本发明涉及一种l-肌肽的制备方法，属于医药。
背景技术：
1、l-肌肽（l-carnosine）是由β-丙氨酸和l-组氨酸经脱水缩合后，通过肽键连接形成的二肽类化合物，其化学名称为：β-丙氨酰-l-组氨酸。后续研究表明，l-肌肽广泛存在于哺乳动物大脑、肌肉组织和神经系统中，具有抗氧化、延缓衰老、提高记忆能力、促进伤口愈合、还原体内自由基、清除血液中螯合过渡金属、预防溃疡、抗肿瘤等功效，具备非常广泛的应用前景。
2、现有的l-肌肽制备方法，主要分为化学合成和生物技术合成：
3、1）化学合成的优点是：通过既定路线合成目标产物，过程中生成的杂质的种类和含量相对稳定，通过调整反应条件，精制方法，可以稳定控制杂质水平，得到符合医药质量标准的产品；化学合成的缺点为：目前主要的化学合成方法采用β-丙氨酸和l-组氨酸为起始原料，而氨基酸类化合物为既含有氨基，又含有羧基的两性化合物，反应位点较多，因此在制备l-肌肽的过程中需要引入保护基，选择性保护反应位点，合成目标产物。由于保护基本身不进入产品l-肌肽的化学结构，因此保护基的使用、引入保护基所使用的试剂、脱去保护基所使用的试剂，均增加了制备l-肌肽的原材料成本。
4、2）生物技术合成的优点是：通过微生物发酵或生物酶法，在一定条件下，直接由β-丙氨酸和l-组氨酸，合成目标产物l-肌肽，再经过分离、精制，得到纯品，节约了化学合成中使用保护基产生的相关成本；生物技术合成的缺点为：微生物发酵生产的过程中，产生的杂质种类、杂质含量及产率不稳定；生物酶法可以得到杂质水平稳定的产物，但不同的底物、反应条件，所需的酶也不同，价格昂贵，成本较高，仅适用于科学研究，导致产品的质量控制存在一定风险。
5、日本德山株式会社在中国的专利申请cn111051289a中，公开了一种l-肌肽的合成方法，采用β-丙氨酸和l-组氨酸为主要原料，并分别采用保护基团保护：对β-丙氨酸的氨基进行保护（保护基：苄氧羰基、9-芴甲氧羰基、三氟乙酰基、叔丁氧羰基、2 ,2 ,2-三氯乙氧羰基或甲酰基），再制成相应酸酐得到化合物（1）；l-组氨酸的羧基、咪唑上的氮、氨基通过保护，制得化合物（2）；化合物（1）和化合物（2）制备化合物（3），再通过脱去保护基，得到目标产物l-肌肽，具体工艺路线如下。
6、；
7、；
8、。
9、r2为：；r3为苄氧羰基、9-芴甲氧羰基、三氟乙酰基、叔丁氧羰基、2,2,2-三氯乙氧羰基或甲酰基。式(1b)中，m为0或1的整数，r4、r5及r6分别为氢原子或碳数1~6的烷基，其中，m为0时r4、r5及r6中的至少2个基团为碳数1~6的烷基。r7、r8分别独立选自氢原子或三烷基甲硅烷基；r9为氢原子或羧基的保护基。
10、该方法描述采用的保护基（r3、r7、r8、r9）以及构成化合物（1）结构中的r2基团，均不构成目标产物的骨架结构，需要经历引入保护基，和脱去保护基的过程，造成辅料、人工上的浪费。该专利申请中描述的制备化合物（1）的方法为：采用酰氯和羧酸，或者三光气和羧酸。三光气虽然性质相对稳定，但若在生产过程中应用，容易到反应不完全，会生成包括光气（剧毒品）在内的副产物，对生产设备、操作水平和废弃物处理有较高要求。采用该方法得到目标产物l-肌肽的总收率在80%以下（以n-苄氧羰基-β-丙氨酸为原料计），该收率相对较低。
11、中国专利申请cn112480206a中，公开了一种l-肌肽的合成方法，采用β-丙氨酸和l-组氨酸为主要原料，先对β-丙氨酸的氨基和羧基进行保护：对β-丙氨酸的羧基进行保护，得到丙氨酸甲酯，再对氨基进行保护（保护试剂：boc酸酐、氯甲酸苄酯），得到相应的氨基保护基丙氨酸甲酯（1），该化合物与l-组氨酸进行缩合，得到相应的基保护基l-肌肽，经脱保护得到目标产物l-肌肽。该方法同样需要引入、脱去保护基，造成辅料、人工的浪费，所述保护基叔丁氧羰基（boc），采用盐酸脱保护，通常反应不完全，而采用三氟乙酸，具有强刺激性、强腐蚀性，会腐蚀一般搪玻璃釜表面二氧化硅和微量元素金属合成复合材料，因此需要采用更耐腐蚀的设备，造价更高，不利于工业化生产。根据实施例，计算出得到l-肌肽粗品的总收率为82.0%，收率也相对较低。
技术实现思路
1、本发明针对现有技术存在的不足，提供一种l-肌肽的制备方法，所述制备方法制得的l-肌肽产品收率高、纯度高、单杂含量低，更适合工业化生产。
2、本发明解决上述技术问题的技术方案如下：一种l-肌肽的制备方法，所述制备方法为：
3、s1、化合物i与碱反应后，再和化合物ii进行反应，制得化合物iii；
4、所述化合物i为，所述化合物ii为，所述化合物iii为；
5、s2、化合物iii溶于有机溶剂中，加入脱水试剂，脱水制备化合物iv；
6、所述化合物iv为；
7、s3、化合物iv溶于有机溶剂中，加入三甲基碘化亚砜和盐酸进行反应得到化合物v，再向体系中加入醋酸甲脒，反应得到化合物vi；
8、所述化合物v为，x为i或cl；所述化合物vi为；
9、s4、化合物vi溶于水中，加入还原催化剂，经氢化还原，得到目标产物l-肌肽。
10、进一步的，步骤s1的具体操作为：将化合物i和碱溶于有机溶剂中，搅拌均匀后，得到反应液a；将化合物ii溶于有机溶剂中，得到反应液b；将反应液b缓慢滴加至反应液a中，制得化合物iii。
11、进一步的，步骤s1中，所述有机溶剂为乙腈、四氢呋喃中的任意一种；
12、步骤s1中，所述碱为三乙胺、n,n-二异丙基乙胺中的任意一种。
13、进一步的，步骤s1中，所述反应液b加至反应液a中进行反应的反应温度为10-20℃。
14、进一步的，步骤s2中，所述有机溶剂为二氯甲烷或四氢呋喃；
15、步骤s2中，所述脱水试剂为草酰氯、三氯化磷中的至少一种。
16、进一步的，步骤s2的具体操作为：控制温度为0-10℃，向化合物iii的有机溶剂中滴加脱水试剂，滴加完毕后，再升温至20-30℃进行反应。
17、步骤s3中，将三甲基碘化亚砜、碳酸钾溶于有机溶剂中，得到反应液c；将化合物iv溶于有机溶剂中，得到反应液d。将反应液c滴加至反应液d中，滴加盐酸，制得化合物v，加入醋酸甲脒，反应制得化合物vi。
18、进一步的，步骤s3中，所述有机溶剂为n,n-二甲基甲酰胺；
19、步骤s3中，制备化合物v时控制反应温度为0-10℃；加入醋酸甲脒制备化合物vi时控制反应温度为70-80℃。
20、进一步的，步骤s3中，所述三甲基碘化亚砜与化合物iv的摩尔比为（1.0-1.2）：1；所述的醋酸甲脒与化合物iv的摩尔比为（1.0-1.3）：1。
21、进一步的，步骤s3中，所述还原催化剂为钯碳和三氟化硼四氢呋喃的混合物，其中化合物vi与还原催化剂中钯元素和硼元素的摩尔比为1：（0.0005-0.0020）：（0.0001-0.0003），还原催化剂中钯元素和硼元素的摩尔比为（5-8）：1。
22、步骤s4中，氢化还原的反应温度条件为60-70℃，压力条件为0.5-2.0mpa。
23、本发明的有益效果是：
24、1）通过化学合成l-肌肽，可以实现对每个步骤杂质进行有效控制，得到的产品l-肌肽中，最大单个杂质含量≤0.03%，杂质含量总和≤0.2%，满足医药技术领域中对原料药的高纯度需求。
25、2）该合成方法有较高的收率，总收率＞93%，适合工业化生产。
26、3）本发明所述制备方法中，由于不使用保护基，避免引入、脱去保护基产生的相应杂质：邻苯二甲酰亚胺衍生物类杂质、肼、叔丁氧羰基衍生物类杂质、苄基衍生物类杂质、芴甲氧羰衍生物类杂质、三甲基硅烷类杂质等。
27、4）本发明所述制备方法使用的物料廉价易得：起始原料、试剂、溶剂均为市售大宗产品，货源广泛，供应充足，未使用管制类试剂（如易爆、剧毒试剂），污染小，对环境友好。①采用l-天冬氨酸作为原料，市售大宗货物价格远低于l-组氨酸；②不使用氨基保护基（邻苯二甲酸酐、boc酸酐、氯甲酸苄酯、卤化苄、芴甲氧羰酰氯等），节约引入保护基、脱去保护基产生的相应辅料及人工成本；③反应条件温和，时间短，对生产设备无特殊要求，适合工业化生产。
28、5）本发明所述制备方法得到的产品元素杂质、溶剂残留符合ich指导原则。稳定性实验结果表明产品稳定性良好。
1.一种l-肌肽的制备方法，其特征在于，所述制备方法为：
2.根据权利要求1所述一种l-肌肽的制备方法，其特征在于，步骤s1的具体操作为：将化合物i和碱溶于有机溶剂中，搅拌均匀后，得到反应液a；将化合物ii溶于有机溶剂中，得到反应液b；将反应液b缓慢滴加至反应液a中，制得化合物iii。
3.根据权利要求2所述一种l-肌肽的制备方法，其特征在于，步骤s1中，所述有机溶剂为乙腈、四氢呋喃中的任意一种；
4.根据权利要求2所述一种l-肌肽的制备方法，其特征在于，步骤s1中，所述反应液b加至反应液a中进行反应的反应温度为10-20℃。
5.根据权利要求1所述一种l-肌肽的制备方法，其特征在于，步骤s2中，所述有机溶剂为二氯甲烷或四氢呋喃；
6.根据权利要求1所述一种l-肌肽的制备方法，其特征在于，步骤s2的具体操作为：控制温度为0-10℃，向化合物iii的有机溶剂中滴加脱水试剂，滴加完毕后，再升温至20-30℃进行反应。
7.根据权利要求1所述一种l-肌肽的制备方法，其特征在于，步骤s3的具体操作为：将三甲基碘化亚砜、碳酸钾溶于有机溶剂中，得到反应液c；将化合物iv溶于有机溶剂中，得到反应液d；将反应液c滴加至反应液d中，滴加盐酸，制得化合物v，加入醋酸甲脒，反应制得化合物vi。
8.根据权利要求7所述一种l-肌肽的制备方法，其特征在于，步骤s3中，所述有机溶剂为n,n-二甲基甲酰胺；
9.根据权利要求1所述一种l-肌肽的制备方法，其特征在于，步骤s4中，所述还原催化剂为钯碳和三氟化硼四氢呋喃的混合物，其中化合物vi与还原催化剂中钯元素和硼元素的摩尔比为1：（0.0005-0.0020）：（0.0001-0.0003），还原催化剂中钯元素和硼元素的摩尔比为（5-8）：1。
10.根据权利要求1所述一种l-肌肽的制备方法，其特征在于，步骤s4中，氢化还原的反应温度条件为60-70℃，压力条件为0.5-2.0mpa。
