本发明涉及一种检测样品中溶剂残留的方法，具体涉及一种采用顶空气相色谱检测样品中多种溶剂残留的方法。
背景技术：
1、亚磷酰胺单体在小核酸原料药合成中占有重要地位，其纯度要求通常为≥99.0%，并且由于其结构复杂性，质量控制难度较高。目前，亚磷酰胺单体和磷酸盐等产品中存在溶剂残留，检测残留溶剂主要是核磁、高效液相色谱和顶空气相色谱三种方法。
2、然而，上述方法中核磁判断准确性比较差，高效液相色谱只能检测到一些紫外吸收波长在210~400nm之间的溶剂，没有紫外吸收的溶剂需要更换检测器，如elsd和cad等检测器，而且样品中也会有峰出现，其杂质和主峰可能会影响。
3、目前，我们生产的产品中，如亚磷酰胺单体、递送系统galnac系列以及荧光标记物等，使用的溶剂大概率有4种以上，如甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷、乙酸乙酯、正己烷、n-二甲基甲酰胺（下面以dmf表示）、正庚烷和四氢呋喃等，如果使用已有的方法，用核磁氢谱查看或者是用带elsd或者cad检测器的液相色谱检测均存在一些问题，具体如下：
4、（1）核磁氢谱溶剂出峰的位置经常会有样品峰的干扰，且理论上给出的化学位移和实际上做出来的氢的化学位移有较大的偏差；
5、（2）用带elsd或cad检测器去检测溶剂残留因为这两类检测器的灵敏度很低，无法精准的得出产品中溶剂的残留；而且样品以及样品中的杂质也会出峰，无法保证溶剂峰与样品及杂质峰之间能够完全分离；另外因为样品中溶剂残留一般在0.05%~15%之间，这就需要对样品进行高浓度的进样（一般在100mg/ml），对设备容易造成损伤。
6、因此，采用原有的方法，给准确快捷的检测出样品中的残留溶剂带来了不少困难，是亟待去解决的一个难题。
7、而顶空气相色谱，现有的文献有类似的检测溶剂残留的方法，不过一般都是同时能检测一个，或者两到三个溶剂残留，对于同时要检测多种溶剂残留较为困难。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供一种采用顶空气相色谱检测样品中多种溶剂残留的方法，解决了现有方法无法同时检测样品中甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷、乙酸乙酯、正己烷、n-n二甲基甲酰胺、正庚烷和四氢呋喃九个溶剂的残留的问题，该方法能够提供较低的检出限，且各溶剂峰之间的专一性良好，各目标溶剂峰出峰位置无其他杂质峰干扰，这对同时检测九种残留溶剂提供了精准高效的检测方法，填补了现有技术的缺陷。
2、为了达到上述目的，本发明提供了一种采用顶空气相色谱检测样品中多种溶剂残留的方法，该方法包含：
3、（1）配制标线溶液和分离度溶液
4、配制甲醇、乙醇、乙腈、二氯甲烷、乙酸乙酯、正己烷、n-n二甲基甲酰胺、正庚烷和四氢呋喃的混合溶剂标准溶液，用dmso稀释成20倍、200倍、1000倍、2000倍和10000倍的标线溶液；其中，用dmso稀释成20倍的溶液同时作为分离度溶液；
5、（2）采用顶空气相色谱对待检测样品进行检测
6、将待检测样品采用dmso溶解，配制待检测样品溶液；采用顶空气相色谱法及检测器依次检测所述标线溶液、待检测样品溶液；待标线溶液的气相色谱检测后，计算出每个溶剂的峰面积-浓度的标准曲线；将待测样品的溶剂残留分别带入到对应的标准曲线当中，得出溶剂的浓度，再与加入的待测样的质量相除，即为样品中溶剂的相对百分含量。
7、其中，所述顶空气相色谱法的条件，为：色谱柱选用超高惰性气相毛细色谱柱；柱温为程序升温，45~55℃，保持4~10 min，然后以10~12℃/min，升至130~140℃，保持0~5min，再以15~20℃/min，升至200~220℃，保持2~5 min；载体为惰性气体；进样量为1~5 μl；顶空平衡油浴温度为80~160℃；阀箱温度：150℃；进样口分流比为15~20：1；进样口温度为150~220℃；检测器温度为200~250℃；顶空进样器管路温度为160℃。
8、优选地，所述超高惰性气相毛细色谱柱的填料选自：苯基-甲基-聚硅氧烷、三氟丙基-甲基-聚硅氧烷、氰丙基-苯基-二甲基聚硅氧烷或二甲基聚硅氧烷。
9、更优选地，所述超高惰性气相毛细色谱柱的填料选自：50%苯基和50%二甲基聚硅氧烷、6%氰丙基苯基和94%二甲基聚硅氧烷。
10、优选地，所述超高惰性气相毛细色谱柱选自cp-volamine或zb-1。
11、优选地，所述惰性气体选自高纯氮气或高纯氦气。
12、优选地，所述载体的流速为1~2 ml/min。
13、优选地，所述顶空气相色谱法的条件中，样品预热平衡时间为25~32 min。
14、优选地，所述顶空气相色谱法的条件中，进样时间为45 s。
15、优选地，所述顶空气相色谱法采用的设备为安捷伦7890b，所用的顶空进样器为安捷伦g1888顶空进样器；或者，所述顶空气相色谱法采用的设备为thermo的trace1600，所用的顶空进样器为triplus500顶空进样器。
16、优选地，所述检测器选自fid、ecd、npd或fpd检测器。
17、本发明的采用顶空气相色谱检测样品中多种溶剂残留的方法，具有以下优点：
18、（1）本发明的方法能够提供较低的检出限，其中甲醇：6.028ppm；乙醇：6.074ppm；乙腈：6.012ppm；二氯甲烷：10.03ppm；乙酸乙酯：2.978ppm；正己烷：3.03ppm；正庚烷：1.55ppm；四氢呋喃：4.93ppm；dmf：3.00ppm，待测样品的溶剂含量定量限分别为甲醇：0.003%；乙醇：0.003%；乙腈：0.003%；二氯甲烷：0.005%；乙酸乙酯：0.0015%；正己烷：0.0015%；正庚烷：0.0008%；四氢呋喃：0.0025%；dmf：0.0015%，结果准确可靠；
19、（2）本发明的方法，各溶剂峰之间的专一性良好，各目标溶剂峰出峰位置无其他杂质峰干扰，这对同时检测九种残留溶剂提供了精准高效的检测方法，填补了现有技术的缺陷；
20、（3）本发明的方法能够在亚磷酰胺单体、亚磷酰胺原料、递送系统、核酸类、磷试剂以及荧光标记物等产品中对上述九种残留的溶剂进行检测；
21、（4）本发明的方法涉及的各种物料均为市售，简单易得，合成路线简短，操作简单，适合大多溶剂同时检测，节省人力和设备成本。目前尚没有方法可以同时检测多个常规溶剂组分，该方法对于检测行业对于同时检测多个组分研究和应用具有平台意义，同时也为检测行业提供了新的思路。该方法可以同时检测多个组分+其它底物，目前尚无文献或者专利进行报道，适用于化学、食品、中药等各个行业。
1.一种采用顶空气相色谱检测样品中多种溶剂残留的方法，其特征在于，该方法包含：
2.根据权利要求1所述的采用顶空气相色谱检测样品中多种溶剂残留的方法，其特征在于，所述超高惰性气相毛细色谱柱的填料选自：苯基-甲基-聚硅氧烷、三氟丙基-甲基-聚硅氧烷、氰丙基-苯基-二甲基聚硅氧烷或二甲基聚硅氧烷。
3.根据权利要求2所述的采用顶空气相色谱检测样品中多种溶剂残留的方法，其特征在于，所述超高惰性气相毛细色谱柱的填料选自：50%苯基和50%二甲基聚硅氧烷、6%氰丙基苯基和94%二甲基聚硅氧烷。
4.根据权利要求1所述的采用顶空气相色谱检测样品中多种溶剂残留的方法，其特征在于，所述超高惰性气相毛细色谱柱选自cp-volamine或zb-1。
5.根据权利要求1所述的采用顶空气相色谱检测样品中多种溶剂残留的方法，其特征在于，所述惰性气体选自高纯氮气或高纯氦气。
6.根据权利要求1所述的采用顶空气相色谱检测样品中多种溶剂残留的方法，其特征在于，所述载体的流速为1~2 ml/min。
7.根据权利要求1所述的采用顶空气相色谱检测样品中多种溶剂残留的方法，其特征在于，所述顶空气相色谱法的条件中，样品预热平衡时间为25~32 min。
8.根据权利要求1所述的采用顶空气相色谱检测样品中多种溶剂残留的方法，其特征在于，所述顶空气相色谱法的条件中，进样时间为45 s。
9.根据权利要求1所述的采用顶空气相色谱检测样品中多种溶剂残留的方法，其特征在于，所述顶空气相色谱法采用的设备为安捷伦7890b，所用的顶空进样器为安捷伦g1888顶空进样器；或者，所述顶空气相色谱法采用的设备为thermo的trace1600，所用的顶空进样器为triplus500顶空进样器。
10.根据权利要求1~9中任意一项所述的采用顶空气相色谱检测样品中多种溶剂残留的方法，其特征在于，所述检测器选自fid、ecd、npd或fpd检测器。
