本发明涉及生物医药领域。具体而言，本发明涉及一种特异性b7h3结合多肽及其用途。
背景技术：
0、发明背景
1、b7同系物3(b7h3，也称为cd276)是人15号染色体编码的i型跨膜蛋白。b7h3的细胞内尾部短，并且没有已知的信号转导基序。b7h3在物种间普遍表达。在人血清中也可检测到b7h3可溶形式，所述可溶形式由基质金属肽酶mmp从表面切割或通过内含子的可变剪接产生。
2、b7h3在抗原呈递细胞上被诱导并且在t细胞功能的抑制中起重要作用。b7h3蛋白质在正常组织、细胞中不表达或极低表达，却高表达于多种肿瘤组织，并与肿瘤的进展、患者的生存及预后密切相关。例如，许多研究已经描述了b7h3在人恶性肿瘤中的过表达，所述恶性肿瘤包括黑色素瘤、白血病、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、胰腺癌、结直肠癌和其它癌症。因此，b7h3可以作为一种新的肿瘤标志物和潜在的治疗靶点。本领域仍需要用于b7h3相关疾病如癌症的诊断剂和治疗剂。
技术实现思路
0、发明简述
1、本发明至少包含以下实施方案：
2、实施方案1.一种b7h3结合多肽，其包含至少一个特异性结合b7h3的免疫球蛋白单一可变结构域，所述至少一个免疫球蛋白单一可变结构域包含seq id no:1、5、9、13、17、21、25、29、33、37、41、45、49、53、57、61、65、69、73、77、81和85中任一中的cdr1、cdr2和cdr3。
3、实施方案2.实施方案1的b7h3结合多肽，其中所述至少一个免疫球蛋白单一可变结构域包含选自以下的cdr1、cdr2和cdr3：
4、(1)seq id no:2所示的cdr1，seq id no:3所示的cdr2，seq id no:4所示的cdr3；
5、(2)seq id no:6所示的cdr1，seq id no:7所示的cdr2，seq id no:8所示的cdr3；
6、(3)seq id no:10所示的cdr1，seq id no:11所示的cdr2，seq id no:12所示的cdr3；
7、(4)seq id no:14所示的cdr1，seq id no:15所示的cdr2，seq id no:16所示的cdr3；
8、(5)seq id no:18所示的cdr1，seq id no:19所示的cdr2，seq id no:20所示的cdr3；
9、(6)seq id no:22所示的cdr1，seq id no:23所示的cdr2，seq id no:24所示的cdr3；
10、(7)seq id no:26所示的cdr1，seq id no:27所示的cdr2，seq id no:28所示的cdr3；
11、(8)seq id no:30所示的cdr1，seq id no:31所示的cdr2，seq id no:32所示的cdr3；
12、(9)seq id no:34所示的cdr1，seq id no:35所示的cdr2，seq id no:36所示的cdr3；
13、(10)seq id no:38所示的cdr1，seq id no:39所示的cdr2，seq id no:40所示的cdr3；
14、(11)seq id no:42所示的cdr1，seq id no:43所示的cdr2，seq id no:44所示的cdr3；
15、(12)seq id no:46所示的cdr1，seq id no:47所示的cdr2，seq id no:48所示的cdr3；
16、(13)seq id no:50所示的cdr1，seq id no:51所示的cdr2，seq id no:52所示的cdr3；
17、(14)seq id no:54所示的cdr1，seq id no:55所示的cdr2，seq id no:56所示的cdr3；
18、(15)seq id no:58所示的cdr1，seq id no:59所示的cdr2，seq id no:60所示的cdr3；
19、(16)seq id no:62所示的cdr1，seq id no:63所示的cdr2，seq id no:64所示的cdr3；
20、(17)seq id no:66所示的cdr1，seq id no:67所示的cdr2，seq id no:68所示的cdr3；
21、(18)seq id no:70所示的cdr1，seq id no:71所示的cdr2，seq id no:72所示的cdr3；
22、(19)seq id no:74所示的cdr1，seq id no:75所示的cdr2，seq id no:76所示的cdr3；
23、(20)seq id no:78所示的cdr1，seq id no:79所示的cdr2，seq id no:80所示的cdr3；
24、(21)seq id no:82所示的cdr1，seq id no:83所示的cdr2，seq id no:84所示的cdr3；和
25、(22)seq id no:86所示的cdr1，seq id no:87所示的cdr2，seq id no:88所示的cdr3。
26、实施方案3.实施方案1或2的b7h3结合多肽，其中所述免疫球蛋白单一可变结构域包含与seq id no:1、5、9、13、17、21、25、29、33、37、41、45、49、53、57、61、65、69、73、77、81和85中任一所示的氨基酸序列具有至少80％、优选地至少90％、更优选地至少95％、甚至更优选地至少99％序列相同性的氨基酸序列。
27、实施方案4.实施方案1-3中任一项的b7h3结合多肽，其中所述免疫球蛋白单一可变结构域包含seq id no:1、5、9、13、17、21、25、29、33、37、41、45、49、53、57、61、65、69、73、77、81和85中任一所示的氨基酸序列。
28、实施方案5.实施方案1-4中任一项的b7h3结合多肽，其中所述免疫球蛋白单一可变结构域是vhh。
29、实施方案6.实施方案1-5中任一项的b7h3结合多肽，其中所述免疫球蛋白单一可变结构域是人源化的。
30、实施方案7.核酸分子，其编码实施方案1-6中任一项的b7h3结合多肽。
31、实施方案8.表达载体，其包含与表达调控元件可操作地连接的实施方案7的核酸分子。
32、实施方案9.宿主细胞，其包含实施方案7的核酸分子或以实施方案8的表达载体转化，并能够表达所述b7h3结合多肽。
33、实施方案10.产生实施方案1-6中任一项的b7h3结合多肽的方法，包括：
34、a)在允许所述b7h3结合多肽表达的条件下培养实施方案9的宿主细胞；
35、b)从得自步骤a)的培养物回收由所述宿主细胞表达的b7h3结合多肽；及
36、c)任选进一步纯化和/或修饰得自步骤b)的b7h3结合多肽。
37、实施方案11.一种缀合分子，其包含实施方案1-6任一项的b7h3结合多肽，以及与所述b7h3结合多肽缀合的至少一种可检测标记和/或治疗性部分。
38、实施方案12.实施方案11的缀合分子，其中
39、所述可检测标记选自放射性核素、荧光剂、化学发光剂、生物发光剂、顺磁离子和酶；或
40、所述治疗性部分选自放射性核素、紫杉醇、细胞松弛素b、短杆菌肽d、溴化乙啶、吐根碱、丝裂霉素、表鬼臼毒吡喃葡糖苷、表鬼臼毒噻吩糖苷、长春新碱、长春碱、秋水仙素、阿霉素、柔红霉素、二羟基炭疽菌素二酮、米托蒽醌、光辉霉素、放线菌素d、1-脱氢睾酮、糖皮质激素、普鲁卡因、丁卡因、利多卡因、普萘洛尔、嘌呤霉素、氨甲喋呤、6-巯基嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、阿糖胞苷、5-氟尿嘧啶、氨烯咪胺、倍癌霉素、刺孢霉素、美坦生、阿里他汀、氮芥、苯丁酸氮芥、苯丙氨酸氮芥、卡莫司汀(bsnu)和洛莫司汀(ccnu)、环磷酰胺、白消安、二溴甘露糖醇、链唑霉素、丝裂霉素c、顺-二氯二胺合铂(ii)(ddp)顺铂、博来霉素、安曲霉素、相思豆毒蛋白、蓖麻毒蛋白a、假单胞菌外毒素、白喉毒素、肿瘤坏死因子、干扰素-γ、淋巴因子、白介素-1(“il-1”)、白介素-2(“il-2”)、白介素-6(“il-6”)、白介素-10(“il-10”)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(“gm-csf”)、粒细胞集落刺激因子(“g-csf”)或ifn。
41、实施方案13.实施方案12的缀合分子，其中所述放射性核素选自110in、111in、177lu、18f、52fe、62cu、64cu、67cu、67ga、68ga、68ge、86y、90y、89zr、94mtc、99mtc、120i、123i、124i、125i、131i、154-158gd、32p、11c、13n、15o、186re、188re、51mn、52mmn、55co、72as、75br、76br、82mrb、83sr或其它γ-、β-、或正电子发射体，例如，所述可检测标记为68ga或177lu。
42、实施方案14.实施方案12-13中任一项的缀合分子，其中所述b7h3结合多肽通过螯合剂与所述放射性核素缀合。
43、实施方案15.实施方案14的缀合分子，其中所述螯合剂选自dtpa、edta、nota、dota、trap、teta、neta、cb-te2a、cyclen、cyclam、bispidine、tacn、atsm、sarar、ambasar、mag3、mag2、hynic、dadt、ec、ns3、h2dedpa、hbed、dfo、pepa或者heha及其衍生物。
44、实施方案16.实施方案15的缀合分子，其中所述可检测标记是99mtc，或者所述放射性核素是177lu且所述螯合剂为dota。
45、实施方案17.一种检测生物学样品中b7h3的存在和/或量的方法，包括：
46、a)在实施方案1-6中任一项的b7h3结合多肽或实施方案11-16中任一项的缀合分子与b7h3之间能够形成复合物的条件下，使所述生物学样品和对照样品接触实施方案1-6中任一项的b7h3结合多肽或实施方案11-16中任一项缀合分子；
47、b)检测复合物的形成，
48、其中所述生物学样品与对照样品之间复合物形成的差异指示样品中b7h3的存在和/或量。
49、实施方案18.一种用于检测和/或诊断b7h3相关疾病例如癌症的诊断剂，其包含实施方案1-6中任一项的b7h3结合多肽和/或实施方案11-15中任一项的缀合分子，以及任选的生理学上可接受的载体。
50、实施方案19.实施方案18的诊断剂，其中所述诊断剂是造影剂。
51、实施方案20.实施方案19的诊断剂，其是造影剂。
52、实施方案21.实施方案20的诊断剂，其中所述造影剂是ect造影剂，例如spect造影剂或pet造影剂。
53、实施方案22.实施方案1-6中任一项的b7h3结合多肽和/或实施方案11-16中任一项的缀合分子在制备用于检测和/或诊断b7h3相关疾病例如癌症的诊断剂中的用途。
54、实施方案23.实施方案22的用途，其中所述诊断剂是造影剂。
55、实施方案24.实施方案23的用途，其是造影剂。
56、实施方案25.实施方案24的用途，其中所述造影剂是ect造影剂，例如spect造影剂或pet造影剂。
57、实施方案26.一种在对象中检测和/或诊断b7h3相关疾病例如癌症或炎症疾病的方法，包括给所述对象施用实施方案1-6中任一项的b7h3结合多肽和/或实施方案11-16中任一项的缀合分子和/或实施方案18-21中任一项的诊断剂。
58、实施方案27.实施方案26的方法，还包括对所述对象进行成像例如ect成像的步骤。
59、实施方案28.实施方案27的方法，所述ect成像是spect成像，或者所述ect成像是pet成像。
60、实施方案29.实施方案18-21中任一项的诊断剂、实施方案22-25中任一项的用途或实施方案26-28中任一项的方法，其中所述b7h3相关疾病是癌症，例如所述癌症选自黑色素瘤、白血病、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、胰腺癌、结直肠癌、子宫内膜癌、口腔鳞状细胞癌、宫颈癌、肺癌如非小细胞肺癌、膀胱癌、透明细胞肾细胞癌和胶质瘤(例如少突神经胶质瘤、间变性星形细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤(gbm)、室管膜瘤和内生性脑桥胶质瘤(dipg))。
1.一种b7h3结合多肽，其包含至少一个特异性结合b7h3的免疫球蛋白单一可变结构域，所述至少一个免疫球蛋白单一可变结构域包含seq id no:1、5、9、13、17、21、25、29、33、37、41、45、49、53、57、61、65、69、73、77、81和85中任一中的cdr1、cdr2和cdr3。
2.权利要求1的b7h3结合多肽，其中所述至少一个免疫球蛋白单一可变结构域包含选自以下的cdr1、cdr2和cdr3：
3.权利要求1或2的b7h3结合多肽，其中所述免疫球蛋白单一可变结构域包含与seq idno:1、5、9、13、17、21、25、29、33、37、41、45、49、53、57、61、65、69、73、77、81和85中任一所示的氨基酸序列具有至少80％、优选地至少90％、更优选地至少95％、甚至更优选地至少99％序列相同性的氨基酸序列。
4.权利要求1-3中任一项的b7h3结合多肽，其中所述免疫球蛋白单一可变结构域包含seq id no:1、5、9、13、17、21、25、29、33、37、41、45、49、53、57、61、65、69、73、77、81和85中任一所示的氨基酸序列。
5.权利要求1-4中任一项的b7h3结合多肽，其中所述免疫球蛋白单一可变结构域是vhh。
6.权利要求1-5中任一项的b7h3结合多肽，其中所述免疫球蛋白单一可变结构域是人源化的。
7.核酸分子，其编码权利要求1-6中任一项的b7h3结合多肽。
8.表达载体，其包含与表达调控元件可操作地连接的权利要求7的核酸分子。
9.宿主细胞，其包含权利要求7的核酸分子或以权利要求8的表达载体转化，并能够表达所述b7h3结合多肽。
10.产生权利要求1-6中任一项的b7h3结合多肽的方法，包括：
11.一种缀合分子，其包含权利要求1-6任一项的b7h3结合多肽，以及与所述b7h3结合多肽缀合的至少一种可检测标记和/或治疗性部分。
12.权利要求11的缀合分子，其中
13.权利要求12的缀合分子，其中所述放射性核素选自110in、111in、177lu、18f、52fe、62cu、64cu、67cu、67ga、68ga、68ge、86y、90y、89zr、94mtc、99mtc、120i、123i、124i、125i、131i、154-158gd、32p、11c、13n、15o、186re、188re、51mn、52mmn、55co、72as、75br、76br、82mrb、83sr或其它γ-、β-、或正电子发射体，例如，所述可检测标记为68ga或177lu。
14.权利要求12-13中任一项的缀合分子，其中所述b7h3结合多肽通过螯合剂与所述放射性核素缀合。
15.权利要求14的缀合分子，其中所述螯合剂选自dtpa、edta、nota、dota、trap、teta、neta、cb-te2a、cyclen、cyclam、bispidine、tacn、atsm、sarar、ambasar、mag3、mag2、hynic、dadt、ec、ns3、h2dedpa、hbed、dfo、pepa或者heha及其衍生物。
16.权利要求15的缀合分子，其中所述可检测标记是99mtc，或者所述放射性核素是177lu且所述螯合剂为dota。
17.一种检测生物学样品中b7h3的存在和/或量的方法，包括：
18.一种用于检测和/或诊断b7h3相关疾病例如癌症的诊断剂，其包含权利要求1-6中任一项的b7h3结合多肽和/或权利要求11-15中任一项的缀合分子，以及任选的生理学上可接受的载体。
19.权利要求18的诊断剂，其中所述诊断剂是造影剂。
20.权利要求19的诊断剂，其是造影剂。
21.权利要求20的诊断剂，其中所述造影剂是ect造影剂，例如spect造影剂或pet造影剂。
22.权利要求1-6中任一项的b7h3结合多肽和/或权利要求11-16中任一项的缀合分子在制备用于检测和/或诊断b7h3相关疾病例如癌症的诊断剂中的用途。
23.权利要求22的用途，其中所述诊断剂是造影剂。
24.权利要求23的用途，其是造影剂。
25.权利要求24的用途，其中所述造影剂是ect造影剂，例如spect造影剂或pet造影剂。
26.一种在对象中检测和/或诊断b7h3相关疾病例如癌症或炎症疾病的方法，包括给所述对象施用权利要求1-6中任一项的b7h3结合多肽和/或权利要求11-16中任一项的缀合分子和/或权利要求18-21中任一项的诊断剂。
27.权利要求26的方法，还包括对所述对象进行成像例如ect成像的步骤。
28.权利要求27的方法，所述ect成像是spect成像，或者所述ect成像是pet成像。
29.权利要求18-21中任一项的诊断剂、权利要求22-25中任一项的用途或权利要求26-28中任一项的方法，其中所述b7h3相关疾病是癌症，例如所述癌症选自黑色素瘤、白血病、乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、胰腺癌、结直肠癌、子宫内膜癌、口腔鳞状细胞癌、宫颈癌、肺癌如非小细胞肺癌、膀胱癌、透明细胞肾细胞癌和胶质瘤(例如少突神经胶质瘤、间变性星形细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤(gbm)、室管膜瘤和内生性脑桥胶质瘤(dipg))。
