本发明属于植物油发酵，具体地说，涉及一种球拟假丝酵母及其在制备酵制红山茶籽油中的应用。
背景技术：
1、山茶籽油是从山茶科植物油茶籽中经压榨或浸出法制取的一种高级天然木本食用油脂。山茶油中富含多种活性成分，作为世界四大木本食用油脂之一，其不饱和脂肪酸含量高达80％以上，被联合国粮农组织推荐为健康食品。除了在相关食品中的应用，山茶籽油还作为化妆品原料被广泛应用在化妆品相关产品中。由于其除了具有甘油三酯、甘油二酯等成分，还含有茶皂素，角鲨烯，生育酚等这些活性成分，因此使其具有抗氧化、修护、舒缓、抗老等功效。但因其主要的成分为甘油三酯，会使其肤感较为油腻一些，因此为了使其具有更加清爽的肤感，利用嗜油菌的发酵将甘油三酯酶解为甘油二酯、游离脂肪酸等分子量较小的物质，且嗜油菌本身也会产生次级代谢产物，会更加增强山茶籽油的功效，除此之外，由于甘油二酯以及一些表面活性物质的产生，发酵后会降低山茶籽油的表面张力，从而增强其本身的自乳化性，增强其在相关产品中的稳定性。
2、cn 117737137a中公开了一种发酵植物油及其制备方法和应用，所述植物油包括稻米油、牡丹籽油、美藤果油和青刺果油，能够提高植物油的乳化能力和亲水保湿能力。但其需对植物油发酵72-120h，发酵时间较长，会导致植物油中的主成分甘油三酯分解较多，最终导致发酵植物油得率较低。
3、cn116286414a中提供一种发酵植物油的制备方法，使用休哈塔假丝酵母(cgmcc2.4317)或解脂亚罗酵母(cgmcc 2.1291)对植物油(所述植物油为紫苏籽油、红花籽油、山茶油、牡丹籽油中的一种或它们任意比混合物)进行发酵。所得发酵植物油具有较好的抗炎和抗氧化作用。但其所使用的菌种为常规购买菌种，并不是筛选出的天然来源菌种，且发酵时间过长会导致较低的发酵油得率，性价比较低；除此之外，发酵植物油中酸值较高，稳定性会降低。
4、cn106619231a中公开了一种发酵植物油的制备方法，使用酵母或乳酸菌对植物油脂(油橄榄果油、蓖麻油、可可油、芝麻油或玉米胚芽油中的一种或多种)进行发酵，通过控制发酵过程的发酵时间和温度等主要工艺参数将植物油中的大分子基团分解为小分子，促进了植物油脂在化妆品中的吸收，明显改善肤感。但其并未明确所使用的具体菌种，且在操作过程中需多次打开广口瓶，导致操作较为复杂，此工艺不便放大生产，且发酵时间较长，会导致发酵植物油得率较低，经济成本较高。
5、cn117701642a中公开了一种天然植物发酵油的制备及在化妆品中的应用。使用糯米粉、大豆油及无菌水传代培养的酒曲对乳化过的植物油和发酵培养基进行发酵，灭菌，除水，过滤制得发酵植物油。制备的天然植物发酵油采用自然发酵酒曲中的酵母菌，含有更强油脂分解能力的脂肪酶，能将油脂中的大分子基团最大程度地分解为小分子基团。并且具有抗氧化、抗皱、保湿等多种功效。但其需要先用到微射流均质机制备乳状液，步骤较为复杂，不易操作。且如果将油脂中的大分子基团最大程度分解为小分子基团，意味着植物油中的甘油三酯会被最大程度地分解，会分解出大量的游离脂肪酸及甘油，除水过滤后得到较少的油相，得率较低，且过多的游离脂肪酸会影响发酵植物油的稳定性。
6、因此，目前有关发酵植物油的在先专利均未考虑是否可以在植物油中获取有效菌种对植物油进行发酵，且未考虑发酵油的得率与发酵时间的关系，无法获得性价比较高的发酵植物油，且有些工艺较为复杂，发酵时间长且发酵仪器操作不方便。基于此，本技术在山茶老油中筛选出合适的菌种对红山茶籽油进行发酵，工艺操作简单，并优选出合适的红山茶籽油发酵时间且具有较佳的发酵得率，且功效较优。并利用hplc-dad法分析出山茶籽油发酵前后的具体物质变化。
技术实现思路
1、现有技术中的大部分菌种并不是嗜油菌，在发酵过程中不能利用油脂产生新的代谢产物。考虑到大家有使用山茶老油修护皮肤的习惯，申请人构思是否可以在存放较久的山茶老油中筛选出一株可以利用红山茶籽油发酵的菌种。
2、筛选出合适菌种后，将此菌种用于红山茶籽油的发酵，优化发酵工艺；之后选取合适的检测方法(hplc-dad法)对发酵前后的红山茶籽油的甘油酯组成及一些物化指标进行了对比分析，更加明确了发酵前后红山茶籽油的变化。且进一步对比了红山茶籽油发酵前后的功效。经过发酵，后处理工艺后，得到了一款安全的可用于化妆品的酵制红山茶籽油。
3、本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：
4、<第一方面>
5、本发明提供了一种山茶老油来源的球拟假丝酵母修抗pro-lqx001，其拉丁文名称为starmerella bombicola，保藏编号为cgmcc no.29573；所述球拟假丝酵母于2024年1月11日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心。
6、<第二方面>
7、本发明提供了一种发酵红山茶籽油的方法，包括如下步骤：
8、s1、种子液培养：将球拟假丝酵母修抗pro-lqx001接种至ym液体培养基中振荡培养，获得种子液，所述球拟假丝酵母拉丁文名称为starmerella bombicola，保藏编号为cgmcc no.29573。
9、s2、发酵：将步骤s1的种子液接种至含有红山茶籽油的液体发酵培养基中进振荡培养；静置分离出水相和油相，取上层油相进行脱酸及脱味，得到酵制红山茶籽油。
10、作为本发明的一个实施方案，步骤s1的种子液培养具体包括如下步骤：
11、(1)一级菌液活化：在无菌环境下将球拟假丝酵母修抗pro-lqx001的母种接入ym液体培养基，25-30℃、120-180r/min恒温振荡培养1-2天，获得一级菌液；将菌种进行活化，使得菌种具有较好的活力，便于后续对红山茶籽油进行发酵。
12、(2)二级菌液培养：按5-10％(v/v)接种量将一级菌液接入ym液体培养基中，于25-30℃、120-180r/min恒温振荡培养1-2天，获得种子液。
13、作为本发明的一个实施方案，步骤s2中含有红山茶籽油的液体发酵培养基的配方包括：红山茶籽油30-40g/l，大豆蛋白胨3-5g/l，麦芽浸粉2-4g/l，葡萄糖10-20g/l，酵母浸粉2-4g/l。
14、作为本发明的一个实施方案，步骤s2中含有红山茶籽油的液体发酵培养基的配方包括：红山茶籽油30-40g/l，葡萄糖10-30g/l，酵母浸粉1-4g/l，磷酸二氢钾1-3g/l，磷酸氢二钾1-3g/l，硫酸镁1-2g/l。优化了液体发酵培养基的配方，使得球拟假丝酵母发酵山茶籽油得到更好的效果。
15、作为本发明的一个实施方案，步骤s2中采用碱炼法对上层油相进行脱酸处理，采用活性炭吸附法法对上层油相进行脱味处理。
16、碱炼法是用碱中和油脂中的游离脂肪酸，从油中去除杂质的方法。具体操作步骤包括将油加热至60℃左右，加入碱溶液，搅拌30min-1h后静置。
17、作为本发明的一个实施方案，步骤s2中含有红山茶籽油的液体发酵培养基经过灭菌处理，灭菌条件为：121℃灭菌20-30min。
18、作为本发明的一个实施方案，步骤s2中发酵的步骤具体包括：按5％-10％(v/v)接种量将s1中的种子液接入含有红山茶籽油的液体发酵培养基中，于25-28℃以150-200r/min的转速恒温振荡培养15h以上。
19、优选地，步骤s2中接种后恒温振荡培养的时间为15-36h。
20、优选地，步骤s2中种子液的接种量为5％(v/v)，恒温振荡培养的条件为28℃，150r/min。
21、得率大小代表红山茶籽油被酵解的程度，若得率越低，代表红山茶籽油发酵程度越大，活性成分会越多。将发酵时间优选为15-36h，得率优选为65％-80％。
22、<第三方面>
23、本发明提供一种酵制红山茶籽油，采用上述方法制备获得。
24、作为本发明的一个实施方案，所述酵制红山茶籽油中，包含百分比含量为75-93％的甘油三酯，以及百分比含量为8-20％的甘油二酯(将酵制红山茶籽油用正己烷溶解稀释，采用高效液相色谱仪正相体系进行分离，dad作为检测器，对酵制红山茶籽油中的成分通过面积归一法进行相对含量测试，得到各成分的峰面积百分比，作为其百分比含量)。
25、<第四方面>
26、本发明提供一种上述酵制红山茶籽油在制备抗皱修护的护肤品或化妆品中的应用。
27、作为本发明的一个实施方案，所述护肤品或化妆品的剂型包括膏霜类、乳液类、油剂类、水剂类、凝胶类、粉剂类中的至少一种。
28、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
29、1)本发明的关键之处在于，从山茶老油中筛选出了一株嗜油的球拟假丝酵母starmerella bombicola，能够将红山茶籽油中的大分子甘油三酯水解为甘油二酯和游离脂肪酸等分子量较小的物质，对于红山茶籽油具有较好的发酵效果。
30、2)本发明考虑了发酵红山茶籽油的得率，在保持酵制红山茶籽油较高得率的基础上完成对红山茶籽油的发酵并实现了较好的发酵效果；且与未发酵红山茶籽油对比，酵制红山茶籽油的表面张力降低，使其拥有更好的自乳化能力；与此同时，酵制红山茶籽油在抗皱和修护方面具有更优的功效。
1.一种山茶老油来源的球拟假丝酵母修抗pro-lqx001，其拉丁文名称为starmerellabombicola，保藏编号为cgmcc no.29573。
2.一种发酵红山茶籽油的方法，其特征在于，包括如下步骤：
3.根据权利要求2所述的发酵红山茶籽油的方法，其特征在于，所述含有红山茶籽油的液体发酵培养基的配方包括：红山茶籽油30-40g/l，葡萄糖10-30g/l，酵母浸粉1-4g/l，磷酸二氢钾1-3g/l，磷酸氢二钾1-3g/l，硫酸镁1-2g/l。
4.根据权利要求2所述的发酵红山茶籽油的方法，其特征在于，步骤s1的种子液培养具体包括如下步骤：
5.根据权利要求2所述的发酵红山茶籽油的方法，其特征在于，步骤s2中发酵的步骤具体包括：按v/v 5-10％接种量将s1中的种子液接入到含有红山茶籽油的液体发酵培养基中，25-28℃，150-200r/min的转速恒温振荡培养15h-36h。
6.根据权利要求2所述的发酵红山茶籽油的方法，其特征在于，步骤s2中采用碱炼法对上层油相进行脱酸处理，采用活性炭吸附法对上层油相进行脱味处理。
7.一种酵制红山茶籽油，其特征在于，由权利要求2-6中任一项所述的发酵红山茶籽油的方法发酵获得。
8.根据权利要求7所述的酵制红山茶籽油，其特征在于，包含百分比含量为75-93％的甘油三酯，以及百分比含量为8-20％的甘油二酯。
9.如权利要求7或8所述的酵制红山茶籽油在制备抗皱修护的护肤品或化妆品中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述护肤品或化妆品的剂型包括膏霜类、乳液类、油剂类、水剂类、凝胶类、粉剂类中的至少一种。
