本发明属于医药，具体涉及一种含有艾氟洛芬脂质体的水凝胶贴膏及其制备方法。
背景技术：
1、艾氟洛芬是氟比洛芬的外消旋体(s型)，对环氧化酶(cox)-1和cox-2都具有极强的抑制作用。相比于同类型非甾体抗炎药贴剂，日本上市的艾氟洛芬贴剂在临床上表现出更高的经皮吸收率、膝关节深层组织转移性和更强的消炎镇痛作用，用于膝关节骨性关节炎的治疗。因此，艾氟洛芬具有解决传统消炎镇痛贴剂起效慢，效果弱等缺点的潜力。然而，艾氟洛芬作为一种有效的非甾体抗炎药物，因其溶解度不足及体内非特异性分布的问题，限制了其局部治疗效果和安全性。
2、为了克服上述问题，近年来，脂质体作为药物载体的研究引起了广泛关注。脂质体不仅能够封装疏水性或难溶性药物，提高其生物利用度，还能通过表面修饰实现药物的靶向递送。然而，如何将脂质体稳定地整合进易于使用、患者依从性好的给药系统中，同时保持药物的靶向释放特性，依然是一个研究热点。
3、水凝胶作为一种三维网络结构的智能材料，具有良好的生物相容性和保水能力，能够提供药物缓慢释放的微环境。特别是，通过调整水凝胶的组成和交联程度，可以进一步调控药物释放速率，实现长效治疗。此外，将具有靶向功能的分子修饰于脂质体表面，并将其嵌入水凝胶基质中，为实现药物的精准递送提供了新途径。
4、专利文献(公开号cn202410066715)中提出了一种针对tmjoa的双靶向给药体系，利用纳米脂质粒子(lnp)载体携带核酸和小分子药物，并通过表面修饰叶酸或软骨靶向肽wyrgrl来增强靶向性，以及通过静脉或关节腔注射，实现了基因调控和软骨修复的双重效果。尽管在靶向性和治疗效率上有所突破，但它主要局限于系统性给药，未涉及局部、持续释放的需求。这限制了其在处理需长期局部管理的症状，如慢性疼痛和炎症，方面的应用。因此，实现艾氟洛芬脂质体的靶向递送和长效缓释，是当前医药技术领域亟待解决的问题。
技术实现思路
1、本发明的目的是在现有技术的基础上，提供一种含有艾氟洛芬脂质体的水凝胶贴膏，它包括背衬层和涂覆在所述背衬层表面的由艾氟洛芬脂质体和凝胶基质制成的载药凝胶层，解决现有非甾体抗炎药贴剂面临的溶解度不足及体内非特异性分布问题，将难溶性药物艾氟洛芬封装于由蛋黄卵磷脂和胆固醇构成的双分子层囊泡中，并在双分子层囊泡的表面修饰有wyrgrl-dspe-peg2k接枝物，可以强化药物对软骨细胞的特异性摄取，从而为实现精准的软骨靶向递送；凝胶基质是由聚乙烯醇、壳聚糖和明胶经交联形成的三维复合网络结构的凝胶，不仅保证了良好的物理稳定性，而且通过调控壳聚糖含量能够提高贴膏的黏附力与药物透皮效率，具有良好生物相容性的水凝胶贴膏可以为膝关节骨性关节炎治疗提供可替代的经皮给药方案。
2、本发明的另一个目的是提供上述含有艾氟洛芬脂质体的水凝胶贴膏的制备方法。
3、本发明的技术方案如下：
4、本发明提供一种含有艾氟洛芬脂质体的水凝胶贴膏，它包括背衬层和涂覆在所述背衬层表面的由艾氟洛芬脂质体和凝胶基质制成的载药凝胶层，其中，艾氟洛芬脂质体是由蛋黄卵磷脂和胆固醇构成的双分子层囊泡，在双分子层囊泡中封装有活性物质艾氟洛芬，在双分子层囊泡的表面修饰有wyrgrl-dspe-peg2k接枝物；凝胶基质是由聚乙烯醇、壳聚糖和明胶经交联形成的三维复合网络结构的凝胶。
5、在制备艾氟洛芬脂质体的过程中蛋黄卵磷脂、胆固醇和wyrgrl-dspe-peg2k接枝物的摩尔比为20:5-15:0.1～0.3，优选为20:10:0.2。
6、在凝胶基质的制备过程中聚乙烯醇、壳聚糖和明胶的质量比为5-7:1-3:1；优选为6:2:1。
7、艾氟洛芬脂质体中艾氟洛芬与所述凝胶基质中明胶的质量比为3-7:1，优选为5:1。
8、在本发明中，wyrgrl-dspe-peg2k接枝物的制备方法包括如下步骤：软骨靶向肽wyrgrl和dspe-peg2k-nhs在催化剂4-二甲氨基吡啶存在下进行化学反应，所得反应液经透析处理去除未反应的物料，干燥得到wyrgrl-dspe-peg2k接枝物。
9、其中，dspe-peg2k-nhs为二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-琥珀酰亚胺酯；软骨靶向肽wyrgrl与dspe-peg2k-nhs的摩尔比0.9-1.5:1；优选为1.05-1.25:1，更优选为1.1:1。
10、dspe-peg2k-nhs与4-二甲氨基吡啶的质量比为1:0.43-4.3，优选为1:2.2-2.6，更优选为1:2.4。
11、透析处理时，截留分子量为1.0-4.0kda，优选为3.0kda；透析时间为18-26h，优选为24h。
12、本发明提供的艾氟洛芬脂质体的制备方法包括如下步骤：
13、(1)将蛋黄卵磷脂、胆固醇、wyrgrl-dspe-peg2k接枝物和艾氟洛芬溶解于溶剂中，采用旋转蒸发法制成脂质薄膜，在30-50℃的条件下，置于磷酸盐缓冲液中进行水化处理，形成初级混悬液；
14、(2)对步骤(1)中所得初级混悬液进行探头超声处理，再通过450nm与225nm孔径的膜进行多级挤出，每级进行8至12次循环，得到艾氟洛芬脂质体。
15、对于本发明而言，在步骤(1)中，溶剂为甲醇、乙醇或异丙醇，优选为乙醇。
16、在一种优选方案中，水化处理的温度为40℃。
17、磷酸盐缓冲液的ph值为7.0-8.0，优选为7.4。
18、对于本发明而言，在步骤(2)中，超声处理的频率20-30khz，优选为25khz，开关时间为3s开，2s关，总时间为2-10min，优选为5min。
19、本发明提供的凝胶基质的制备方法包括如下步骤：
20、(1)聚乙烯醇溶液的制备：将聚乙烯醇分散于纯化水中，在70-80℃的条件下磁力搅拌均匀，制得pva溶液；
21、(2)含壳聚糖的醋酸溶液的制备：将壳聚糖溶于含5％醋酸的纯化水中，在40-60℃的条件下磁力搅拌均匀，制得含壳聚糖的5％醋酸溶液；
22、(3)明胶溶液的制备：将明胶分散于纯化水中，在40-60℃的条件下磁力搅拌均匀，制得明胶溶液；
23、(4)基质混合：将步骤(2)制备的含壳聚糖的5％醋酸溶液、步骤(3)制备的明胶溶液和步骤(1)制备的聚乙烯醇(pva)溶液，在70-80℃的条件下，磁力搅拌均匀，得到混合均匀的凝胶基质。
24、对于本发明而言，在步骤(1)中，搅拌温度为75℃，搅拌时间为1-3h，优选为2h。
25、对于本发明而言，在步骤(2)中，搅拌温度为50℃，搅拌时间为2-6h，优选为4h。
26、对于本发明而言，在步骤(3)中，搅拌温度为50℃，搅拌时间为1-3h，优选为2h。
27、对于本发明而言，在步骤(4)中，搅拌温度为75℃，搅拌时间为1-2h，优选为0.5h。
28、本发明提供的水凝胶贴膏的制备方法包括如下步骤：
29、(1)混合：将部分凝胶基质，在搅拌的过程中滴加至所述艾氟洛芬脂质体中，使得脂质体能够均匀分散，得到预混合物；再将所得预混合物加入至剩余凝胶基质中，持续搅拌至混合均匀，得到半固态凝胶；
30、(2)涂布：将步骤(1)中所得半固态凝胶涂布于无纺布背衬层上，在20-30℃的条件下使用γ-射线进行辐射交联，盖上压花膜作为防粘层，得到水凝胶贴膏。
31、对于本发明而言，在步骤(1)中，部分凝胶基质的加入量为其总量的40～60％，优选为50％。
32、在步骤(2)中，辐射剂量为30-50kgy，优选为40kgy；辐射交联的时间为10-30min，优选为20min。
33、本发明还提供了上述含有艾氟洛芬脂质体的水凝胶贴膏的制备方法，包括如下步骤：
34、(b)wyrgrl-dspe-peg2k接枝物的制备方法包括如下步骤：
35、软骨靶向肽wyrgrl和dspe-peg2k-nhs在催化剂4-二甲氨基吡啶存在下进行化学反应，所得反应液经透析处理去除未反应的物料，干燥得到wyrgrl-dspe-peg2k接枝物；
36、其中，软骨靶向肽wyrgrl与dspe-peg2k-nhs的摩尔比0.9-1.5:1；优选为1.05-1.25:1，更优选为1.1:1；dspe-peg2k-nhs与4-二甲氨基吡啶的质量比为1:0.43-4.3；透析处理时，截留分子量为1.0-4.0kda，优选为3.0kda；透析时间为18-26h，优选为24h；
37、(b)艾氟洛芬脂质体的制备方法包括如下步骤：
38、(1)将蛋黄卵磷脂、胆固醇、wyrgrl-dspe-peg2k接枝物和艾氟洛芬溶解于溶剂中，采用旋转蒸发法制成脂质薄膜，在30-50℃的条件下，置于磷酸盐缓冲液中进行水化处理，形成初级混悬液；
39、(2)对步骤(1)中所得初级混悬液进行探头超声处理，再通过450nm与225nm孔径的膜进行多级挤出，每级进行8至12次循环，得到艾氟洛芬脂质体；
40、其中，在步骤(1)中，所述溶剂为甲醇、乙醇或异丙醇，优选为乙醇；水化处理的温度为40℃；所述磷酸盐缓冲液的ph值为7.0-8.0，优选为7.4；在步骤(2)中，超声处理的频率20-30khz，优选为25khz，开关时间为3s开，2s关，总时间为2-10min，优选为5min；
41、(c)凝胶基质的制备方法包括如下步骤：
42、(1)聚乙烯醇溶液的制备：将聚乙烯醇分散于纯化水中，在70-80℃的条件下磁力搅拌均匀，制得pva溶液；
43、(2)含壳聚糖的醋酸溶液的制备：将壳聚糖溶于含5％醋酸的纯化水中，在40-60℃的条件下磁力搅拌均匀，制得含壳聚糖的5％醋酸溶液；
44、(3)明胶溶液的制备：将明胶分散于纯化水中，在40-60℃的条件下磁力搅拌均匀，制得明胶溶液；
45、(4)基质混合：将步骤(2)制备的含壳聚糖的5％醋酸溶液、步骤(3)制备的明胶溶液和步骤(1)制备的聚乙烯醇(pva)溶液，在70-80℃的条件下，磁力搅拌均匀，得到混合均匀的凝胶基质；
46、其中，在步骤(1)中，搅拌温度为75℃，搅拌时间为1-3h，优选为2h；在步骤(2)中，搅拌温度为50℃，搅拌时间为2-6h，优选为4h；在步骤(3)中，搅拌温度为50℃，搅拌时间为1-3h，优选为2h；在步骤(4)中，搅拌温度为75℃，搅拌时间为1-2h，优选为0.5h；
47、(d)水凝胶贴膏的制备方法包括如下步骤：
48、(1)混合：将部分凝胶基质，在搅拌的过程中滴加至所述艾氟洛芬脂质体中，使得脂质体能够均匀分散，得到预混合物；再将所得预混合物加入至剩余凝胶基质中，持续搅拌至混合均匀，得到半固态凝胶；
49、(2)涂布：将步骤(1)中所得半固态凝胶涂布于无纺布背衬层上，在20-30℃的条件下使用γ-射线进行辐射交联，盖上压花膜作为防粘层，得到水凝胶贴膏；
50、其中，在步骤(1)中，所述部分凝胶基质的加入量为其总量的40～60％，优选为50％；在步骤(2)中，辐射剂量为30-50kgy，优选为40kgy；辐射交联的时间为10-30min，优选为20min。
51、本发明提供的含有艾氟洛芬脂质体的水凝胶贴膏，在使用的过程中，艾氟洛芬脂质体从水凝胶三维网络中缓慢释放出来，被靶向肽引导向软骨组织附近的炎症或受损区域聚集，增加局部药物浓度，减少对非目标组织的副作用。
52、采用本发明的技术方案，优势如下:
53、本发明提供一种含有艾氟洛芬脂质体的水凝胶贴膏，它包括背衬层和涂覆在所述背衬层表面的由艾氟洛芬脂质体和凝胶基质制成的载药凝胶层，解决现有非甾体抗炎药贴剂面临的溶解度不足及体内非特异性分布问题，将难溶性药物艾氟洛芬封装于由蛋黄卵磷脂和胆固醇构成的双分子层囊泡中，并在双分子层囊泡的表面修饰有wyrgrl-dspe-peg2k接枝物，可以强化药物对软骨细胞的特异性摄取，从而为实现精准的软骨靶向递送；凝胶基质是由聚乙烯醇、壳聚糖和明胶经交联形成的三维复合网络结构的凝胶，不仅保证了良好的物理稳定性，而且通过调控壳聚糖含量能够提高贴膏的黏附力与药物透皮效率，具有良好生物相容性的水凝胶贴膏可以为膝关节骨性关节炎治疗提供可替代的经皮给药方案。
1.一种含有艾氟洛芬脂质体的水凝胶贴膏，其特征在于，它包括背衬层和涂覆在所述背衬层表面的由艾氟洛芬脂质体和凝胶基质制成的载药凝胶层，所述艾氟洛芬脂质体是由蛋黄卵磷脂和胆固醇构成的双分子层囊泡，在所述双分子层囊泡中封装有活性物质艾氟洛芬，在所述双分子层囊泡的表面修饰有wyrgrl-dspe-peg2k接枝物；所述凝胶基质是由聚乙烯醇、壳聚糖和明胶经交联形成的三维复合网络结构的凝胶。
2.根据权利要求1所述的含有艾氟洛芬脂质体的水凝胶贴膏，其特征在于，在制备艾氟洛芬脂质体的过程中蛋黄卵磷脂、胆固醇和wyrgrl-dspe-peg2k接枝物的摩尔比为20:5-15:0.1～0.3，优选为20:10:0.2；在凝胶基质的制备过程中聚乙烯醇、壳聚糖和明胶的质量比为5-7:1-3:1；优选为6:2:1；所述艾氟洛芬脂质体中艾氟洛芬与所述凝胶基质中明胶的质量比为3-7:1，优选为5:1。
3.根据权利要求2所述的含有艾氟洛芬脂质体的水凝胶贴膏，其特征在于，所述wyrgrl-dspe-peg2k接枝物的制备方法包括如下步骤：软骨靶向肽wyrgrl和dspe-peg2k-nhs在催化剂4-二甲氨基吡啶存在下进行化学反应，所得反应液经透析处理去除未反应的物料，干燥得到wyrgrl-dspe-peg2k接枝物；其中，所述dspe-peg2k-nhs为二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-琥珀酰亚胺酯；软骨靶向肽wyrgrl与dspe-peg2k-nhs的摩尔比0.9-1.5:1；优选为1.05-1.25:1，更优选为1.1:1；dspe-peg2k-nhs与4-二甲氨基吡啶的质量比为1:0.43-4.3，优选为1:2.2-2.6，更优选为1:2.4；透析处理时，截留分子量为1.0-4.0kda，优选为3.0kda；
4.根据权利要求3所述的含有艾氟洛芬脂质体的水凝胶贴膏，其特征在于，所述艾氟洛芬脂质体的制备方法包括如下步骤：
5.根据权利要求4所述的含有艾氟洛芬脂质体的水凝胶贴膏，其特征在于，在步骤(1)中，所述溶剂为甲醇、乙醇或异丙醇，优选为乙醇；水化处理的温度为40℃；所述磷酸盐缓冲液的ph值为7.0-8.0，优选为7.4；在步骤(2)中，超声处理的频率20-30khz，优选为25khz，开关时间为3s开，2s关，总时间为2-10min，优选为5min。
6.根据权利要求5所述的含有艾氟洛芬脂质体的水凝胶贴膏，其特征在于，所述凝胶基质的制备方法包括如下步骤：
7.根据权利要求6所述的含有艾氟洛芬脂质体的水凝胶贴膏，其特征在于，在步骤(1)中，搅拌温度为75℃，搅拌时间为1-3h，优选为2h；在步骤(2)中，搅拌温度为50℃，搅拌时间为2-6h，优选为4h；在步骤(3)中，搅拌温度为50℃，搅拌时间为1-3h，优选为2h；在步骤(4)中，搅拌温度为75℃，搅拌时间为1-2h，优选为0.5h。
8.根据权利要求7所述的含有艾氟洛芬脂质体的水凝胶贴膏，其特征在于，所述水凝胶贴膏的制备方法包括如下步骤：
9.根据权利要求8所述的含有艾氟洛芬脂质体的水凝胶贴膏，其特征在于，在步骤(1)中，所述部分凝胶基质的加入量为其总量的40～60％，优选为50％；在步骤(2)中，辐射剂量为30-50kgy，优选为40kgy；辐射交联的时间为10-30min，优选为20min。
10.权利要求1所述的含有艾氟洛芬脂质体的水凝胶贴膏的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
