本发明涉及美容品制备,具体为一种基于干细胞高效表达外泌体式美容品的制备方法。
背景技术:
1、护肤液,通常指的是一种液体护肤产品,它旨在为皮肤提供各种护理效果,如保湿、滋养、修复、抗老化、美白、平衡油脂等,护肤液可以是水基的,也可以是油基的,或者是水油混合的乳液形式,它们通常作为日常护肤程序的一部分,用于清洁皮肤后,以帮助锁住水分,提供营养,或针对特定皮肤问题提供解决方案,护肤液通常在清洁和爽肤后使用,涂抹于面部、颈部或其他需要护理的部位,轻轻按摩至吸收,不同的护肤液适用于不同的肤质和季节,选择适合自己的护肤液可以帮助改善皮肤状态,保持健康美丽的肌肤。
2、干细胞高效表达的外泌体是指通过基因工程或其他技术手段,将干细胞转化为产生大量外泌体的细胞系或组织,在国内并没有成熟的技术将干细胞高效表达的外泌体应用于护肤液中,现有技术中的护肤液如中国专利cn110179737b中以护肤液的总重量为基准,脐带组织提取物10%~50%、保湿剂5%~17%、皮肤调理剂5%~26.5%。本发明还提供一种制备本发明的护肤液的方法,包括如下步骤:将保湿剂与脐带组织提取物和皮肤调理剂搅拌至均匀,任选地再加入ph调节剂调节ph值至5-7后制得护肤液;或者将保湿剂与抗氧化剂、芳香剂、螯合剂、增稠剂以及去离子水中的一种或几种混合,然后将混合物加热到50~85℃,搅拌至均匀,待降至室温后,加入脐带组织提取物和皮肤调理剂搅拌至均匀,任选地再加入ph调节剂调节ph值至5-7后制得护肤液,该发明提供的护肤液能够修复受损的皮肤细胞、消除痘印,综上该申请并没有运用到干细胞高效表达的外泌体,实际使用的过程中功能较为单一,为了提升护肤品的多样效果,本技术提出一种基于干细胞高效表达外泌体式美容品的制备方法来解决上述问题。
技术实现思路
1、针对现有技术的不足,本发明提供了一种基于干细胞高效表达外泌体式美容品的制备方法,具备具有更多样化的护肤效果等优点,解决了现有护肤品实际使用的过程中功能较为单一的问题。
2、为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:一种基于干细胞高效表达外泌体式美容品的制备方法,包括以下步骤:
3、s1选择合适的干细胞培养在适宜的培养基中,并进行扩增;
4、s2诱导培养中的干细胞释放外泌体;
5、s3收集培养上清液,并通过超速离心提取外泌体;
6、s4使用分子量截止为10kda或更小的超滤膜进行浓缩,将外泌体浓缩到所需的体积和浓度,然后对浓缩后的外泌体进行密度梯度离心;
7、s5对密度梯度离心后的外泌体进行洗涤,以去除可能残留的梯度液和其他杂质;
8、s6将洗涤后的外泌体与美容品配方中的其他成分混合,制备成合适的美容品制剂。
9、进一步,所述步骤s1中的干细胞为充质干细胞、脂肪干细胞、表皮干细胞中的一种。
10、进一步,所述步骤s1的具体扩增方法如下:
11、1)根据所选干细胞类型的要求,准备相应的培养基;
12、2)将选择的干细胞按照操作规程进行解冻或从新鲜组织中分离,然后在无菌条件下种植在培养皿中;
13、3)根据所选干细胞类型的特性和培养要求,调节培养条件,包括温度、湿度、co2浓度。
14、4)定期更换培养基,补充所需的生长因子和营养物质,并定期检查细胞的外观和生长状态;
15、5)通过定期传代或次级培养等方法,使干细胞在培养皿中扩增,传代时,将细胞从原培养皿中解离,并重新分配到新的培养皿中继续培养。
16、进一步,所述步骤s2中诱导刺激的方法为化学诱导、应激诱导和基因诱导的其中一种,具体如下:
17、化学诱导:使用化学物质如细胞因子、小分子化合物等,在培养基中诱导干细胞释放外泌体;
18、应激诱导:通过暴露干细胞于不同的应激条件来诱导外泌体释放;
19、基因诱导:利用基因工程技术,在干细胞中过表达或敲低特定基因,以增强或减弱外泌体释放。
20、进一步,所述步骤s3中离心转速为10000×g-100000×g,所述离心时间为30min-120min。
21、进一步,所述步骤s5中洗涤的步骤具体如下:
22、s1准备足够的洗涤缓冲液,选择无菌的生理盐水(pbs)或类似的缓冲液,将洗涤缓冲液缓慢地加入到外泌体沉淀物中,使其悬浮并充分混合;
23、s2将含有外泌体沉淀物的混合液转移到新的离心管中;
24、s3进行洗涤步骤,一般建议重复洗涤2-3次,以确保彻底去除残留的梯度液和其他杂质,每次洗涤后,使用适当的离心参数将外泌体沉淀物沉积在离心管底部;
25、s4在每次洗涤后,小心地将上清液或洗涤液抽取或倒掉,避免扰动外泌体沉淀物;
26、s5在最后一次洗涤后,将外泌体沉淀物悬浮于适当的溶液中,通过轻轻的振荡或轻轻的离心使其充分悬浮。
27、进一步,所述步骤s6中美容品包含以护肤液的总重量为基准的组分:
28、去离子水:60-70%、甘油:5-10%、透明质酸:0.05-0.5%、植物油:5-10%、乳化剂:1-3%、防腐剂:0.1-1%、增稠剂:0.1-1%、香料:0.1-1%、ph调节剂0.1-1%、干细胞外泌体8-10%。
29、进一步,所述s6中具体制备方法如下:
30、s1准备好所需原料和配方中所列的各种成分;
31、s2将去离子水加入混合容器中,占总配方量的60-70%,然后将甘油、透明质酸、植物油、乳化剂、防腐剂、增稠剂、香料和ph调节剂按配方比例依次加入混合容器中;
32、s3将混合容器中的成分充分搅拌混合,直至所有成分均匀分散在一起,形成均一的液体;
33、s4根据所用的ph调节剂和目标ph值,逐渐调整混合物的ph值,使其符合皮肤的酸碱平衡;
34、s5将预先制备好的干细胞外泌体按配方比例加入混合容器中,占总配方量的8-10%,轻轻搅拌混合,确保外泌体均匀分散在护肤液中。
35、进一步,所述ph调节剂添加到混合物之前,使用ph计或ph试纸等工具测量混合物的初始ph值,将选定的ph调节剂逐渐添加到混合物中,根据预期的调节效果和目标ph值,逐步调整ph值,持续添加和调整ph调节剂,直到混合物的ph值达到预期的目标范围。
36、进一步,所述步骤s5外泌体均匀分散在护肤液中后,对产品进行收集,然后对最终混合物及护肤液进行外观、气味、质地等方面的检查,确保产品符合质量标准。
37、与现有技术相比,本技术的技术方案具备以下有益效果:
38、该基于干细胞高效表达外泌体式美容品的制备方法,使用干细胞技术,特别是通过基因工程或其他技术手段,提高了外泌体的产量和质量,通过将干细胞高效表达的外泌体应用于护肤液中,可能增强产品的修复、滋养、抗老化等功效,通过超速离心和超滤膜浓缩等步骤,确保了外泌体的纯度和浓度,提高了最终产品的品质,采用多次洗涤和适当的离心参数,有效去除残留的梯度液和其他杂质,提高了外泌体的纯度,通过ph调节剂的使用,确保最终护肤液的ph值符合皮肤的酸碱平衡,减少皮肤刺激,在制备过程的最后阶段,对外泌体的均匀分散和最终产品的感官特性(外观、气味、质地)进行检查,确保产品质量,在护肤液配方中,干细胞外泌体的比例高达8-10%,这能显著提升产品的功效,与传统护肤液相比,本发明可能具有更多样化的护肤效果,如保湿、滋养、修复、抗老化等,通过精确的配方比例和制备步骤,确保了产品的一致性和可重复性。
1.一种基于干细胞高效表达外泌体式美容品的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种基于干细胞高效表达外泌体式美容品的制备方法,其特征在于:所述步骤s1中的干细胞为充质干细胞、脂肪干细胞、表皮干细胞中的一种。
3.根据权利要求1所述的一种基于干细胞高效表达外泌体式美容品的制备方法,其特征在于:所述步骤s1的具体扩增方法如下:
4.根据权利要求1所述的一种基于干细胞高效表达外泌体式美容品的制备方法,其特征在于:所述步骤s2中诱导刺激的方法为化学诱导、应激诱导和基因诱导的其中一种,具体如下:
5.根据权利要求1所述的一种基于干细胞高效表达外泌体式美容品的制备方法,其特征在于:所述步骤s3中离心转速为10000×g-100000×g,所述离心时间为30min-120min。
6.根据权利要求1所述的一种基于干细胞高效表达外泌体式美容品的制备方法,其特征在于:所述步骤s5中洗涤的步骤具体如下:
7.根据权利要求1所述的一种基于干细胞高效表达外泌体式美容品的制备方法,其特征在于:所述步骤s6中美容品包含以护肤液的总重量为基准的组分:
8.根据权利要求1所述的一种基于干细胞高效表达外泌体式美容品的制备方法,其特征在于:所述s6中具体制备方法如下:
9.根据权利要求8所述的一种基于干细胞高效表达外泌体式美容品的制备方法,其特征在于:所述ph调节剂添加到混合物之前,使用ph计或ph试纸等工具测量混合物的初始ph值,将选定的ph调节剂逐渐添加到混合物中,根据预期的调节效果和目标ph值,逐步调整ph值,持续添加和调整ph调节剂,直到混合物的ph值达到预期的目标范围。
10.根据权利要求8所述的一种基于干细胞高效表达外泌体式美容品的制备方法,其特征在于:所述步骤s5外泌体均匀分散在护肤液中后,对产品进行收集,然后对最终混合物及护肤液进行外观、气味、质地等方面的检查,确保产品符合质量标准。