本发明属于医学，具体涉及一种基于steap-1的t细胞抗原表位肽及其用途。
背景技术：
1、前列腺癌是指发生于前列腺上皮组织的恶性肿瘤，是男性最常见的泌尿生殖系统肿瘤之一。前列腺六次跨膜蛋白1（six-transmembrane epithelial antigen of theprostate-l,steap-1）是由六个跨膜蛋白组成的细胞表面生物分子，连接着细胞内和细胞外循环。steapi含有339个氨基酸，分子量为39.72kda，位于染色体7g21.13由5个外显子和4个内含子组成。二级结构上，steap1蛋白在细胞侧质的6个跨膜结构域同时拥有n端和c端，表达于前列腺分泌上皮的细胞连接处，调节细胞间通讯，如调节小分子和离子如 na+，ca2+和k+等。steap-1蛋白首先发现在前列腺癌中高表达，除此之外，steap-1在胃癌、肺癌、卵巢癌和尤文氏肉瘤等肿瘤细胞中都有很高的表达，在这些癌症中steap1影响肿瘤细胞侵的袭转移和复发。与其他steap家族的蛋白不同，哺动物细胞上表达的steap1蛋白不具有金属还原酶活性，表明其具有尚未确定的功能。近年来，对steap的研究不断，针对steap为靶点治疗癌症的多种治疗方式层出不穷，如基因疫苗steap抗体和steap抑制剂。
2、表位疫苗是近年来一种新兴的疫苗，因其具有安全、无毒、稳定的优势而有望成为更高效的疫苗。表位疫苗是运用基因工程的手段，通过体外合成一段表位，将其与适合的载体联合使用的疫苗。外源物质进入机体会引起机体的免疫应答，而产生应答的基础就是抗原表位（epitope），它是决定抗原特异性的化学基团，又称为抗原决定簇。根据引起免疫应答的不同，可将表位分为t细胞表位、b细胞表位和兼具两种表位的多细胞表位。t细胞表位由主要组织相容性复合体i或ⅱ分子识别，递呈给t细胞表面的 tcr识别结合，按照识别的t细胞的类别，将表位分类为细胞毒t细胞表位(由cd8+细胞毒t细胞的tcr识别)和辅助性t细胞表位（由辅助性cd4+t细胞的 tcr 识别）。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供一种针对steap-1的t细胞抗原表位肽，该肽可引发相应分子特异性的ctl（细胞毒性t淋巴细胞），可用于人群中hla-a*2402阳性人群的肿瘤免疫。
2、为了实现上述目的，本发明采用的技术方案为：一种基于steap-1的t细胞抗原表位肽，其氨基酸序列如序列表seq id no.1所示。
3、本发明还提供了所述抗原表位肽的筛选方法，该方法包括：使用综合简单基序法（syfpeithi）和量化矩阵法（bimas）组合的mhc-肽结合算法来评估steap-1蛋白潜在的抗原表位，通过总评分选取排名前40的候选 ctl表位；将选出的候选 ctl表位同hla-a*2402的抗原结合槽在moe中进行分子对接，分析多肽和hla-a*2402分子之间的作用，将对接结果按能量排序，计算结合自由能，选取结合自由能前10的ctl表位肽作为候选表位肽；合成筛选得到的候选表位肽；通过候选表位肽与bmdc细胞共培养诱导出ctl，通过elispot检测ctls分泌ifn-γ的水平和ldh杀伤实验验证其抗肿瘤作用。
4、本发明还提供了所述抗原表位肽在制备杀伤高表达steap-1的肿瘤细胞的生物制品中的应用。
5、本发明还进一步提供了一种促进ctl抗肿瘤免疫应答的表位疫苗，所述表位疫苗包含所述的抗原表位肽。
6、本发明还进一步提供了杀伤高表达steap-1的肿瘤细胞的生物制品，所述生物制品中包含所述的抗原表位肽，或者利用所述抗原表位肽诱导活化的t细胞。
7、本发明根据steap-1的全场氨基酸序列和空间构象，通过综合多种免疫信息学的方法虚拟预测人群中hla-a*2402阳性限制型患者的t细胞表位肽；通过固相合成预测的候选表位肽，通过质谱等方法对表位肽进行纯化和鉴定；采用表位肽诱导活化 t 细胞；采用ldh 分析 ctl对靶细胞的杀伤效应，elispot等免疫学实验检测ctl分泌细胞因子的能力，鉴定出优势抗原表位，可作为抗原决定簇促进ctl细胞杀伤高表达steap-1的肿瘤细胞。
1.一种基于steap-1的t细胞抗原表位肽，其特征在于：其氨基酸序列如序列表seq idno.1所示。
2.如权利要求1所述的抗原表位肽的筛选方法，其特征在于，包括：
3.如权利要求1所述的抗原表位肽在制备杀伤高表达steap-1的肿瘤细胞的生物制品中的应用。
4.一种促进ctl抗肿瘤免疫应答的表位疫苗，其特征在于：所述表位疫苗中包含所述的抗原表位肽。
5.一种杀伤高表达steap-1的肿瘤细胞的生物制品，其特征在于：所述生物制品中包含所述的抗原表位肽，或者利用所述抗原表位肽诱导活化的t细胞。
