一种艾中糖基转移酶AarUGT11编码基因、蛋白质及应用

    技术2024-11-20  54


    本发明涉及生物,尤其涉及一种艾中糖基转移酶aarugt11编码基因、蛋白质及应用。


    背景技术:

    1、艾(artemisia argyi lévl.etvant)是菊科蒿属的多年生草本植物。其干燥叶艾是我国传统中药材,具有悠久的药用历史,被载入2020版《中国药典》,具有温经止血、散寒止痛、祛湿止痒等功效。近年来,随着艾生物活性的作用机制和机理不断被揭示,艾草的应用越来越广泛,从食用、药用逐步扩展到保健食品、日用品、化妆品、畜禽饲喂、纺织等多个领域,2020年艾市场的年价值超过400亿元人民币。

    2、艾中总黄酮含量在1.29%~14.67%,整体较挥发油含量要高。目前从艾中共分离得到51个黄酮类化合物,主要为黄酮、黄酮醇及其苷、二氢黄酮、黄烷酮、查耳酮等。已有许多文献报道艾中黄酮成分具有抗氧化、抑菌、抗病毒、和抗炎等药理活性,其中有实验证明异泽兰黄素和棕矢车菊素可以抑制肿瘤细胞,异泽兰黄素-7-o-吡喃葡萄糖苷能够明显延长凝血酶的时间,艾中还含有夏佛塔苷,可通过抑制病毒和调节免疫防治疾病。艾叶中的苯丙素类成分的含量仅次于挥发油类和黄酮类,且也被用作含量测定和指纹图谱研究。由此可见,艾中的苷类成分可能具有更多潜在的药理活性,对艾中黄酮类和苯丙素类化合物的研究具有重要意义,然而其生物合成途径及其关键酶研究依然空白。

    3、植物类黄酮通常以糖苷形式存在,糖基化是使黄酮结构多样化的主要因素之一,糖基化也会对类黄酮在人体内的药理活性以及药代动力学行为有一定的影响,例如可以将核苷糖上的活性糖基转移到类黄酮上,从而影响类黄酮的水溶性,改善其化学稳定性和生物活性。

    4、尿苷二磷酸糖基转移酶(udp-glycosyltransferase,ugt)家族是植物中最大的糖基转移酶超家族,其以尿苷二磷酸(uridinediphosphate,udp)活化的糖分子作为糖基供体,与很多植物激素和次生代谢产物的糖基化有关。

    5、目前已有较多ugt基因被鉴定和报道具有黄酮醇糖基转移酶活性,如ugt71家族中,草莓(fragariax ananassa)的fagt6可以催化以槲皮素为代表的黄酮醇形成3-o-葡萄糖苷和少量其他单葡萄糖苷和二葡萄糖苷。但控制艾中黄酮及苯丙素糖苷生物合成途径的基因并没有被公开。


    技术实现思路

    1、本发明的目的在于提供一种艾中糖基转移酶aarugt11编码基因、蛋白质及应用,填补了艾中黄酮糖苷生物合成途径的终端空白。

    2、为了实现上述发明目的,本发明提供以下技术方案:

    3、本发明提供了一种艾中糖基转移酶aarugt11编码基因所述艾中糖基转移酶aarugt11编码基因的基因序列如seq id no.1所示。

    4、本发明还提供了一种扩增艾中糖基转移酶aarugt11编码基因的引物对,所述扩增艾中糖基转移酶aarugt11编码基因的引物对由序列seq id no.3所示引物和序列seq idno.4所示引物组成。

    5、本发明还提供了包含艾中糖基转移酶aarugt11编码基因的表达盒、重组表达载体或重组菌。

    6、本发明还提供了一种艾中糖基转移酶aarugt11编码基因编码的艾中糖基转移酶aarugt11,所述艾中糖基转移酶aarugt11的氨基酸序列如seq id no.2所示。

    7、本发明还提供了一种艾中糖基转移酶aarugt11的应用,

    8、所述艾中糖基转移酶aarugt11可在以udp-葡萄糖为糖供体时,用于催化底物异泽兰黄素生成异泽兰黄素-7-o-葡萄糖苷;

    9、或用于催化底物棕矢车菊素生成棕矢车菊素-7-o-葡萄糖苷;

    10、或用于催化底物高车前素生成高车前素-7-o-葡萄糖苷;

    11、或用于催化底物瑞香素生成瑞香素-7-o-葡萄糖苷;

    12、或用于催化底物秦皮乙素生成秦皮乙素-7-o-葡萄糖苷;

    13、或用于催化底物异嗪皮啶生成异嗪皮啶-7-o-葡萄糖苷;

    14、或用于催化底物东莨菪内酯生成东莨菪内酯-7-o-葡萄糖苷。本发明与现有技术相比的有益效果为:

    15、(1)本发明筛选并鉴定了异泽兰黄素-7-o-葡萄糖苷、棕矢车菊素-7-o-葡萄糖苷、高车前素-7-o-葡萄糖苷、东莨菪内酯-7-o-葡萄糖苷、异嗪皮啶-7-o-葡萄糖苷、瑞香素-7-o-葡萄糖苷、秦皮乙素-7-o-葡萄糖苷合成的最后一步关键酶艾中糖基转移酶aarugt11,填补艾中黄酮苷类成分生物合成途径的空白,为进一步生物合成异泽兰黄素-7-o-葡萄糖苷、棕矢车菊素-7-o-葡萄糖苷、高车前素-7-o-葡萄糖苷、东莨菪内酯-7-o-葡萄糖苷、异嗪皮啶-7-o-葡萄糖苷、瑞香素-7-o-葡萄糖苷、秦皮乙素-7-o-葡萄糖苷提供了糖基转移酶蛋白及其编码序列。

    16、(2)本发明挖掘并鉴定出艾中参与黄酮苷类活性成分生物合成的关键糖基转移酶,对于理解艾的品质形成具有重要意义,同时为黄酮类成分的合成生物学研究提供关键元件。



    技术特征:

    1.一种艾中糖基转移酶aarugt11编码基因,其特征在于,所述艾中糖基转移酶aarugt11编码基因的基因序列如seq id no.1所示。

    2.一种扩增权利要求1所述艾中糖基转移酶aarugt11编码基因的引物对,其特征在于,所述扩增艾中糖基转移酶aarugt11编码基因的引物对由序列seq id no.3所示引物和序列seq id no.4所示引物组成。

    3.包含权利要求1所述艾中糖基转移酶aarugt11编码基因的表达盒、重组表达载体或重组菌。

    4.一种权利要求1所述艾中糖基转移酶aarugt11编码基因编码的艾中糖基转移酶aarugt11,其特征在于,所述艾中糖基转移酶aarugt11的氨基酸序列如seq id no.2所示。

    5.一种权利要求4所述艾中糖基转移酶aarugt11的应用,其特征在于,


    技术总结
    本发明提供了一种艾中糖基转移酶AarUGT11编码基因、蛋白质及应用,属于生物技术领域。本发明基于艾全基因组测序的相关结果,筛选并鉴定了异泽兰黄素‑7‑O‑葡萄糖苷、棕矢车菊素‑7‑O‑葡萄糖苷、高车前素‑7‑O‑葡萄糖、东莨菪内酯‑7‑O‑葡萄糖苷、异嗪皮啶‑7‑O‑葡萄糖苷、瑞香素‑7‑O‑葡萄糖苷、秦皮乙素‑7‑O‑葡萄糖苷合成的最后一步关键酶AarUGT11,填补艾中黄酮苷类成分生物合成途径的空白。本发明对于理解艾的品质形成具有重要意义,同时为黄酮类成分的合成生物学研究提供关键元件。

    技术研发人员:向丽,师玉华,陈士林,程泊涵,尹青岗,高冉冉,邬兰,王梦月
    受保护的技术使用者:中国中医科学院中药研究所
    技术研发日:
    技术公布日:2024/10/24
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