本发明涉及异噻唑啉酮类化合物检测，尤其涉及一种涡旋辅助进样测定烟用水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂的方法。
背景技术：
1、水基胶是以水分散型溶剂为介质，常温下是呈中性(或者弱酸性)的黏性混合乳液，其安全性备受关注。异噻唑啉酮类化合物作为广谱高效杀菌剂，目前广泛添加到烟用水基胶起到杀菌防腐的作用。但异噻唑啉酮类化合物存在可能导致皮肤致敏反应、皮肤灼伤或哮喘的安全隐患。因此，水基胶中异噻唑啉酮类化合物含量的监控是烟草行业非常关注的安全性问题。
2、目前烟用材料涉及的异噻唑啉酮类化合物主要为2-甲基-3(2h)-异噻唑啉酮(mi)、5-氯-2-甲基-2h-异噻唑-3-酮(cmi)、1,2-苯并异噻唑基-3(2h)-酮(bit)，在烟草行业和其他行业已经有很多方法用于这类异噻唑啉酮杀菌剂的测定，包括液相色谱、气相色谱、液质联用法、气质联用法。这些方法包括烟草行业标准yq/t 86-2018《烟用水基胶、接装纸、内衬纸、滤棒成型纸和卷烟纸中异噻唑啉酮类杀菌剂的测定高效液相色谱-串联质谱法》对水基胶的前处理都需要在溶剂萃取后，在上机前进行离心除去沉淀物，再用针式滤膜过滤后进行色谱或色谱质谱分析，有些方法甚至还需用固相萃取富集或净化。这些方法前处理步骤繁琐，不利于快速批量高通量检测。另外，yq/t 86-2018采用的串联质谱法所需仪器昂贵，制约了该检测方法在水基胶生产企业的应用。
3、因此，亟需一种涡旋辅助进样测定烟用水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂的方法。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供一种涡旋辅助进样测定烟用水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂的方法，以解决上述现有技术中的问题，能够有效克服用现有方法前处理复杂、有机试剂消耗大的缺陷，为烟用水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂的监控提供一种快速、准确、有效的方法。
2、本发明提供了一种涡旋辅助进样测定烟用水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂的方法，包括以下步骤：
3、溶液配制：分别配置2-甲基-3(2h)-异噻唑啉酮、5-氯-2-甲基-2h-异噻唑-3-酮、1,2-苯并异噻唑基-3(2h)-酮的单一标准储备液和混合标准储备液；
4、样品前处理：利用直接萃取进样瓶，将烟用水基胶样品采用涡旋辅助直接进样法进行前处理；
5、液相色谱分析：烟用水基胶样品前处理后直接上机测样；
6、定性定量分析：利用混合标准储备溶液稀释成不同浓度的混合标准工作溶液后进样分析，建立峰面积和浓度的线性回归方程；烟用水基胶样品上机测样，根据线性回归方程直接测定浓度后，计算烟用水基胶样品中异噻唑啉酮杀菌剂的质量分数。
7、如上所述的涡旋辅助进样测定烟用水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂的方法，其中，优选的是，所述溶液配置，具体包括：
8、单一标准储备液：分别准确称取10mg的2-甲基-3(2h)-异噻唑啉酮、5-氯-2-甲基-2h-异噻唑-3-酮、1,2-苯并异噻唑基-3(2h)-酮，精确至0.1mg，分别用甲醇溶解并定容于10ml容量瓶中，配制成浓度均为1000μg/ml的单一标准储备溶液；
9、混合标准储备液：分别移取0.5ml的2-甲基-3(2h)-异噻唑啉酮、5-氯-2-甲基-2h-异噻唑-3-酮、1,2-苯并异噻唑基-3(2h)-酮的单一标准储备液于100ml容量瓶中，用甲醇定容，配制成浓度为5μg/ml的混合标准储备液。
10、如上所述的涡旋辅助进样测定烟用水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂的方法，其中，优选的是，所述样品前处理，具体包括：
11、称取烟用水基胶样品0.01g于直接萃取进样瓶外管中，加入150μl水分散，再加入450μl甲醇，将带有过滤筛板的内管固定在外管的管口，涡旋10秒接着350w超声萃取30min后压下内管，提取液通过筛板进行过滤后进入内管，直接上机测样。
12、如上所述的涡旋辅助进样测定烟用水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂的方法，其中，优选的是，在所述液相色谱分析中，液相色谱条件为：色谱柱的型号为acclaim explosive e2柱，色谱柱的尺寸为250mm×4.6mm×5μm；进样量为10μl，柱温为30℃，流速为0.9ml/min，流动相为水/甲醇，紫外检测器，2-甲基-3(2h)-异噻唑啉酮和5-氯-2-甲基-2h-异噻唑-3-酮的检测波长为275nm，1,2-苯并异噻唑基-3(2h)-酮的检测波长为318nm；梯度洗脱参数为0min/10％甲醇→15min～18min/90％甲醇→22～25min/10％甲醇。
13、如上所述的涡旋辅助进样测定烟用水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂的方法，其中，优选的是，在所述定性定量分析步骤中，所述利用混合标准储备溶液稀释成不同浓度的混合标准工作溶液后进样分析，建立峰面积和浓度的线性回归方程，具体包括：
14、移取混合标准储备溶液，用甲醇稀释成三种异噻唑啉酮分别为不同浓度的混合标准工作溶液后进样分析，建立峰面积和浓度的线性回归方程。
15、如上所述的涡旋辅助进样测定烟用水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂的方法，其中，优选的是，所述移取混合标准储备溶液，用甲醇稀释成三种异噻唑啉酮分别为不同浓度的混合标准工作溶液后进样分析，建立峰面积和浓度的线性回归方程，具体包括：
16、移取混合标准储备溶液适量，用甲醇稀释成三种异噻唑啉酮浓度分别为0.05μg/ml、0.1μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml、1μg/ml、2.5μg/ml的混合标准工作溶液后进样分析，建立峰面积和浓度的线性回归方程。
17、本发明的涡旋辅助进样测定烟用水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂的方法，基于商品化的直接进样瓶，与高效液相色谱法联用，建立了涡旋辅助直接进样测定烟用水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂的方法，大大简化了样品前处理过程，样品检测效率得到提高；整个前处理和进样过程都在直接萃取进样瓶中进行，避免了离心、过滤和转移溶液，整个前处理步骤得到简化，消耗的有机试剂也大大减少，为烟用水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂的监控提供一种快速、准确、有效的方法；能够测定烟用水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂中2-甲基-3(2h)-异噻唑啉酮、5-氯-2-甲基-2h-异噻唑-3-酮、1,2-苯并异噻唑基-3(2h)-酮的含量；与现行烟草行业标准yq/t 86-2018相比，本发明不仅前处理简单；而且选用高效液相色谱法，相比行业标准选择的仪器费用不菲的串联质谱仪，更加具有经济适用性、可推广性；本发明的测定方法简单、快速、准确、环境友好，可作为一种快速准确测定水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂的方法推广，在卷烟生产企业和胶粘剂厂家的水基胶品质控制有一定应用价值。
1.一种涡旋辅助进样测定烟用水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂的方法，其特征在于，包括：
2.根据权利要求1所述的涡旋辅助进样测定烟用水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂的方法，其特征在于，所述溶液配置，具体包括：
3.根据权利要求2所述的涡旋辅助进样测定烟用水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂的方法，其特征在于，所述样品前处理，具体包括：
4.根据权利要求2所述的涡旋辅助进样测定烟用水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂的方法，其特征在于，在所述液相色谱分析中，液相色谱条件为：色谱柱的型号为acclaimexplosive e2柱，色谱柱的尺寸为250 mm×4.6 mm×5 μm；进样量为10 μl，柱温为30 ℃，流速为0.9ml/min，流动相为水/甲醇，紫外检测器，2-甲基-3(2h)-异噻唑啉酮和5-氯-2-甲基-2h-异噻唑-3-酮的检测波长为275 nm，1,2-苯并异噻唑基-3(2h)-酮的检测波长为318nm；梯度洗脱参数为0 min/10%甲醇→15 min~18 min/90%甲醇→22~25 min/10%甲醇。
5.根据权利要求1所述的涡旋辅助进样测定烟用水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂的方法，其特征在于，在所述定性定量分析步骤中，所述利用混合标准储备溶液稀释成不同浓度的混合标准工作溶液后进样分析，建立峰面积和浓度的线性回归方程，具体包括：
6.根据权利要求5所述的涡旋辅助进样测定烟用水基胶中异噻唑啉酮杀菌剂的方法，其特征在于，所述移取混合标准储备溶液，用甲醇稀释成三种异噻唑啉酮分别为不同浓度的混合标准工作溶液后进样分析，建立峰面积和浓度的线性回归方程，具体包括：
