本发明一般涉及医药组合物领域，具体地，涉及一种含高分子右旋糖酐的角膜保存液。
背景技术：
1、角膜盲是全球仅次于白内障和青光眼的第三大失明原因。目前，世界范围内有约有1000万双侧角膜盲患者，角膜移植术是使其重见光明最有效的手段。然而全球范围内的角膜供需比约为1∶70，且角膜内皮细胞是供体角膜保存过程中最易失活的细胞。因此，在保存过程中最大程度地维持内皮细胞活性，对维持手术后角膜植片的长期透明至关重要。角膜植片的透明度和移植成功的关键在于内皮细胞的活性和功能，而内皮细胞活性和功能在于角膜保存的效果。角膜保存方法根据保存时间的长短，分为短期保存，中期保存，中长期保存与长期保存。
2、中期保存是采用４ｃ低温保存液保存角膜组织片，这一方法提供了质量较高的角膜，使角膜移植手术在时间上更好安排，是比较理想的角膜保存方法。国内外对角膜保存液做了很多研究，以提高角膜组织质量和延长保存时间，目前常见的保存液有k-液，csm，dexsol和optisol等。上述保存液在保持角膜内皮细胞活性方面功能显著，但保存过的角膜植片在角膜移植术后内皮细胞仍旧可能发生超生理下降，甚至内皮失代偿。并且，国际上最常用的eusol-c和optisol价格昂贵，通常一瓶20ml的保存液用于保存1个角膜，价格几千块人民币不等，且未在国内注册，不适合我国国情。因此，根据我国角膜供体材料来源严重匮乏，又缺少足够数量的正规眼库的情况，研制理想的新型角膜中期保存液以解决我国角膜供体短缺及无序利用问题迫在眉睫。
技术实现思路
1、为解决现有技术的不足，本发明的第一方面提供了一种角膜中期保存液，以1000毫升计，所述中期保存液包括：
2、50-70克高分子右旋糖酐、10-20毫升1mm/ml丙酮酸钠溶液、10-20毫升1mm/ml非必需氨基酸培养基、300-400微升5.5mm/mlβ-巯基乙醇、1-2毫升0.2g/ml硫酸阿米卡星注射液、3-4毫升5mg/ml地塞米松磷酸钠，其余为最低必需培养基（mem培养基）；
3、优选的，最低必需培养基的改良方式为用l-丙氨酰谷氨酰胺替代l-谷氨酰胺，并添加hepes缓冲液。
4、优选的，角膜中期保存液还包括10-15g硫酸软骨素a纳盐。
5、优选的，中期保存液包括：
6、50克高分子右旋糖酐、10毫升1mm/ml丙酮酸钠溶液、10毫升1mm/ml非必需氨基酸培养基、300升5.5mm/mlβ-巯基乙醇、1毫升0.2g/ml硫酸阿米卡星注射液、4毫升5mg/ml地塞米松磷酸钠，其余为最低必需培养基（mem培养基）；或
7、70克高分子右旋糖酐、20毫升1mm/ml丙酮酸钠溶液、20毫升1mm/ml非必需氨基酸培养基、400微升5.5mm/mlβ-巯基乙醇、2毫升0.2g/ml硫酸阿米卡星注射液、3毫升5mg/ml地塞米松磷酸钠，其余为最低必需培养基（mem培养基）；或
8、50克高分子右旋糖酐、13克硫酸软骨素a纳盐、10毫升1mm/ml丙酮酸钠溶液、10毫升1mm/ml非必需氨基酸培养基、350微升5.5mm/mlβ-巯基乙醇、1毫升0.2g/ml硫酸阿米卡星注射液、4毫升5mg/ml地塞米松磷酸钠，其余为最低必需培养基。
9、优选的，高分子右旋糖酐的平均分子量为500kd，主要分子量为450kd-650kd。
10、优选的，最低必需培养基（mem培养基）包括如下成分（见表1）。
11、优选的，非必需氨基酸培养基包括如下成分（见表2）。
12、表1
13、
14、表2
15、
16、可选地，中期保存液的ph值为7.2～7.6，渗透压为280～345mosm/kg，在2～8℃保存。优选的，渗透压为310～335mosm/kg。
17、本发明的第二方面提供了上述角膜中期保存液在制备用于保存或培养角膜供体、角膜内皮片、角膜植片的医疗器械中的应用。
18、可选地，所述医疗器械为试剂盒。
19、本发明的有益效果：
20、同类产品普遍采用硫酸软骨素及低分子右旋糖酐的复配进行角膜脱水，硫酸软骨素有保护角膜上皮及内皮的作用，用其作为脱水剂脱水效果明显。但硫酸软骨素分子量小，极容易进入角膜基质中，在体外4℃保存条件下其可使角膜透明，但植入手术后，由于角膜中硫酸软骨素含量高，和房水及泪液中形成浓度差，造成术后早期角膜供体吸水水肿明显。另外硫酸软骨素为动物源性物质，价格高、稳定性相对较差，将低分子右旋糖酐与硫酸软骨素复配使用，一方面有助于增强对角膜上皮及内皮细胞的保护作用，改善保存液的稳定性，同时也有助于降低保存液的成本。但低分子右旋糖酐与硫酸软骨素的复配仍存在一些缺点，例如，采用低分子右旋糖酐无法保证保存液具有较高的胶体渗透压，溶液的脱水能力有限，不能更好地维持角膜供体的透明度。
21、本发明发现，在传统保存液（低分子右旋糖酐与硫酸软骨素的复配）的基础上，选用高分子右旋糖酐t500代替传统的低分子右旋糖酐t40，并通过调整高分子右旋糖酐在溶液中的浓度，能够有效提高溶液的胶体渗透压，增强溶液的脱水能力，更好地维持角膜供体的透明度。
22、本发明进一步发现，高分子右旋糖酐t500本身就具有良好的脱水效果及保护角膜上皮及内皮细胞的作用，当采用高分子右旋糖酐t500直接替代传统保存液所采用的低分子右旋糖酐与硫酸软骨素时，保存液具有良好的脱水效果且能够很好地维持角膜供体的透明度。
23、本发明更进一步发现，右旋糖酐、硫酸软骨素的用量和浓度对胶体渗透压有重要影响，在研发过程中经过不断调试脱水剂的组成、用量、浓度，在良好脱水效果与维持角膜离子渗透压中取得了平衡。
24、本发明对最低必需培养基（mem培养基）的组合也进行了有益改进，本发明选择改进的mem培养基，因为其带有l-丙氨酰谷氨酰胺添加剂，代替了l-谷氨酰胺为细胞提供营养，解决了l-谷氨酰胺长时间存放结构不稳定的问题，同时l-丙氨酰谷氨酰胺添加剂本身是一种二肽，具有一定的抗氧化功能，能更好的维护内皮细胞形态；另外本在mem培养基中加入了hepes缓冲液，让培养基同时含有碳酸氢钠和hepes两种缓冲体系，更好的维持角膜保存液的ph值及离子渗透压体系长效稳定。
25、采用发明提供的角膜中期保存液，在4℃条件下保存角膜供体材料，保存时间可达14天。
1.一种角膜中期保存液，以1000毫升计，包括：50-70克高分子右旋糖酐、10-20毫升1mm/ml丙酮酸钠溶液、10-20毫升1mm/ml非必需氨基酸培养基、300-400微升5.5mm/mlβ-巯基乙醇、1-2毫升0.2g/ml硫酸阿米卡星注射液、3-4毫升5mg/ml地塞米松磷酸钠，其余为最低必需培养基。
2.如权利要求1所述的角膜中期保存液，其特征在于，最低必需培养基的改良方式为用l-丙氨酰谷氨酰胺替代l-谷氨酰胺，并添加hepes缓冲液。
3.如权利要求1或2所述的角膜中期保存液，其特征在于，包括：还包括10-15g硫酸软骨素a纳盐。
4.如权利要求1或2所述的角膜中期保存液，其特征在于，包括：
5.如权利要求2所述的角膜中期保存液，其特征在于，最低必需培养基包括如下成分：406mg/ll-丙氨酰谷氨酰胺、126mg/ll-精氨酸盐酸盐、24mg/ll-胱氨酸、42mg/ll-组氨酸盐酸盐-h2o、52mg/ll-异亮氨酸、52mg/ll-亮氨酸、73mg/ll-赖氨酸盐酸盐、15mg/ll-蛋氨酸、32mg/ll-苯丙氨酸、48mg/ll-苏氨酸、10mg/ll-色氨酸、52mg/ll-酪氨酸二钠盐二水合物、46mg/ll-缬氨酸、1mg/l氯化胆碱、1mg/ld-泛酸钙、1mg/l叶酸、1mg/l烟酰胺、1mg/l盐酸吡哆醛、0.1mg/l核黄素、1mg/l盐酸硫胺素、2mg/l肌醇、200mg/lcacl2、97.67mg/lmgso4、400mg/lkcl、2200mg/lnahco3、6350mg/lnacl、140mg/lnah2po4-2h2o、1000mg/ld-葡萄糖、5958mg/lhepes和10mg/l酚红。
6.如权利要求1所述的角膜中期保存液，其特征在于，非必需氨基酸培养基包括如下成分：
7.如权利要求1或2所述的角膜中期保存液，其特征在于，角膜中期保存液的ph值为7.2-7.6，渗透压为280～345mosm/kg。
8.如权利要求7所述的角膜中期保存液，其特征在于，渗透压为310-335mosm/kg。
9.如权利要求1-8中任一所述的角膜中期保存液在制备用于保存或培养角膜供体、角膜内皮片、角膜植片的医疗器械中的应用。
10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，医疗器械为试剂盒。
