本发明涉及微生物和生物农药，具体涉及猫耳斜盖伞(clitopiluspasseckerianus)孢子悬液的制备方法及其应用。
背景技术：
1、植物细菌病害是一种仅次于真菌的第二类植物病害，据不完全统计，我国细菌性病害目前发生面积在1.2亿亩次，具有发病快、分布广和难控制等特点。近年来，随着我国农作物栽培制度和环境气候的变化，水稻白叶枯病菌(xoo)、水稻细菌性条斑病菌(xoc)、柑橘溃疡病菌(xac)等作物细菌性病害在我国呈现出偏重发生的趋势。当前，与农作物真菌性病害防治药剂相比较，国内外细菌性病害的防治药剂相当缺乏，作物连年重茬种植，细菌性病害愈发呈现出混发、多发和长期发作的趋势，目前主要依赖化学防治细菌性病害，但药剂种类少，品种单一，存在混用性差、安全性差、易诱发红蜘蛛、抗性高和生殖毒性高等问题。与传统的化学农药相比，生物农药具有显著的优势，生物农药来源于自然生态系统，活性成分易被分解，对环境影响小，选择性强，对人畜安全，不会造成污染和残留。寻求快速有效地生物防治植物细菌病害的方法越来越受到人们的重视。
2、猫耳斜盖伞(clitopilus passeckerianus)孢子悬液是一种新型杀细菌生物农药，其对水稻白叶枯病菌(xoo)、水稻细菌性条斑病菌(xoc)、柑橘溃疡病菌(xac)等病原菌具有优异的抑菌活性。对水稻白叶枯病、水稻细菌性条斑病和柑橘溃疡病等细菌病害防效优异。
技术实现思路
1、为了解决上述农业生产存在的技术问题及现有技术的不足，本发明提供了一种对植物细菌病害具有良好防效的猫耳斜盖伞(clitopilus passeckerianus)菌株、孢子悬液、其制备方法与应用。
2、为达此目的，本发明采用以下技术方案。
3、在第一方面，本发明提供一种猫耳斜盖伞(clitopilus passeckerianus)菌株，从云南采摘的该菌株于2024年7月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.41407，保藏地址为中国科学院微生物研究所。
4、在第二方面，提供一种猫耳斜盖伞孢子悬液的制备方法，包括如下步骤：
5、(1)将猫耳斜盖伞菌株接种到pda固体培养基上，培养温度25℃，培养48-72h；
6、(2)将步骤(1)得到的活化菌株按产孢固体培养基5-10％表面积比例接种于产孢培养基上，在25℃-27℃发酵120-144h；
7、(3)在步骤(2)所得产孢培养基中加入高压灭菌后的0.5％tween-80溶液，轻轻刮取培养基表面，使孢子全部悬浮于水中，使用300目纱布过滤，获得孢子悬液，使用血细胞计数板在显微镜下计数，再稀释至所需浓度。
8、优选的，所述步骤(2)中产孢培养基按如下方法制备：
9、将燕麦20-25份、燕麦麦麸20-25份、葡萄糖5-8份、钼酸胺、硫酸铁、乙二胺四乙酸二钠(edta-2na)0.5-2份，加水混合，121℃、20min灭菌即得。
10、在第三方面，本发明在防治水稻白叶枯病(xoo)、水稻细菌性条斑病(xoc)、柑橘溃疡病(xac)中的应用。
11、农药助剂包括但不限于：填料、载体、乳化剂、分散剂、湿润剂、崩解剂、粘结剂或增效剂中的一种或几种。
12、本发明的有益效果如下：
13、本发明提供的猫耳斜盖伞孢子悬液对水稻白叶枯病(xoo)有良好防效。
14、本发明提供的猫耳斜盖伞孢子悬液对水稻细菌性条斑病(xoc)有良好防效。
15、本发明提供的猫耳斜盖伞孢子悬液对柑橘溃疡病(xac)有良好防效。
16、本发明提供的猫耳斜盖伞孢子悬液制备条件简单，易于工业化生产及保存，具有良好的开发应用前景。
17、保藏信息：猫耳斜盖伞(clitopilus passeckerianus)菌株，该菌株于2024年7月8日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.41407，保藏地址为中国科学院微生物研究所。
1.一种猫耳斜盖伞(clitopilus passeckerianus)菌株，其特征在于：保藏编号为cgmcc no.41407。
2.权利要求1所述猫耳斜盖伞(clitopilus passeckerianus)菌株的制备方法，其特征在于：
3.一种猫耳斜盖伞孢子悬液，其特征在于：包括权利要求1所述的猫耳斜盖伞(clitopilus passeckerianus)菌株。
4.权利要求3所述的猫耳斜盖伞孢子悬液的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
5.根据权利4所述孢子悬液的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中产孢固体培养基按如下方法制备：
6.一种组合物，其特征在于：包括权利要求1所述的猫耳斜盖伞(clitopiluspasseckerianus)菌株或权利要求3所述的猫耳斜盖伞孢子悬液，以及助剂；所述组合物的剂型选自乳油、粉剂、可湿性粉剂、颗粒剂、水剂、悬浮剂、超低容量喷雾剂、可溶性粉剂、微胶囊剂、烟剂、水乳剂、水分散性粒剂。
7.权利要求1所述的猫耳斜盖伞(clitopilus passeckerianus)菌株、权利要求3所述的猫耳斜盖伞孢子悬液或权利要求6的组合物在防治植物细菌病害的用途，其特征在于：所述植物细菌病害为水稻白叶枯病、水稻细菌性条斑病、水稻基腐病、水稻褐条病、柑橘溃疡病、桃细菌性穿孔病、甘蓝黑腐病、番茄青枯病、烟草青枯病、甜瓜细菌性条斑病、大白菜软腐病和西瓜果腐病。
8.一种防治农业病虫害的方法，其特征在于：使权利要求1所述的猫耳斜盖伞(clitopilus passeckerianus)菌株、权利要求3所述的猫耳斜盖伞孢子悬液或权利要求6的组合物作用于有害物或生活环境，所述农业病虫害为植物细菌病害，所述植物细菌病害为水稻白叶枯病、水稻细菌性条斑病、水稻基腐病、水稻褐条病、柑橘溃疡病、桃细菌性穿孔病、甘蓝黑腐病、番茄青枯病、烟草青枯病、甜瓜细菌性条斑病、大白菜软腐病和西瓜果腐病。
9.用于保护植物免受农业病虫害侵害的方法，其包括使利要求1所述的猫耳斜盖伞(clitopiklus passeckerianus)菌株、权利要求3所述的猫耳斜盖伞孢子悬液或权利要求6的组合物与农业病虫害接触的方法步骤；所述业病虫害为植物细菌病害，所述植物细菌病害为水稻白叶枯病、水稻细菌性条斑病、水稻基腐病、水稻褐条病、柑橘溃疡病、桃细菌性穿孔病、甘蓝黑腐病、番茄青枯病、烟草青枯病、甜瓜细菌性条斑病、大白菜软腐病和西瓜果腐病。
