本发明属于微生物，尤其涉及一种吸水链霉菌发酵液制备方法及其应用。
背景技术：
1、落叶松属于松科落叶松属，性喜光、耐寒、适应性强、生长快、木材经济价值高，是人工营造速生丰产用材林的好树种。落叶松枯梢病菌neofusicoccum laricinum可以导致落叶松枯梢病。近年来，落叶松枯梢病为落叶松人工林的主要病害，1973年吉林省首次报道该病害的发生，由于当时未掌握该病的发病规律，又无有效的防治和检疫方法，致使该病迅速蔓延，目前该病已扩大至山东、河北、陕西和山西等地，发生面积有逐年增长的趋势，危害也日趋严重。落叶松枯梢病主要危害1-35年生落叶松人工林的当年新梢，6-15年生幼林发病较重且普遍；7月开始发病，8、9月份高峰期。一般先从主梢发病，由树冠上部枝梢向下逐渐蔓延。发病的新梢渐褪色，由黄绿色变为褐灰色顶部弯曲下垂呈勾状，逐渐向下脱叶、干枯、茎收缩变细，梢头顶端残留一簇叶子，且枯萎呈紫灰色。连年发病，多数枯梢成从，树冠成为扫帚状，被害严重树木生长停止，形成小老树或全株枯死。顶部枯萎的叶丛，发病15-20d后，叶背面密生小黑点，即病原菌的分生孢子器及少量的未成熟的子囊壳。
2、近年来国内关于落叶枯梢病发生为害的报道屡见不鲜，目前该病的防治采取以下几种措施：化学防治、选育抗病品种、培育无病壮苗、优化栽培场地和栽培方式等方法(付晓霞,王志明,王选遥等.落叶松落叶病和枯梢病合并防治研究[j].吉林林业科技,2016,45(02):30-34+40.doi:10.16115/j.cnki.i ssn.1005-7129.2016.02.010.)。众多防病手段中，化学防治和选育抗病品种最易被大众接受，但上述两种防治方法均存在明显弊端，一方面抗病品种的选育耗时较长且存在抗性退化等问题，达不到预期的防病效果；另一方面，大量的使用化学农药容易造成坏境污染和破坏生态平衡等问题。因此，研究以生态系统调控为主的可持续控制技术，利用对病原菌具有抑制作用的拮抗微生物防治该病，以菌治菌，达到绿色环保，高效综合防治目的。
3、放线菌是最早发现的具有生物防治作用的一类微生物，近些年来广泛应用于植物病害防治。链霉菌在放线菌中占据着重要地位，pandey等分离的放线菌对鹰嘴豆干根腐病有拮抗作用(nath r p,gandhi k b,manjunatha l,et al.in vitro evaluation ofactinobacteria for biocontrol of dry root rot and fusarium wilt diseases inchickpea(cicer arietnum l.)[j].journal of food legumes,2021,34(4):245-247.)，samac等研究发现，大多数产生抗生素的链霉菌菌株对苜蓿疫霉属3个不同菌株的生长有抑制作用(latorre b,torres r,et al.evaluation of theuse of wound protectantfungicides and biological control agents against stem canker of blueberry[j].cien inv agr,2013,40(3):537-545.)。东北农业大学在2020年研究发现，放线菌的活性次级代谢产物对番茄青枯病有抑制效果(凌玲.streptomyces sp.neau-hv9对番茄青枯病的防效及其活性代谢产物研究[d].东北农业大学,2021.doi:10.27010/d.cnki.gdbnu.2020.000800)；华侨大学2023年自蕉园土壤样品中分离的链霉菌foc tr4产生的单体化合物对香蕉枯萎病有强抑制作用(邹聂霞.链霉菌h3-2抗香蕉枯萎病活性成分鉴定及其抑菌机理研究[d].华侨大学,2022.doi:10.27155/d.cnki.ghqiu.2022.000789.)。
4、不同菌株的抑菌谱以及抑菌活性不同，在生物防治中需要选择合适的菌株以达到较好的防治效果。因此，提供合适的菌株对有效生物防治至关重要。
技术实现思路
1、鉴于现有技术所存在的问题，本发明提供一种吸水链霉菌发酵液制备方法及其应用。吸水链霉菌jn3-4是本发明首次发现，经过进一步验证发现，该菌株具有生防效果好、抑菌谱广、应用范围广等优点。
2、本发明解决上述技术问题的技术方案如下：
3、本发明提供一株吸水链霉菌，菌株名称为吸水链霉菌jn3-4(streptomyceshygroscopicusjn3-4)，保藏编号为cgmccno.27649，该菌株于2023年6月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc)，保藏地址为中国北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。
4、本发明从采自吉林省不同地区的土壤分离获得多株放线菌，经多重筛选，最终获得了1株能够有效抑制落叶枯梢病菌的拮抗菌株，标记为jn3-4，本发明实现了放线菌在落叶枯梢病领域的突破，为落叶松枯梢病的生物防治提供了新的菌株及产品。
5、本发明提供一种菌剂，包括上述吸水链霉菌和/或上述吸水链霉菌的发酵产物。
6、本发明对菌剂的剂型无特殊限制，例如，所述菌剂可以为液体制剂也可以为固体制剂，也可以其他类型的制剂。除了本发明提供的链霉菌或链霉菌的发酵产物外，也可以添加本领域常用的用于制备生防制剂的组分，以利于其应用。
7、本发明提供的吸水链霉菌及其菌剂具有生防效果好、抑菌谱广、应用范围广等优点。
8、本发明提供上述吸水链霉菌的发酵方法，包括以下步骤：将上述吸水链霉菌接种培养基发酵培养。
9、所述发酵培养基的配方可以包括：花生饼粉2.5％、淀粉5.0％、酵母粉0.08％、葡萄糖0.02％、(nh4)2so40.08％、caco30.32％、nacl 0.2％，ph 7.0-7.2。
10、发酵培养条件可以包括：28℃，培养6d。
11、本发明提供上述菌剂的制备方法，包括以下步骤：将上述吸水链霉菌接种发酵培养基发酵培养。
12、所述发酵培养基的配方可以包括：花生饼粉2.5％、淀粉5.0％、酵母粉0.08％、葡萄糖0.02％、(nh4)2so40.08％、caco30.32％、nacl 0.2％，ph 7.0-7.2。
13、发酵培养条件可以包括：28℃，培养6d。
14、本发明提供一种吸水链霉菌发酵液制备方法，包括以下步骤：将名称为吸水链霉菌jn3-4(streptomyces hygroscopicus jn3-4)的菌株接种发酵培养基，发酵培养，吸水链霉菌jn3-4的保藏编号为cgmcc no.27649。
15、进一步，在发酵培养后，进行离心，过滤，收集上清液。
16、所述发酵培养基的配方可以包括：花生饼粉2.5％、淀粉5.0％、酵母粉0.08％、葡萄糖0.02％、(nh4)2so40.08％、caco30.32％、nacl 0.2％，ph 7.0-7.2。
17、发酵培养条件可以包括：28℃，培养6d。可以采用振荡培养的方式进行发酵培养。
18、本发明提供上述吸水链霉菌在植物致病菌防治中的应用。本发明提供的菌株可以用于制备生防制剂，用于防治聚生小穴壳菌、红小豆炭疽病菌、红松立枯病菌、玉米大斑病菌、烟草靶斑病菌、水稻恶苗病菌、甜瓜蔓割病菌、辣椒炭疽病菌、梨波氏盘果腐病菌、黄瓜菌核病菌、蓝莓溃疡病菌、落叶松枯梢病菌中的一种或几种；用于防治上述致病菌导致的病症。
19、本发明提供上述菌剂在植物致病菌防治中的应用。所述植物致病菌选自聚生小穴壳菌、红小豆炭疽病菌、红松立枯病菌、玉米大斑病菌、烟草靶斑病菌、水稻恶苗病菌、甜瓜蔓割病菌、辣椒炭疽病菌、梨波氏盘果腐病菌、黄瓜菌核病菌、蓝莓溃疡病菌、落叶松枯梢病菌中的一种或几种。本发明提供的上述菌剂可以用于防治上述致病菌导致的病症。
20、本发明提供吸水链霉菌的发酵液在植物致病菌防治中的应用，所述植物致病菌选自聚生小穴壳菌、红小豆炭疽病菌、红松立枯病菌、玉米大斑病菌、烟草靶斑病菌、水稻恶苗病菌、甜瓜蔓割病菌、辣椒炭疽病菌、梨波氏盘果腐病菌、黄瓜菌核病菌、蓝莓溃疡病菌、落叶松枯梢病菌中的一种或几种，吸水链霉菌的发酵液采用上述制备方法制备。
21、本发明提供吸水链霉菌的发酵液在防治植物致病菌导致的症状中的应用，所述植物致病菌选自聚生小穴壳菌、红小豆炭疽病菌、红松立枯病菌、玉米大斑病菌、烟草靶斑病菌、水稻恶苗病菌、甜瓜蔓割病菌、辣椒炭疽病菌、梨波氏盘果腐病菌、黄瓜菌核病菌、蓝莓溃疡病菌、落叶松枯梢病菌中的一种或几种，吸水链霉菌的发酵液采用上述制备方法制备。
22、本发明提供吸水链霉菌的发酵液在制备生防制剂中的应用，生防制剂用于防治植物致病菌导致的疾病；所述植物致病菌选自聚生小穴壳菌、红小豆炭疽病菌、红松立枯病菌、玉米大斑病菌、烟草靶斑病菌、水稻恶苗病菌、甜瓜蔓割病菌、辣椒炭疽病菌、梨波氏盘果腐病菌、黄瓜菌核病菌、蓝莓溃疡病菌、落叶松枯梢病菌中的一种或几种，吸水链霉菌的发酵液采用上述制备方法制备。
23、本发明提供吸水链霉菌的发酵液在防治落叶松枯梢病中的应用，吸水链霉菌的发酵液采用上述制备方法制备。
24、本发明在应用时具有防治效果好、抑菌谱广、应用范围广等优点。
25、本发明提供一种生物防治方法，包括以下步骤：采用上述链霉菌和/或上述菌剂进行生物防治。也可以采用上述上清液进行生物防治。
26、本发明提供的方法具有防治效果好、抑菌谱广、应用范围广等优点。
1.一种吸水链霉菌发酵液制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将名称为吸水链霉菌jn3-4(streptomyces hygroscopicus jn3-4)的菌株接种发酵培养基，发酵培养，吸水链霉菌jn3-4的保藏编号为cgmcc no.27649。
2.根据权利要求1所述吸水链霉菌发酵液制备方法，其特征在于，在发酵培养后，进行离心，过滤，收集上清液。
3.根据权利要求1或2所述吸水链霉菌发酵液制备方法，其特征在于，所述发酵培养基的配方包括：花生饼粉2.5％、淀粉5.0％、酵母粉0.08％、葡萄糖0.02％、(nh4)2so40.08％、caco30.32％、nacl 0.2％，ph 7.0-7.2。
4.根据权利要求1或2所述吸水链霉菌发酵液制备方法，其特征在于，发酵培养时间为6d。
5.根据权利要求1或2所述吸水链霉菌发酵液制备方法，其特征在于，发酵培养温度为28℃。
6.根据权利要求1或2所述吸水链霉菌发酵液制备方法，其特征在于，采用振荡培养的方式进行发酵培养。
7.吸水链霉菌的发酵液在植物致病菌防治中的应用，其特征在于，所述植物致病菌选自聚生小穴壳菌、红小豆炭疽病菌、红松立枯病菌、玉米大斑病菌、烟草靶斑病菌、水稻恶苗病菌、甜瓜蔓割病菌、辣椒炭疽病菌、梨波氏盘果腐病菌、黄瓜菌核病菌、蓝莓溃疡病菌、落叶松枯梢病菌中的一种或几种，吸水链霉菌的发酵液采用权利要求1-6任一项所述制备方法制备。
8.吸水链霉菌的发酵液在防治植物致病菌导致的症状中的应用，其特征在于，所述植物致病菌选自聚生小穴壳菌、红小豆炭疽病菌、红松立枯病菌、玉米大斑病菌、烟草靶斑病菌、水稻恶苗病菌、甜瓜蔓割病菌、辣椒炭疽病菌、梨波氏盘果腐病菌、黄瓜菌核病菌、蓝莓溃疡病菌、落叶松枯梢病菌中的一种或几种，吸水链霉菌的发酵液采用权利要求1-6任一项所述制备方法制备。
9.吸水链霉菌的发酵液在制备生防制剂中的应用，其特征在于，生防制剂用于防治植物致病菌导致的疾病；所述植物致病菌选自聚生小穴壳菌、红小豆炭疽病菌、红松立枯病菌、玉米大斑病菌、烟草靶斑病菌、水稻恶苗病菌、甜瓜蔓割病菌、辣椒炭疽病菌、梨波氏盘果腐病菌、黄瓜菌核病菌、蓝莓溃疡病菌、落叶松枯梢病菌中的一种或几种，吸水链霉菌的发酵液采用权利要求1-6任一项所述制备方法制备。
10.吸水链霉菌的发酵液在防治落叶松枯梢病中的应用，其特征在于，吸水链霉菌的发酵液采用权利要求1-6任一项所述制备方法制备。
