-itd突变存在于约20％的aml患者中，而点突变存在于约5％-10％的aml患者中。此两种突变均可通过不依赖于配体(ligand-independent)的自身磷酸化持续地(constitutively)活化flt3，使得信号传导和细胞增殖增加，导致白血病细胞存活(kennedy et al.,2020,front.oncol.10:612880；kiyoi et al.,2020,cancer science 111:312)。flt3-itd突变尤其与不良预后及高复发率相关，且itd突变可在疾病进展和/或复发期间获得或丧失。为此，欧洲白血病网络和癌症网络指南均推荐在aml患者中测试flt3-itd。
3、早期研究的flt3抑制剂，称为第一代flt3抑制剂，包括多激酶抑制剂索拉非尼(sorafenib)、米哚妥林(midostaurin)、来他替尼(lestaurtinib)、舒尼替尼(sunitinib)和坦度替尼(tandutinib)。所述这些第一代抑制剂缺乏作为单一疗法的功效，最可能部分是由于它们的非特异性作用。尽管这些第一代抑制剂中的许多已作为单一疗法或与化学疗法组合而被放弃作为aml的治疗剂，但米哚妥林(rydapt)与化学疗法联用在2017年对患有新诊断的ftl3突变型aml的成人获得fda批准。
4、第二代flt3抑制剂对flt3具有更大的特异性并且更有效。第二代抑制剂包括吉瑞替尼(gilteritinib)、克诺拉尼(crenolanib)和奎扎替尼(quizartinib)。吉瑞替尼和克诺拉尼均是i型抑制剂，意味着其可结合flt3的无活性和活性构象两者，而奎扎替尼是仅可结合无活性构象的ii型抑制剂。2018年，fda批准吉瑞替尼用于flt3突变患者的复发性或难治性aml。在研究奎扎替尼与诱导或巩固化学疗法(quantum-r)组合在患有复发性或难治性flt3-itd aml患者中的作用的iii期试验中，奎扎替尼表现出存活益处及可管理的安全性特征(cortes et al.,2019,lancet oncol.,20:984)。目前，正在iii期临床试验中研究克诺拉尼用于治疗具有flt3突变的患者的复发性或难治性aml。
5、flt3的另一种抑制剂包括共价结合的flt3抑制剂ff-10101，其已证明对奎扎替尼耐药aml具有活性(yamaura et al.,2018,blood,131:426)，并且目前正在针对复发性或难治性血液系统恶性肿瘤(包括aml)的临床试验中进行研究。ff-10101和其他n-苯基嘧啶-2-胺类化合物记载在pct申请wo 2013/157540以及转让给fujifilm公司的美国专利号9,145,415中。pct申请wo 2015/056683和美国专利号9,701,644，亦是转让给fujifilm公司，描述了ff-10101的结晶形式。转让给fujifilm公司的描述ff-10101和ff-10101用于某些类型癌症用途的其他专利及专利申请包括pct申请wo 2016/027904、wo 2020/075838、wo 2020/175629、和美国专利号9,987,278。
6、hanmi pharmaceutical有限公司在pct申请wo 2020/022600、wo 2020/171646、wo2020/171649、和wo 2020/262974中描述了含嘧啶的化合物以及这些化合物在flt3突变型癌症中的用途。含有嘧啶的flt3抑制剂hm43239目前正在进行1/2期临床试验，用于患有复发性或难治性耐药性aml的患者(daver et al.2019,blood,134:1331)。
7、genosco和oscotec公司在pct申请wo 2013/142382和美国专利号8,877,763中描述了吡啶并嘧啶类化合物及其在治疗血液系统恶性肿瘤中的用途。在转让给oscotec公司的wo 2020/040467中描述了特异性flt3抑制剂g-749的晶型，在亦转让给oscotec公司的wo2020/159117中描述了g-749的口服药物组合物。
8、就生物学而言，据报导这些抑制剂可阻断flt3在tyr-589/591处的自身磷酸化及下游信号传导介质信号转导子和转录激活子5(stat5)和细胞外信号相关激酶(erk)(wanget al.,2021,j.med.chem.64(8):4870-4890)。对flt3抑制剂的抗性已在临床中通过flt3中的二级突变(包括先前仅itd突变肿瘤中的酪氨酸激酶结构域中的突变)报导(heidel etal.,2006,blood 107(1):293-300,smith et al.,2012,nature 485(7397):260-263)。
9、尽管在该领域进行了研究，仍然需要递送有效的化合物来抑制flt3。因此，本发明目的是提供flt3抑制剂、其药物组合物、及抑制flt3的方法。同样重要的是开发能够克服已知itd共同突变抗性机制的抑制剂，所述itd共同突变可重新唤醒flt3的自身磷酸化能力。
10、发明摘要
11、在一态样中，本发明描述了flt3的抑制剂。本发明还描述了flt3的特异性杂环化合物类抑制剂。在一些实施方案，flt3抑制剂是共价抑制剂。在一些实施方案，flt3抑制剂是非共价抑制剂。
12、在另一态样中，本发明描述了合成此类共价抑制剂的方法，使用此类共价抑制剂治疗疾病(包括其中flt3的抑制对患有该疾病的患者提供治疗益处的疾病)的方法。本发明还描述了包含flt3抑制剂以及一种或多种药学上可接受的载体、辅料或稀释剂的药物组合物。本发明还描述了抑制flt3的化合物及其使用方法。在某些实施方案，本发明所述的化合物和药物组合物用于治疗血液系统恶性肿瘤，包括但不限于急性髓细胞性白血病。
13、在一些实施方案，本发明提供了具有以下结构的式(p6-i)所示化合物：
14、
15、或其立体异构体、或其药学上可接受的盐，
16、其中：a1、a2、a3和a4各自独立地为–c(r7)＝或-n＝；条件是a1、a2、a3和a4中不超过两个为n；
17、l1和l3各自独立地为取代或未取代的c1-c4亚烷基；
18、r1是h、卤素、cn、取代或未取代的c1-6烷基、取代或未取代的烷氧基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的环烷基、或取代或未取代的杂环烷基；
19、r2b独立地为h或c1-c4烷基；
20、r4是i)-c(o)-c(r6a)＝c(r6b)(r6c)，ii)-s(o)-c(r6a)＝c(r6b)(r6c)，iii)-s(o)2-c(r6a)＝c(r6b)(r6c)，或iv)取代或未取代的环氧化物；
21、r5是h、cy、cn、卤素、取代或未取代的c1-6烷基、取代或未取代的卤代烷基、取代或未取代的c1-6烷氧基、取代或未取代的卤代烷氧基、取代或未取代的烷基氨基；
22、cy是取代或未取代的环烷基、或取代或未取代的杂环烷基；
23、各r6a和r6b分别独立地为h、卤素、cn、或c1-6烷基；或r6a与r6b连接在一起形成键；r6c是h、卤素、cn、或c1-6烷基，其中所述c1-6烷基未被取代或被选自下列基团中的一个或多个取代：取代或未取代的氨基、取代或未取代的羟基、和取代或未取代的具有1-2个独立选自n、o和s的杂原子的杂环烷基；和
24、各r7分别独立地为h、卤素、cn、取代或未取代的c1-6烷基、取代或未取代的烷氧基，或取代或未取代的杂环烷基。
25、在一些实施方案，本发明提供了式(p6-iia)或(p6-iib)所示化合物：
26、
27、或其立体异构体、或其药学上可接受的盐。
28、在一些实施方案，本发明提供了式(p6-iiia)、(p6-iiib)、(p6-iiic)或(p6-iiid)所示化合物：
29、
30、或其立体异构体、或其药学上可接受的盐。
31、在一些实施方案，对于本发明所述的任一式所示化合物，r5是h、cy、cn、卤素、c1-6烷基、c1-6烷氧基或c1-6烷基氨基；cy是环烷基或杂环烷基；cy、烷基、烷氧基和烷基氨基各自未被取代或各自被下列中的一个或多个取代：卤素、cn、c1-4烷基、羟基、氨基、烷基氨基或二烷基氨基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、或c1-4烷氧基。
32、在一些实施方案，对于本发明所述的任一式所示化合物，r5是me、et、n-pr、i-pr、i-bu、环丙基、n,n-二甲基、n-乙基-n-甲基、n-异丙基氨基、n-异丙基-n-甲基氨基、甲氧基、乙氧基、或异丙氧基。
33、在一些实施方案，对于本发明所述的任一式所示化合物，r4是-c(o)-b-c(r6a)＝c(r6b)-c(o)-r6c、-s(o)-b-c(r6a)＝c(r6b)-c(o)-r6c、-s(o)2-b-c(r6a)＝c(r6b)-c(o)-r6c、-b-c(r6a)＝c(r6b)-c(o)-r6c、-b-c(r6a)＝c(r6b)-s(o)-r6c、-b-c(r6a)＝c(r6b)-s(o)2-r6c、-b-c(r6a)＝c(r6b)-p(o)-r6ar6b、或-b-c(r6a)＝c(r6b)-p(o)-or6aor6b；b是取代或未取代的c1-4亚烷基、取代或未取代的环烷基、或取代或未取代的杂环烷基；和r6c是取代或未取代的烷氧基、取代或未取代的氨基、取代或未取代的杂环烷基，其中所述杂环烷基具有1-2个独立选自n、o和s的杂原子。在一些实施方案，r4是-ch2-ch＝ch-c(o)-n(ch3)2。在一些实施方案，r4是-ch2-c≡ch-c(o)-n(ch3)2。
34、在某些实施方案，所述化合物能够共价结合flt3。在某些实施方案，所述化合物包含能够共价结合flt3的官能团，例如在r4处。在某些实施方案，所述化合物包含促进共价结合flt3的连接体(linker)。虽然不希望受任何操作理论的束缚，但据信结构式p6-i的右侧(l1右侧)形成能够结合flt3的结合袋的官能团。本发明提供的化合物的连接体提供足够的长度和组成以提供r4与flt3上的位点(例如cys12)的共价结合。在某些实施方案，所述连接体包含l1。在某些实施方案，所述连接体包含l3。在某些实施方案，所述连接体包含l1和l3。在某些实施方案，所述连接体是-l1-n(h)-c(o)-l3-。在某些实施方案，所述连接体促进共价结合，这将所述化合物与所属技术领域的通常知识者已知的具有不足以促进flt3的充分或任何共价结合的长度或组成或两者的连接体的化合物区分开。
35、在某些实施方案，所述化合物不为化合物1-41中的任一种、或其任何盐。
36、
37、
38、
39、
40、
41、在某些实施方案，所述化合物不为化合物14-p19中的任一种、或其任何盐。
42、
43、本发明考虑上述各种变量的基团的任何组合。应当理解，所属技术领域的通常知识者可选择本发明提供的化合物上的取代基和取代模式，以提供化学稳定的化合物，并且可通过本领域已知的技术以及本发明所述的技术合成得到。
44、在一些实施方案，本发明提供了药物组合物，其包含治疗有效量的至少一种本发明任何化合物、或其药学上可接受的盐、药学活性代谢物、药学上可接受的前药或药学上可接受的溶剂化物。在某些实施方案，本发明提供的药物组合物进一步包含药学上可接受的载体、辅料和/或稀释剂。
45、本发明提供了配制用于通过合适途径和方式给药的药物组合物，其含有有效浓度的一种或多种本发明提供的化合物或其药学上有效的衍生物，所述药物组合物递送可有效治疗、预防或改善疾病、病症或病况的一种或多种症状的量，所述疾病、病症或病况受flt3活性调节或以其他方式影响，其中涉及flt3活性，或其特征在于flt3基因中的突变。所述有效量和浓度对于改善本发明公开的任何疾病、病症或病况的任何症状是有效的。
46、在某些实施方案，本发明提供了药物组合物，其包含：i)药学上可接受的载体、稀释剂和/或辅料；以及ii)一种或多种本发明提供的化合物。
47、在一些实施方案，本发明提供了药物组合物，其包含治疗有效量的选自式(p2-i)、式(p4-i)-(p4-vb)、式(p5-i’)-(p5-vd)和式(p6-i)-(p6-iiid)的化合物以及药学上可接受的载体、辅料或稀释剂。在一些实施方案，将包含选自式(p2-i)、式(p4-i)-(p4-vb)、式(p5-i’)-(p5-vd)和式(p6-i)-(p6-iiid)所示化合物的药物组合物配制成选自口服施用、肠胃外施用、经颊施用、经鼻施用、局部施用和直肠施用的施用途径。
48、在一些实施方案，本发明提供了预防、治疗或改善哺乳动物与flt3异常活性相关的疾病或病症的方法，其包括向所述哺乳动物施用有效治疗疾病或治疗病症量的选自式(p2-i)、式(p4-i)-(p4-vb)、式(p5-i’)-(p5-vd)和式(p6-i)-(p6-iiid)所示化合物或其药学上可接受的盐。在其他实施方案，本发明提供了预防、治疗或改善哺乳动物与flt3基因突变相关的疾病或病症的方法，其包括向哺乳动物施用有效治疗疾病或治疗病症量的选自式(p2-i)、式(p4-i)-(p4-vb)、式(p5-i’)-(p5-vd)和式(p6-i)-(p6-iiid)所示化合物或其药学上可接受的盐。在某些实施方案，flt3突变是内部串联突变(flt3-itd)。在某些实施方案，flt3突变是酪氨酸激酶结构域(flt3-tkd)中的点突变。
49、在一些实施方案，所述疾病或病症是血液系统恶性肿瘤，包括但不限于白血病、淋巴瘤或多发性骨髓瘤。在某些实施方案，所述疾病或病症是白血病，包括但不限于急性淋巴细胞白血病(all)、急性髓细胞性白血病(aml)、慢性淋巴细胞白血病(cll)、慢性骨髓性白血病(cml)、幼淋巴细胞白血病(pll)、大颗粒淋巴细胞白血病(lgl)、毛细胞白血病(hcl)、肥大细胞白血病(mcl)、或骨髓增生异常综合征(mds)。
50、在某些实施方案，所述疾病或病症是急性髓细胞性白血病(aml)。在某些实施方案，所述aml是flt3突变阳性的。在某些实施方案，所述aml是新诊断的。在某些实施方案，所述aml是flt3突变阳性且是新诊断的。在某些实施方案，所述aml是复发性或难治性的。在某些实施方案，所述aml是复发性或难治性aml，并且是flt3突变阳性的。在某些实施方案，所述患者具有npm1突变。
51、在某些实施方案，所述疾病或病症是淋巴瘤，包括但不限于非霍奇金淋巴瘤或霍奇金淋巴瘤。在某些实施方案，所述疾病或病症是多发性骨髓瘤。
52、在一些实施方案，本发明提供了选自式(p2-i)、式(p4-i)-(p4-vb)、式(p5-i’)-(p5-vd)和式(p6-i)-(p6-iiid)所示化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗。在一些实施方案，本发明提供了选自式(p2-i)、式(p4-i)-(p4-vb)、式(p5-i’)-(p5-vd)和式(p6-i)-(p6-iiid)所示化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗与体内flt3异常活性相关的疾病或病症。在一些实施方案，本发明提供了选自式(p2-i)、式(p4-i)-(p4-vb)、式(p5-i’)-(p5-vd)和式(p6-i)-(p6-iiid)所示化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗。在一些实施方案，本发明提供了选自式(p2-i)、式(p4-i)-(p4-vb)、式(p5-i’)-(p5-vd)和式(p6-i)-(p6-iiid)所示化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗与体内flt3基因中的突变相关的疾病或病症。在一些实施方案，本发明提供了选自式(p2-i)、式(p4-i)-(p4-vb)、式(p5-i’)-(p5-vd)和式(p6-i)-(p6-iiid)所示化合物或其药学上可接受的盐，其用于制备治疗用药物。在一些实施方案，本发明提供了选自式(p2-i)、式(p4-i)-(p4-vb)、式(p5-i’)-(p5-vd)和式(p6-i)-(p6-iiid)所示化合物或其药学上可接受的盐，其用于制备治疗与flt3异常活性相关或与flt3基因突变相关的疾病或病症的药物。有用的疾病和病症在本发明中描述。
53、在一些实施方案，本发明提供了用于治疗的药物组合物，其包含选自式(p2-i)、式(p4-i)-(p4-vb)、式(p5-i’)-(p5-vd)和式(p6-i)-(p6-iiid)所示化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案，本发明提供了包含选自式(p2-i)、式(p4-i)-(p4-vb)、式(p5-i’)-(p5-vd)和式(p6-i)-(p6-iiid)所示化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物，其用于治疗与flt3异常活性相关或与flt3基因突变相关的疾病或病症。在一些实施方案，本发明提供了用于制备治疗用药物的药物组合物，其包含选自式(p2-i)、式(p4-i)-(p4-vb)、式(p5-i’)-(p5-vd)和式(p6-i)-(p6-iiid)所示化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案，本发明提供了包含选自式(p2-i)、式(p4-i)-(p4-vb)、式(p5-i’)-(p5-vd)和式(p6-i)-(p6-iiid)所示化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物，其用于制备治疗与体内flt3异常活性相关或与flt3基因突变相关的疾病或病症的药物。有用的疾病和病症在本发明中描述。
54、在任一上述实施方案中，是一些实施方案，其中施用是肠内、胃肠外或两者，和其中(a)将有效量的所提供化合物全身施用于所述哺乳动物；(b)将有效量的所提供化合物口服施用于所述哺乳动物；(c)将有效量的所提供化合物静脉内施用于所述哺乳动物；(d)将有效量的所提供化合物通过吸入施用；(e)将有效量的所提供化合物通过经鼻给药进行施用；或(f)将有效量的所提供化合物通过注射施用于所述哺乳动物；(g)将有效量的所提供化合物局部(经皮)施用于所述哺乳动物；(h)将有效量的所提供化合物通过眼部给药进行施用；或(i)将有效量的所提供化合物经直肠施用于所述哺乳动物。
55、在任一上述实施方案，是包含单次施用有效量的所提供化合物的一些实施方案，包括以下一些实施方案：其中(i)所提供化合物施用一次；(ii)在一天的时间间隔内将所提供化合物多次施用于所述哺乳动物；(iii)连续地施用；或(iv)持续地施用。
56、在任一上述实施方案，是包含多次施用有效量的所提供化合物的一些实施方案，包括以下一些实施方案：其中(i)以单次剂量施用所提供化合物；(ii)多次给药间隔为每6小时；(iii)每8小时向哺乳动物施用所提供化合物。在一些实施方案，所述方法包含药物假期，其中暂时中止所述化合物的施用或暂时减少所施用的化合物的剂量；在药物假期结束时，重新开始所述化合物的给药。药物假期的长度可从2天到1年不等。
57、在涉及治疗增殖性疾病包括癌症(例如血液学癌症)的任一上述实施方案中，是一些实施方案，包含施用至少一种选自由以下组成的组的附加药物：阿仑单抗(alemtuzumab)、阿扎胞苷(azacitine)、硼替佐米(bortezomib)、地西他滨(decitabine)、依维莫司(everolimus)、马拉米坦(malademetan)、帕博西尼(palbociclib)、普纳替尼(ponatinib)、维奈托克(venetoclax)和伏立诺他(vorinostat)。在其他实施方案，包括癌症例如血液学癌症的增殖性病症的治疗包括施用至少一种选自下列的附加活性剂：三氧化二砷、天冬酰胺酶(聚乙二醇化或非聚乙二醇化)、贝伐单抗(bevacizumab)、西妥昔单抗(cetuximab)、基于铂的化合物类(例如顺铂(cisplatin))、克拉屈滨(cladribine)、道诺霉素(daunorubicin)/多柔比星(doxorubicin)/伊达比星(idarubicin)、伊立替康(irinotecan)、氟达拉滨(fludarabine)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)、吉妥珠单抗(gemtuzumab)、甲氨蝶呤(methotrexate)、paclitaxeltm、紫杉醇(taxol)、替莫唑胺(temozolomide)、硫鸟嘌呤(thioguanine)，或药物类别包括激素类(抗雌激素、抗雄激素、或促性腺激素释放激素类似物)，干扰素类例如α干扰素，氮芥类例如硫酸白消安(busulfan)或美法仑(melphalan)或二氯甲基二乙胺(mechlorethamine)，类视黄醇类例如维甲酸(tretinoin)，不可逆拓扑异构酶抑制剂类例如伊立替康(irinotecan)或拓扑替康(topotecan)，酪氨酸激酶不可逆抑制剂类例如吉非替尼(gefinitinib)或伊马替尼(imatinib)，或治疗由此类治疗诱导的体征或症状的药物，包括别嘌呤醇(allopurinol)、非格司亭(filgrastim)、格拉司琼(granisetron)/昂丹司琼(ondansetron)/帕洛诺司琼(palonosetron)、屈大麻酚(dronabinol)。
58、在某些实施方案，本发明提供了制品，其包括包装材料、于包装材料内的本发明提供的化合物或其组合物、以及指示施用所述化合物或组合物以治疗疾病或病症的标签。
59、在一些实施方案，式(p2-i)、式(p4-i)-(p4-vb)、式(p5-i’)-(p5-vd)和式(p6-i)-(p6-iiid)所示化合物是flt3活性的共价抑制剂。在某些实施方案，在酶试验中，此类共价抑制剂具有低于10μm(microm)的ic50。在一些实施方案，flt3抑制剂具有小于1μm的ic50，在一些实施方案，小于0.25μm或甚至小于0.025μm。
60、本发明所述的方法和组合物的其他目的、特征及优点将从下文详细描述中变得显而易见。然而，应当理解，详细描述和具体示例虽然指示具体实施方案，但仅以说明的方式给出，因为根据此详细描述，在本发明的精神和范围内的各种改变和修改对于所属技术领域的通常知识者将变得显而易见。本发明所用的章节标题仅用于组织目的，而不应被解释为限制所描述的主题。本技术中引用的所有文件或文件的部分，包括但不限于专利、专利申请、文章、书籍、手册及论文，出于任何目，通过引用其全部内容明确地并入本发明。
技术实现思路
1.式(p6-i)所示化合物：
2.根据权利要求1所述的化合物，其中，a1、a2和a4各自为ch，和a3是cr7。
3.根据权利要求1所述的化合物，其中，a1和a2各自为ch；a3是cr7，和a4是n。
4.根据权利要求1所述的化合物，其中，所述化合物具有式(p6-iia)或(p6-iib)所示结构：
5.根据权利要求1-4任一项所述的化合物，其中，l1是-ch2-ch2-、-c(me)h-ch2-、或-ch2-c(me)h-。
6.根据权利要求1-4任一项所述的化合物，其中，l1是-ch2-c(me)h-。
7.根据权利要求1所述的化合物，其中，所述化合物具有式(p6-iiia)、(p6-iiib)、(p6-iiic)或(p6-iiid)所示结构：
8.根据权利要求1-7任一项所述的化合物，其中，r1是h、me、或et。
9.根据权利要求1所述的化合物，其中，所述化合物具有式(p6-iva)、(p6-ivb)、(p6-ivc)或(p6-ivd)所示结构：
10.根据权利要求1-9任一项所述的化合物，其中，l3是-ch2-、或-c(me)h-。
11.根据权利要求1-9任一项所述的化合物，其中，l3是-c(me)2-、-ch2-ch2-、-c(me)h-ch2-、-ch2-c(me)h-、或
12.根据权利要求1-11任一项所述的化合物，其中，r2b是h、或me。
13.根据权利要求1-12任一项所述的化合物，其中，r7是h、f、me、et、cl、cf3、或ome。
14.根据权利要求1-13任一项所述的化合物，其中，r5是cy，所述cy未被取代或被下列中的一个或多个取代：卤素、cn、c1-4烷基、羟基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、或c1-4烷氧基；和环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基各自上的取代基分别选自下列中的一个或多个：卤素、cn、c1-4烷基、羟基、和c1-4烷氧基；和cy是环烷基、或杂环烷基。
15.根据权利要求1-13任一项所述的化合物，其中，r5是未取代或取代的c1-6烷基、未取代或取代的c1-6烷氧基、或未取代或取代的烷基氨基；烷基、烷氧基和烷基氨基各自未被取代或各自被下列中的一个或多个取代：卤素、cn、c1-4烷基、羟基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、或c1-4烷氧基；和环烷基、杂环烷基、芳基和杂芳基各自上的取代基分别选自下列中的一个或多个：卤素、cn、c1-4烷基、羟基、和c1-4烷氧基。
16.根据权利要求1-13任一项所述的化合物，其中，r5是me、et、i-pr、n-pr、n-bu、i-bu、t-bu、sec-bu、取代或未取代的环丙基、取代或未取代的环丁基、取代或未取代的环戊基、取代或未取代的环己基、cl、f、cn、cf3、ome、oet、o-i-pr、-ocf3、n,n-二甲基氨基、n,n-二乙基氨基、n,n-二异丙基氨基、n-乙基-n-甲基氨基、n-异丙基-n-甲基氨基、n-异丙基-n-乙基氨基、n-异丙基氨基、n-乙基氨基、n-甲基氨基、n-正丙基氨基、取代或未取代的1-氮杂环丁烷基、取代或未取代的1-吡咯烷基、取代或未取代的1-哌啶基、或取代或未取代的1-吗啉基；和环丙基、环丁基、环戊基和环己基各自上的取代基分别选自下列中的一个或多个：卤素、cn、c1-4烷基、羟基、和c1-4烷氧基。
17.根据权利要求1-13任一项所述的化合物，其中，r5是me、et、n-pr、i-pr、i-bu、环丙基、n,n-二甲基、n-乙基-n-甲基、n-异丙基氨基、n-异丙基-n-甲基氨基、甲氧基、乙氧基、或异丙氧基。
18.根据权利要求1-17任一项所述的化合物，其中，r4是-c(o)-c(r6a)＝c(r6b)(r6c)。
19.根据权利要求1-17任一项所述的化合物，其中，r6a、r6b和r6c各自为h。
20.根据权利要求1-17任一项所述的化合物，其中，r6a和r6b各自为h；和r6c是被氨基、烷基氨基、或二烷基氨基取代的烷基。
21.根据权利要求1-17任一项所述的化合物，其中，r6a与r6b形成键；和r6c是h、或取代或未取代的烷基；和烷基上的取代基选自下列中的一个或多个：卤素、cn、c1-4烷基、羟基、c1-4烷氧基、和杂环烷基，其中所述杂环烷基具有1-2个独立选自n、o和s的杂原子。
22.根据权利要求1-17任一项所述的化合物，其中，r6a与r6b形成键；和r6c是me。
23.根据权利要求1-17任一项所述的化合物，其中，r6a和r6b各自为h；和r6c是-(ch2)q-杂环烷基；和q是1。
24.根据权利要求23所述的化合物，其中，杂环烷基是取代或未取代的氮杂环丁烷-1-基、取代或未取代的吡咯烷-1-基、取代或未取代的哌啶-1-基、取代或未取代的吗啉-1-基、或取代或未取代的氮杂-1-基(azepin-1-yl)；和氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基和氮杂基(azepinyl)各自上的取代基分别选自下列中的一个或多个：卤素、cn、c1-4烷基、羟基、和c1-4烷氧基。
25.根据权利要求1-17任一项所述的化合物，其中，r6a和r6b各自为h、或me；和r6c是–ch2-氮杂环丁烷-1-基、–ch2-吡咯烷-1-基、或–ch2-哌啶-1-基。
26.根据权利要求1-17任一项所述的化合物，其中，r4是-c(o)-ch＝ch2、-c(o)-ch＝ch-ch2-nhme、-c(o)-ch＝ch-ch2-nme2、-c(o)-ch＝ch-ch2-氮杂环丁烷-1-基、-c(o)-ch＝ch-ch2-(3-氟氮杂环丁烷-1-基)、-c(o)-ch＝ch-ch2-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)、-c(o)-c≡ch、-c(o)-c≡c-me、或-c(o)-c≡c-ch2-nme2。
27.根据权利要求1所述的化合物，其中，所述化合物选自表2a所列化合物中的任一种，或其药学上可接受的立体异构体、盐、或溶剂化物；条件是所述化合物不为c-1、c-2、c-3、和吉瑞替尼(gilteritinib)。
28.根据权利要求1所述的化合物，其中，所述化合物选自化合物id 204、252、310、509、511和516a；或其药学上可接受的立体异构体、盐、或溶剂化物。
29.根据权利要求1所述的化合物，其中，所述化合物选自化合物id 308、315、506、507、508、513、512、513、517和520；或其药学上可接受的立体异构体、盐、或溶剂化物。
30.根据权利要求1所述的化合物，其中，所述化合物选自化合物id 506和516；或其药学上可接受的立体异构体、盐、或溶剂化物。
31.根据权利要求1所述的化合物，其中，所述化合物是化合物id 204；或其药学上可接受的立体异构体、盐、或溶剂化物。
32.根据权利要求1所述的化合物，其中，所述化合物是化合物id 516a；或其药学上可接受的立体异构体、盐、或溶剂化物。
33.根据权利要求1所述的化合物，其中，所述化合物是化合物id 252；或其药学上可接受的立体异构体、盐、或溶剂化物。
34.根据权利要求1所述的化合物，其中，所述化合物是化合物id 506；或其药学上可接受的立体异构体、盐、或溶剂化物。
35.根据权利要求1所述的化合物，其中，所述化合物是化合物id 511；或其药学上可接受的立体异构体、盐、或溶剂化物。
36.药物组合物，其包含治疗有效量的权利要求1-35任一项所述的化合物；或其药学上可接受的立体异构体、盐、溶剂化物、或前药；以及药学上可接受的辅料。
37.根据权利要求36所述的药物组合物，其经配制用于选自口服施用、肠胃外施用、经颊施用、经鼻施用、局部施用、或直肠施用的施用途径。
38.治疗增殖性疾病或病症的方法，其包含向有需要的患者施用治疗有效量的权利要求36或37所述的药物组合物。
39.治疗增殖性疾病或病症的方法，其包含向有需要的患者施用权利要求36或37所述的药物组合物。
40.治疗癌症的方法，其包含向有需要的患者施用治疗有效量的权利要求36或37所述的药物组合物。
41.根据权利要求40所述的方法，其中，所述癌症是血液系统恶性肿瘤。
42.根据权利要求40所述的方法，其中，所述血液系统恶性肿瘤是急性淋巴细胞白血病(all)、急性髓细胞性白血病(aml)、慢性淋巴细胞白血病(cll)、慢性髓细胞性白血病(cml)、幼淋巴细胞白血病(pll)、大颗粒淋巴细胞白血病(lgl)、毛细胞白血病(hcl)、肥大细胞白血病(mcl)、或骨髓增生异常综合征(mds)。
43.根据权利要求37所述的方法，其中，所述患者具有选自n676k、f691l、d835h、d835v、d835y、y842c及其组合的flt3突变。
44.使用权利要求1-35任一项所述的化合物或其代谢物、溶剂化物、药学上可接受的立体异构体、盐或前药，或权利要求36或37所述的药物组合物在制备药物中的用途。
45.根据权利要求1-35任一项所述的化合物或其代谢物、溶剂化物、药学上可接受的立体异构体、盐或前药，或根据权利要求36或37所述的药物组合物，其用作药物。
46.根据权利要求1-35任一项所述的化合物或其代谢物、溶剂化物、药学上可接受的立体异构体、盐或前药，或根据权利要求36或37所述的药物组合物，其用于治疗、防止或预防增殖性疾病。
47.根据权利要求1-35任一项所述的化合物或其代谢物、溶剂化物、药学上可接受的立体异构体、盐或前药，或根据权利要求36或37所述的药物组合物，其用于治疗、防止或预防血液系统恶性肿瘤。
48.使用权利要求1-35任一项所述的化合物或其代谢物、溶剂化物、药学上可接受的立体异构体、盐或前药在制备用于治疗、防止或预防增殖性疾病的药物中的用途。
49.使用权利要求1-35任一项所述的化合物或其代谢物、溶剂化物、药学上可接受的立体异构体、盐或前药在制备用于治疗、防止或预防血液系统恶性肿瘤的药物中的用途。
50.根据权利要求1-35任一项所述的化合物、根据权利要求36或37所述的药物组合物、根据权利要求40-48任一项所述的方法、或根据权利要求49-50任一项所述的用途，其中，所述化合物是flt3抑制剂。
