本发明涉及眼部医疗用品,具体涉及一种蛋白护眼液及其制备工艺。
背景技术:
1、现代人们的近视问题越来越普遍,部分人群为了美观会佩戴隐形眼镜,在佩戴过隐形眼镜后,眼睛会出现疲劳、干涩和细菌侵入等问题,因此,能够缓解眼睛疲劳和保护眼睛健康的护眼液也随之出现。
2、现有的护眼液大多使用能够舒缓眼部细胞的成分,如胶原蛋白对眼部进行保护,然而对于细菌侵入的问题则解决较少,并且,部分护眼液中的蛋白成分还会为细菌提供养分,杀菌作用较低,而一部分含有杀菌成分的护眼液的成分则由于主要用于杀菌而对眼睛有一定刺激性,因此成为了人们拒绝选择的对象,因此,需要一种在具有杀菌成分的同时对眼部低刺激或无刺激的护眼液,以解决现有技术存在的不足。
技术实现思路
1、针对现有技术存在的不足,本发明的目的在于提供一种蛋白护眼液及其制备工艺。
2、一种蛋白护眼液的制备工艺,包括以下步骤:
3、s1:制备白蛋白纳米粒
4、称取牛血清白蛋白,溶解于pbs溶液中,加入复合乳化剂,得到待乳化溶液,将待乳化溶液加入超声机中超声乳化,再旋蒸,随后在搅拌下滴加无水乙醇直至形成胶体溶液,向胶体溶液中加入戊二醛继续搅拌固化,高速离心后洗涤,收集沉淀物,冷冻干燥,得到白蛋白纳米粒;
5、s2:制备紫云英苷
6、将山奈酚底物、蔗糖、udp、tris-hcl缓冲液、mgcl、dmso、fct和gmsus的酶液,在32-35℃,200-250r/min条件下反应1-4h,加入甲醇终止反应,离心取上清液,得到反应液ⅰ,将反应液ⅰ进行二次离心,获得的上清液加入到lh-20葡聚糖凝胶柱中,用乙醇溶液进行平衡和洗脱,收集洗脱液,冷冻干燥,得到紫云英苷;
7、s3:制备紫云英苷纳米白蛋白
8、将紫云英苷溶于去离子水中,得到紫云英苷水溶液,稀盐酸调节紫云英苷水溶液的ph至4-5.5,依次加入edc和nhs,避光搅拌活化,将白蛋白纳米粒与紫云英苷混合,高速离心后洗涤,收集沉淀物,冷冻干燥,即得紫云英苷纳米白蛋白;
9、s4:制备紫云英苷纳米白蛋白滴眼液
10、将羟丙基-β-环糊精和去离子水恒温磁力搅拌直至溶解,再加入甘露醇,得到饱和水溶液,称取紫云英苷,缓慢加入到饱和水溶液中,超声后补水到100体积份,得到中间液,再加入紫云英苷纳米白蛋白室温搅拌过夜,0.22μm滤膜过滤后得到紫云英苷纳米白蛋白滴眼液。
11、进一步地,步骤s1制备白蛋白纳米粒,包括以下步骤:
12、s1.1:称取牛血清白蛋白,溶解于pbs溶液中,牛血清白蛋白和pbs溶液中料液比为1:(18-20),并将体系ph调节至7.5-8,加入浓度为0.5-0.75%的复合乳化剂,得到待乳化溶液;
13、s1.2:将待乳化溶液加入超声机中超声乳化10-15min,再转移至旋转蒸发仪,旋蒸10-15min,随后在搅拌下滴加无水乙醇直至形成胶体溶液;
14、s1.3:向胶体溶液中加入戊二醛继续搅拌固化1-2h,高速离心后洗涤1-3次,收集沉淀物,冷冻干燥,得到白蛋白纳米粒。
15、进一步地,步骤s2制备紫云英苷,包括以下步骤:
16、s2.1:将1-2mmol/l山奈酚底物、100-110mmol/l蔗糖、0.2-0.3mmol/ludp、100-120mmol/ltris-hcl缓冲液、50-60mmol/lmgcl、5-6%dmso、fct和gmsus的酶液各8-10体积份,在32-35℃,200-250r/min条件下反应1-4h,加入20-30体积份甲醇终止反应,在0-4℃的环境下,12000-15000r/min的转速离心8-10min,取上清液,得到反应液ⅰ;
17、s2.2:将反应液ⅰ进行二次离心,12000-15000r/min离心10-15min,获得的上清液加入到lh-20葡聚糖凝胶柱中,用45-50%的乙醇溶液进行平衡和洗脱,收集洗脱液,冷冻干燥,得到紫云英苷。
18、进一步地,步骤s3制备紫云英苷纳米白蛋白,包括以下步骤:
19、s3.1:将1-5体积份紫云英苷溶于10-15体积份去离子水中,得到紫云英苷水溶液,稀盐酸调节紫云英苷水溶液的ph至4-5.5,按1:(1.5-2):(1.2-1.5)的比例依次加入edc和nhs,避光搅拌活化1-2h;
20、s3.2:按白蛋白纳米粒与紫云英苷质量比为1∶(4-5)的比例混合,用pbs溶液调节体系ph至7-7.5,搅拌反应12-14h,高速离心后洗涤1-3次,收集沉淀物,冷冻干燥,即得紫云英苷纳米白蛋白。
21、进一步地,步骤s4制备紫云英苷纳米白蛋白滴眼液,包括以下步骤:
22、s4.1:将25-30质量份羟丙基-β-环糊精和40-45体积份去离子水置于60-65℃的环境中恒温磁力搅拌直至溶解,再加入0.15-0.2质量份甘露醇,得到饱和水溶液;
23、s4.2:称取紫云英苷0.2-1质量份,缓慢加入到60-65℃的饱和水溶液中,超声60-65min,补水到100体积份,得到中间液;
24、s4.3:再加入紫云英苷纳米白蛋白室温搅拌过夜,0.22μm滤膜过滤后得到紫云英苷纳米白蛋白滴眼液。
25、进一步地,步骤s1中复合乳化剂为酪蛋白酸钠和泊洛沙姆以2:1的体积比混合制成。
26、进一步地,步骤s2中tris-hcl缓冲液的ph为7。
27、进一步地,步骤s1中胶体溶液和戊二醛的体积比为1:(0.2-0.5)。
28、进一步地,步骤s4中紫云英苷纳米白蛋白和中间液的体积比为1:(2-3)。
29、一种蛋白护眼液,其由上述蛋白护眼液的制备工艺制备得到。
30、本发明与现有技术相比,至少具有如下有益效果:
31、1、本发明通过将白蛋白纳米粒与紫云英苷偶联,利用纳米粒包覆紫云英苷,从而降低紫云英苷的刺激性,并且,纳米粒包覆紫云英苷能够防止紫云英苷在护眼液中聚集,从而保证护眼液的稳定性和分散性,并且在护眼液中缓慢释放,从而保证紫云英苷药效的稳定性,并且更加温和,从而达到护眼的作用。
32、2、本发明通过β-环糊精包合紫云英苷,环糊精作为包合物外衣容易解离,并且不会改变被包合物的药性,通过这种方式令药物进入眼睛可以降低刺激性,并且增强稳定性,与白蛋白纳米粒偶联紫云英苷配合,可以在保证紫云英苷浓药量浓度的前提下,减少刺激性,并通过缓慢释放延长护眼液的起效时间,并使其质量更加稳定。
1.一种蛋白护眼液的制备工艺,其特征在于,包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种蛋白护眼液的制备工艺,其特征在于,步骤s1制备白蛋白纳米粒,包括如下步骤:
3.根据权利要求2所述的一种蛋白护眼液的制备工艺,其特征在于,步骤s2制备紫云英苷,包括如下步骤:
4.根据权利要求3所述的一种蛋白护眼液的制备工艺,其特征在于,步骤s3制备紫云英苷纳米白蛋白,包括如下步骤:
5.根据权利要求4所述的一种蛋白护眼液的制备工艺,其特征在于,步骤s4制备紫云英苷纳米白蛋白滴眼液,包括如下步骤:
6.根据权利要求5所述的一种蛋白护眼液的制备工艺,其特征在于,步骤s1中复合乳化剂为酪蛋白酸钠和泊洛沙姆以2:1的体积比混合制成。
7.根据权利要求6所述的一种蛋白护眼液的制备工艺,其特征在于,步骤s2中tris-hcl缓冲液的ph为7。
8.根据权利要求7所述的一种蛋白护眼液的制备工艺,其特征在于,步骤s1中胶体溶液和戊二醛的体积比为1:(0.2-0.5)。
9.根据权利要求8所述的一种蛋白护眼液的制备工艺,其特征在于,步骤s4中紫云英苷纳米白蛋白和中间液的体积比为1:(2-3)。
10.一种蛋白护眼液,其由上述权利要求1-9任一项的蛋白护眼液的制备工艺制备得到。