一种多用途细胞及微粒筛选针的制作方法

    技术2022-07-13  81


    本实用新型涉及一种筛选针,尤其涉及一种多用途细胞及微粒筛选针,属于医疗设备技术领域。



    背景技术:

    普遍使用的细胞培养体系包含液态体系、半固态体系及固态体系。在细胞及分子实验中,目标细胞系的构建是一个很重要的流程。在原代细胞培养中,培养体系中有多种细胞并存,不同细胞有不同的生长规律及速度;在克隆筛选中,转染及转化后的细胞需要通过不同的标记表达进行纯化筛选。传统的筛选手段包括化学消化法,使用胰酶及胶原蛋白酶对贴壁细胞进行差时消化,根据不同细胞对培养皿的铁壁面积及表面承受能力进行,通过消化时差获得不同种类的细胞,缺点极为明显,不同种类细胞之间的承受差距并不明显,其次,经过酶处理后的细胞膜表面遭受严重的破坏,会导致其贴壁生长等生理功能受损;另一种筛选方式为无限稀释后扩大培养,再通过流式细胞仪等技术手段进行筛选、扩大培养,获得目的细胞的单克隆群,该法过于耗费时间,且大多数情况下,单细胞难以形成克隆群。



    技术实现要素:

    本实用新型要解决的技术问题是:提供一种多用途细胞及微粒筛选针,可对目标细胞进行挑选,避免了化学消化对目标细胞的伤害;在实际应用中,使用该装置成功在f2代分离了胎儿肾组织培养的成纤维细胞和上皮细胞,通常化学消化法需要在4-5代才能获取纯化肾组织上皮;应用成功的原代细胞纯化还包括牦牛乳腺上皮细胞、胎鼠心脏内皮细胞;使用该装置还成功挑选了小鼠单精子细胞,挑选速率为25±4条/min,容错率为98%。使用去除性筛选功能,成功在f1代纯化了胎牛眼角膜上皮细胞,解决了上述存在的问题。

    本实用新型的技术方案为:一种多用途细胞及微粒筛选针,它包括胶吸头,所述胶吸头的端部活动套接有圆柱管体,所述圆柱管体的端部通过直管段一固定连接有直管段二,所述直管段二通过直管段三固定连接有直管段四,所述直管段四的端部有开口,直管段一、直管段二、直管段三和直管段四的轴线均在同一个平面上并呈带开口的环框状结构,所述圆柱管体的轴线与平面的夹角为30~45度,开口与胶吸头连通。

    所述圆柱管体、直管段一、直管段二、直管段三和直管段四为玻璃毛细管圆滑过渡连接而成一个整体,其内径为1~4mm,壁厚为0.5~1mm。

    所述圆柱管体的长度为50~80mm。

    所述直管段一的长度为5~10mm,直管段一与圆柱管体的夹角为90~165°。

    所述直管段二的长度为5~15mm,直管段二与直管段一的夹角为90~165°。

    所述直管段三的长度为3~8mm,直管段三与直管段二的夹角为15~75°。

    所述直管段四的长度为2~5mm,直管段四与直管段三的夹角为10~90°。

    本实用新型的有益效果是:与现有技术相比,采用本实用新型的技术方案,本实用新型使用机械法可对目标细胞进行挑选,避免了化学消化对目标细胞的伤害;在实际应用中,使用该装置成功在f2代分离了胎儿肾组织培养的成纤维细胞和上皮细胞,通常化学消化法需要在4-5代才能获取纯化肾组织上皮;应用成功的原代细胞纯化还包括牦牛乳腺上皮细胞、胎鼠心脏内皮细胞;使用该装置还成功挑选了小鼠单精子细胞,挑选速率为25±4条/min,容错率为98%。使用去除性筛选功能,成功在f1代纯化了胎牛眼角膜上皮细胞,取得了很好的使用效果。

    附图说明

    图1为本实用新型结构示意图;

    图2为本实用新型俯视图。

    具体实施方式

    为使本实用新型的目的、技术方案和优点更加清楚,下面将参照本说明书附图对本实用新型作进一步的详细描述。

    实施例1:如附图1~2所示,一种多用途细胞及微粒筛选针,它包括胶吸头1,所述胶吸头1的端部活动套接有圆柱管体2,所述圆柱管体2的端部通过直管段一3固定连接有直管段二4,所述直管段二4通过直管段三5固定连接有直管段四7,所述直管段四7的端部有开口6,直管段一3、直管段二4、直管段三5和直管段四7的轴线均在同一个平面上并呈带开口的环框状结构,所述圆柱管体2的轴线与平面的夹角为30~45度,开口6与胶吸头1连通。

    进一步的,圆柱管体2、直管段一3、直管段二4、直管段三5和直管段四7为玻璃毛细管圆滑过渡连接而成一个整体,其内径为1~4mm,壁厚为0.5~1mm,优选内径为1mm,厚度为0.5mm。

    进一步的,圆柱管体2的长度为50~80mm,

    进一步的,直管段一3的长度为5~10mm,优选长度为5mm,直管段一3与圆柱管体2的夹角为90~165°,优选为150°±10°。

    进一步的,直管段二4的长度为5~15mm,优选参数为5mm,直管段二4与直管段一3的夹角为90~165°。

    进一步的,直管段三5的长度为3~8mm,优选为3mm,直管段三5与直管段二4的夹角为15~75°,优选为30°±10°。

    进一步的,直管段四7的长度为2~5mm,优选为2mm,直管段四7与直管段三5的夹角为10~90°,优选为30±10°,直管段四7的开口6需经过火焰灼烧成圆滑过渡口形状。

    直管段二4可根据需要设计为不同的长度尺寸,可根据目标细胞生长密度进行调整选取合适尺寸的筛选针,如目标细胞群较小,可根据细胞群的最大宽度进行选取,一般在100mm培养皿中使用该装置,长度可在5-15mm,优选参数为5mm;该部位起细胞刮刀的作用,可将目标区域细胞框选在平面环框状结构内,使用直管段二4刮取细胞即可,使用方便。

    本实用新型的制作及使用方法为:

    1、该针制作方便,可以在实验室使用点样的毛细玻璃管自行制作,制作过程简单,使用酒精灯进行灼烧弯成需要的角度即可;灼烧完成后,按照手术及细胞操作无菌器械需求进行高压灭菌后,再在圆柱管体2的端部套接上胶吸头1,即可使用;

    2、使用过程中,在倒置显微镜下寻找到目标区域的细胞,将灭菌后的该装置取出,手持圆柱管体2的端部,将目标区域框定在平面环框中,轻轻往后拉动刮取目标细胞;

    3、待目标细胞刮取成功后,控制胶吸头1轻轻吸取刮取的细胞群或团块,转移到稀释培养基中,吹打稀释后扩大培养;

    4、该装置也可以针对较难培养的细胞进行纯化。使用过程中,可以使用该装置对杂细胞进行反复去除,以扩大目标细胞的生长空间,免去刮取对目标细胞的伤害;

    5、单细胞筛选。将细胞或精子进行一定量的稀释后,使用该装置可进行单细胞挑选。

    本实用新型使用机械法可对目标细胞进行挑选,避免了化学消化对目标细胞的伤害;在实际应用中,使用该装置成功在f2代分离了胎儿肾组织培养的成纤维细胞和上皮细胞,通常化学消化法需要在4-5代才能获取纯化肾组织上皮;应用成功的原代细胞纯化还包括牦牛乳腺上皮细胞、胎鼠心脏内皮细胞;使用该装置还成功挑选了小鼠单精子细胞,挑选速率为25±4条/min,容错率为98%。使用去除性筛选功能,成功在f1代纯化了胎牛眼角膜上皮细胞。

    本实用新型未详述之处,均为本技术领域技术人员的公知技术。最后说明的是,以上实施例仅用以说明本实用新型的技术方案而非限制,尽管参照较佳实施例对本实用新型进行了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本实用新型的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本实用新型技术方案的宗旨和范围,其均应涵盖在本实用新型的权利要求范围当中。


    技术特征:

    1.一种多用途细胞及微粒筛选针,它包括胶吸头(1),其特征在于:所述胶吸头(1)的端部活动套接有圆柱管体(2),所述圆柱管体(2)的端部通过直管段一(3)固定连接有直管段二(4),所述直管段二(4)通过直管段三(5)固定连接有直管段四(7),所述直管段四(7)的端部有开口(6),直管段一(3)、直管段二(4)、直管段三(5)和直管段四(7)的轴线均在同一个平面上并呈带开口的环框状结构,所述圆柱管体(2)的轴线与平面的夹角为30~45度,开口(6)与胶吸头(1)连通。

    2.根据权利要求1所述的多用途细胞及微粒筛选针,其特征在于:所述圆柱管体(2)、直管段一(3)、直管段二(4)、直管段三(5)和直管段四(7)为玻璃毛细管圆滑过渡连接而成一个整体,其内径为1~4mm,壁厚为0.5~1mm。

    3.根据权利要求1或2所述的多用途细胞及微粒筛选针,其特征在于:所述圆柱管体(2)的长度为50~80mm。

    4.根据权利要求1或2所述的多用途细胞及微粒筛选针,其特征在于:所述直管段一(3)的长度为5~10mm,直管段一(3)与圆柱管体(2)的夹角为90~165°。

    5.根据权利要求1或2所述的多用途细胞及微粒筛选针,其特征在于:所述直管段二(4)的长度为5~15mm,直管段二(4)与直管段一(3)的夹角为90~165°。

    6.根据权利要求1或2所述的多用途细胞及微粒筛选针,其特征在于:所述直管段三(5)的长度为3~8mm,直管段三(5)与直管段二(4)的夹角为15~75°。

    7.根据权利要求1或2所述的多用途细胞及微粒筛选针,其特征在于:所述直管段四(7)的长度为2~5mm,直管段四(7)与直管段三(5)的夹角为10~90°。

    技术总结
    本实用新型公开了一种多用途细胞及微粒筛选针,它包括胶吸头,所述胶吸头的端部活动套接有圆柱管体,所述圆柱管体的端部通过直管段一固定连接有直管段二,所述直管段二通过直管段三固定连接有直管段四,所述直管段四的端部有开口,直管段一、直管段二、直管段三和直管段四的轴线均在同一个平面上并呈带开口的环框状结构,所述圆柱管体的轴线与平面的夹角为30~45度,开口与胶吸头连通。本实用新型可方便对目标细胞进行挑选,避免了化学消化对目标细胞的伤害;使用去除性筛选功能,成功在F1代纯化了胎牛眼角膜上皮细胞,取得了很好的使用效果。

    技术研发人员:朱建国;陈伟明;罗福;谭宗建;江克华;袁东波;陈朝军;刘人杰;陈玉竹;陈慰清;张永强;王蔚;刘章诚;朱国华;胡彬;陈潇月;雷薇
    受保护的技术使用者:贵州省人民医院
    技术研发日:2019.07.12
    技术公布日:2020.04.03

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